摘要
目的:探讨维生素E琥珀酸酯(VES)对人胃癌细胞未折叠蛋白反应的影响。方法:采用Western blot法分析VES不同剂量(0、5、10和20μg/mL)处理人胃癌SGC-7901细胞24 h和20μg/mL VES处理SGC-7901细胞不同时间(0、6、12、18和24 h)对内质网膜上的跨膜蛋白PKR样内质网蛋白激酶(PERK)磷酸化和活化转录因子6(ATF6)活化的影响;采用RT-PCR法检测VES不同剂量(0、5、10和20μg/mL)处理SGC-7901细胞24 h和20μg/mL VES处理SGC-7901细胞不同时间(0、3、6、9、12、15、18和24 h)对活化转录因子4(ATF4)mRNA表达和X盒结合蛋白1(XBP1)mRNA剪切的影响。结果:在翻译水平上VES对磷酸化PERK的诱导作用具有时间依赖关系,与阴性对照组比较,10μg/mL VES的诱导作用最强(P<0.05);在翻译水平上VES对ATF6活化片段的诱导作用具有时间依赖关系和剂量依赖关系;在转录水平上,随着作用时间的延长,VES对ATF4 mRNA的诱导作用也不断增强,18 h达到高峰,而XBP1mRNA从VES作用6 h即开始出现剪切。结论:VES诱导人胃癌SGC-7901细胞发生内质网应激过程中,未折叠蛋白反应相关信号分子被活化。
b OBJECTIVE：To investigate the effect of vitamin E succinate （VES） on unfolded protein response （UPR） in human gastric cancer SGC-7901 cells.METHODS：SGC-7901 cells were treated with VES at 5,10 and 20μg/mL and with tunicamycin （TM） at 3μg/mL for 24 h or at 20μg/mL for up to 24 h. RNA-dependent protein kinase （PKR）-like ER kinase （PERK） and activating transcription factor 6 （ATF6） were evaluated using Western blotting. X-box-binding protein 1 （XBP1） and activating transcription factor 4 （ATF4） were evaluated using RT-PCR.RESULTS：VES induced the phosphorylation of PERK in a time-dependent manner and reached the top level at 10μg/mL. In addition, VES induced the generation of p50ATF6 in SGC-7901 cells in a dose- and time-dependent manner. Like the positive control,VES treatment at 20μg/mL induced the spliced form of XBP1 from 6h up to 24h. Meanwhile,ATF4 mRNA was also up-regulated in cells exposed to VES in a time-dependent manner and reached the top level at 18 h. CONCLUSION：UPR pathways may be activated by VES in human gastric cancer SGC-7901 cells.
出处
《癌变．畸变．突变》
CAS
CSCD
2017年第4期256-259,265,共5页
Carcinogenesis,Teratogenesis & Mutagenesis
基金
国家自然科学基金资助项目(81402663)
关键词
未折叠蛋白反应
维生素E琥珀酸酯
胃癌细胞
内质网应激
unfolded protein response
vitamin E succinate
gastric cancer SGC-7901 cells
endoplasmic reticulum stress
