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原料乳中金黄色葡萄球菌环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立及应用 被引量:10

Establishment and application of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) of Staphylococcus aureus in raw milk
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摘要 为了建立原料乳中金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)在保守区域设计特异性引物,建立LAMP检测方法,并用于原料乳中金黄色葡萄球菌的快速检测。结果表明,针对金黄色葡萄球菌的基因组DNA,使用设计合成的4条引物和建立的LAMP方法能够有效检测金黄色葡萄球菌DNA,每25.0μl反应体系的灵敏度为110.0 fg,并且此方法针对金黄色葡萄球菌具有良好的特异性。针对原料乳中金黄色葡萄球菌的污染,建立的LAMP检测方法的检测限为67 CFU/ml。本研究结果为进一步将LAMP方法应用于食品中金黄色葡萄球菌的安全检测奠定了基础。 The loop-mediated isother^nal amplification(LAMP) method was established and applied in the rapid de-tection of Staphylococcus aureus in raw milk according to the conser^^ed sequence of the heat-tolerant nuclease gene ( n u c ) . The genomic DNA of S. aureus could be detected using the four primers designed and synthesized,and the detection limit was 110. 0 fg per 25. 0μl reaction system. The method was S. aureus specific,with the detection limit of 67 CFU/ml in raw milk. This study provided a basis for further application of LAMP method in the safety detection of S. aureus in food.
出处 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期1171-1175,共5页 Jiangsu Journal of Agricultural Sciences
基金 北京市长城学者培养计划项目(CIT&TCD20140315) 北京农学院研究生改革与发展项目(2016YJS048)
关键词 环介导等温扩增(LAMP) 金黄色葡萄球菌 耐热核酸酶基因(nuc) 灵敏度 特异性 loop-mediated isothermal amplification(LAMP) Staphylococcus aureus thermostable nuclease gene sensitivity specificity
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