摘要
目的探讨白细胞介素(IL)-17对老年类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞增殖和趋化因子分泌的影响及作用机制。方法选取行关节置管术的老年RA患者,从术中切除的新鲜滑膜组织中分离滑膜成纤维细胞进行培养。3-(4,5-二甲噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测IL-17对细胞增殖的影响;蛋白芯片试剂盒检测滑膜成纤维细胞上清液趋化因子[中性粒细胞激活肽(ENA)-78、IL-8、生长相关癌基因(GRO)、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1]的水平;流式细胞术检测滑膜成纤维细胞表面IL-17受体(IL-17R)的表达。在成纤维样滑膜细胞中分别加入MEK1/2信号通路抑制剂(PD98059)、核转录因子(NF)-κB信号通路抑制剂(LY294002)、STAT3信号通路抑制剂(AG490)、RANKL信号通路抑制剂(小白菊内酯),孵育60 min后加IL-17刺激72 h,荧光定量PCR法检测ENA-78、IL-8、GRO、MCP-1 mRNA表达水平。结果 IL-17对滑膜成纤维细胞各时间点刺激指数差异均有统计学意义(P<0.05),其中刺激72 h滑膜成纤维细胞增殖能力最强。IL-17刺激滑膜成纤维细胞48 h后,滑膜成纤维细胞分泌的ENA-78、IL-8、GRO、MCP-1水平均明显高于对照组(P<0.05)。流式细胞术显示,加入抗IL-17R抗体组IL-17R表达水平明显高于同型对照组(P<0.05)。滴加PD98059、LY294002、AG490后,ENA-78、IL-8、GRO、MCP-1 mRNA表达量均明显低于空白对照组(P<0.05);而滴加小白菊内酯后与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-17可促进老年RA成纤维样滑膜细胞增殖及趋化因子表达;IL-17可能通过MEK1/2、NF-κB、STAT3信号通路诱导滑膜成纤维细胞趋化因子表达。
出处
《中国老年学杂志》
CAS
北大核心
2018年第1期45-47,共3页
Chinese Journal of Gerontology
