摘要
目的:观察铜绿假单胞菌外膜囊泡(OMVs)对肺上皮细胞分泌细胞因子的影响。方法:培养肺上皮细胞BEAS–2B,采用1、10和30μg·mL^-1浓度OMVs刺激12、16或24 h,实时定量聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF–α)和白细胞介素8(IL–8)和mRNA表达。ELISA检测培养上清TNF–α和IL–8分泌的变化;提取核蛋白,采用ELISA测定OMVs处理前后核因子κB(NF–κB)活性,并采用NF–κB抑制剂处理细胞,观察对OMVs诱导TNF–α和IL–8分泌的影响。结果:采用1μg·mL^-1、10μg·mL^-1和30μg·mL^-1 OMVs处理BEAS–2B细胞12 h后,TNF–α和IL–8的mRNA水平均高于阴性对照组,呈一定的剂量依赖性。30μg·mL^-1 OMVs作用细胞4 h后即可上调TNF–α和IL–8 mRNA表达,并持续至16 h。30μg·mL^-1 OMVs处理细胞后,NF–κB的活性明显增强,NF–κB抑制剂(PDTC)预处理细胞后,TNF–α和IL–8分泌水平降低。结论:OMVs可诱导BEAS–2B表达TNF–α和IL–8,其机制可能与激活NF–κB有关。
出处
《深圳中西医结合杂志》
2019年第22期19-20,共2页
Shenzhen Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine
