摘要
目的研究海洋来源天然产物金黄霉素A(Chr-A)抗神经炎症作用及机制。方法ip给予LPS 5 mg·kg^(-1)构建小鼠神经炎症模型,LPS 200μg·L^(-1)刺激BV2小胶质细胞构建炎症反应细胞模型。RNA-seq转录组分析小鼠脑皮质中的差异基因;通过Metascape在线平台(https://metascape.org/)和String在线平台(https://string-db.org/)对Chr-A调控的差异基因进行富集分析和PPI分析。ELISA法检测细胞炎症因子的含量;Western印迹法和RT-PCR检测炎症相关mRNA和蛋白的表达。结果RNA-seq结果进行差异基因(DEGs)分析(FC>1.5,P<0.05),发现LPS模型组与正常对照组相比较有639个DEGs,Chr-A给药组和LPS模型组相比较有113个DEGs,综合分析发现与Chr-A调控LPS诱导神经炎症相关的70个DEGs;GO富集分析表明Chr-A抗神经炎症可能与response to cytokine,cellular response to cytokine stimulus和regulation of immune system process等生物过程密切相关;KEGG富集分析表明Chr-A发挥抗神经炎症作用可能与涉及到TNF signaling pathway,cytokine-cytokine receptor interaction,NF-κB signaling pathway,IL^(-1)7 signaling pathway和NOD-like receptor signaling pathway等信号通路。应用RT-PCR进行深入验证,发现小鼠脑皮质中TNF-α,I L-6,I L^(-1)β,CCL2和NLRP3的mRNA表达水平的结果与RNA-seq一致。此外,Chr-A显著降低小鼠脑皮质中炎症因子IL-6,IL^(-1)β,IL^(-1)7,TNF-α,GM-CSF,CXCL12和MCP-1的水平,抑制COX2、NLRP3和活化胱天蛋白酶1蛋白的表达。在LPS刺激BV2细胞炎症反应模型上,Chr-A显著降低细胞上清中NO,IL-6,IL^(-1)β,TNF-α和MCP-1的含量,下调COX2、NLRP3和活化胱天蛋白酶1等蛋白的表达。结论Chr-A具有抗神经炎症作用,其机制可能与下调NLRP3/活化胱天蛋白酶1信号通路相关。
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2021年第10期746-747,共2页
Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology
基金
国家重点研发计划(2018YFC0311005)。
