摘要
目的探讨核磷蛋白（NPM）在肝癌细胞多药耐药中的作用及其机制。方法通过质粒转染建立稳定的高表达NPM的肝癌细胞株：HepG2／NPM和SMMC7721／NPM细胞株，通过细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞对化疗药物的半数抑制浓度（IC50）值；划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力；Westernblot和实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测各基因的蛋白和mRNA表达。结果与亲本细胞比较，NPM高表达的细胞对化疗药物的耐药性增加，阿霉素（ADM：8．31±0．89比0．38±0．13，P=0．000；14．84±1．61比1．69±0．31，P=0．001），顺铂（DDP：4．23±1．18比1．33±0．29，P=0．047；8．42±0．85比3．03±0．55，P：0．000），5-氟尿嘧啶（5-Fu：20．75±1．02比7．97±0．97，P=0．001；16．28±1．64比5．85±1．04，P=0．000），细胞的迁移和侵袭能力增强，且多药耐药基因1（MDR-1：3．85±0．67比0．97±0．22，P=0．043；4．33±0．77比1．04±0．27，P=0．021），多药耐药相关蛋白1（MRP-1：3．76±1．04比1．01±0．21，P=0．033；4．75±0．88比1．01±0．17，P=0．028）及P．糖蛋白（P-gP：2．06±0．27比1．04±0．19，P=0．000；3．47±0．93比1．02±0．17，P=0．000）的表达均增加。结论NPM可以增强肝癌细胞对化疗药物的耐药性以及迁移和侵袭能力，其机制可能与上调MDR-1／P-gP信号通路的表达相关。
Objective To explore the mechanism of nucleophosmln （NPM） in HCC cells. Methods pEGFP/NPM was synthesized and transfected into HepG2 and SMMC7721 to stable high - expression NPM HCC cell lines. Cell counting kit - 8 （ CCK - 8） assay was applied to detect cell viability; Wound assay and Transwell assay were used to detecte cell migration and invasion ability; the protein and mRNA expression of related genes were detected by Western blotting and real - time quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR）. Results Cell viability [adriamycin （ADM） ： 8.31 ±0.89 vs. 0.38 s0. 13, P=0. O00; 14.84±1.61 vs. 1.69±0.31, P=0.001; cisplatin （DDP）：4.23＋1.18vs. 1.33±0.29, P=0.047; 8.42＋0.85 vs. 3.03 ±0.55, P=0.000, 5 -fluorouracil （5 -Fu）： 20. 75 ±1.02 vs. 7.97 ± 0. 97, P = 0. 1301 ; 16. 28 ± 1.64 vs. 5, 85 ± 1, 04, P = 0. 000 ] , invasion and migration were in- creased in high - expression NPM HCC cell lines, and the expression of multidrug resistance 1 gene （MDR1 -1.3.85 ±0.67 vs. 0,97 ±0.22, P=0.043; 4.33 ±0.77 vs. 1.04±0.27, P=0.021）, mul- tidrug resistance - associated protein 1 （ MRP - 1 ： 3.76 ± 1, 04 vs. 1.01 ± 0. 21, P = 0. 033 ; 4. 75 ± 0. 88 vs. 1.01 ± 0. 17, P ± 0. 028 ） and permeability glycoprotein （ P - gp ： 2. 06 ± 0. 27 vs. 1.04 ± 0. 19, P = 0. 0130 ; 3.47 ± 0.93 vs. 1.02 ±： 0. 17, P = 0. 0130） were increased. Conclusion NPM HCC cell lines expressed increased resistance to chemotherapeutic drugs, enhanced migration and invasion ability, and increased expression of MDR - 1, MRP - 1 and P - gp.
作者
李辉宇
付西峰
贺杰峰
田彦璋
朱军军
赵浩亮
Li Huiyu;Fu Xifeng;He Jiefeng;Tian Yanzhang;Zhu Junjun;Zhao Haoliang(Department of General Surgery,Shanxi Academy of Medical Sciences,Shanxi Dayi Hospital,Taiyuan 030032,China)
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期1852-1854,共3页
Chinese Journal of Experimental Surgery
基金
山西省基础研究项目（青年科技研究基金）（2011021035.3）
山西省卫生厅科技攻关计划项目（200810）
关键词
肝癌
多药耐药
核磷蛋白
P-糖蛋白
Hepatocellular carcinoma
Multidrug resistance
Nucleophosmin
Permeability glycoprotein
