摘要
目的:建立HPLC波长切换法同时测定小儿鼻敏口服液中绿原酸、马钱苷、甘草苷、黄芩苷、哈巴俄苷、黄芩素、甘草酸、汉黄芩素、甘草次酸共9个成分的含量。方法:采用Insertsustain C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-甲醇-0.3%磷酸为流动相,进行梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长327 nm(0~15.5 min,检测绿原酸)、250 nm(15.5~23 min,检测马钱苷)、280 nm(23~41.5 min,检测甘草苷和黄芩苷)、245 nm(41.5~46 min,检测哈巴俄苷)、215 nm(46~50.5 min,检测黄芩素)、250 nm(50.5~53 min,检测甘草酸)、276 nm(53~72 min,检测汉黄芩素)、250 nm(72~80 min,检测甘草次酸)。结果:各待测组分分离度良好;绿原酸、马钱苷、甘草苷、黄芩苷、哈巴俄苷、黄芩素、甘草酸、汉黄芩素、甘草次酸9个成分的线性范围分别为1.408~140.8μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、3.060~306.0μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、1.984~198.4μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、8.187~818.7μg·mL^(-1)(r=1.000 0)、5.146~514.6μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、1.172~117.2μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、3.318~331.8μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、1.072~107.2μg·mL^(-1)(r=0.999 9)和2.121~212.1μg·mL^(-1)(r=0.999 8);加样回收率(n=6)分别为99.1%(RSD=1.7%)、98.7%(RSD=1.8%)、98.1%(RSD=2.5%)、100.2%(RSD=1.2%)、97.0%(RSD=2.2%)、99.2%(RSD=2.5%)、98.6%(RSD=1.9%)、99.1%(RSD=2.2%)、99.6%(RSD=2.6%)。3批中试样品中绿原酸、马钱苷、甘草苷、黄芩苷、哈巴俄苷、黄芩素、甘草酸、汉黄芩素、甘草次酸9个成分的含量范围依次为0.813~0.827、298~0.312、2.014~2.174、4.125~4.339、0.706~0.712、0.417~0.421、1.025~1.098、0.412~0.425和0.173~0.182 mg·mL^(-1)。结论:本试验建立的含量测定方法符合方法学验证要求,可用于小儿鼻敏口服液的9个指标性成分的同时测定。
Objective： To establish an HPLC with switching wavelength method for simultaneous determination of nine constituents （ chlorogenic acid, loganin, liquiritin, baicalin, harpagoside, baicalein, glycyrrhizic acid,wogonin, and carbenoxolone ） in Xiaoer Bimin oral liquid. Methods： The separation was performed on a Shimadzu Insertsustain-C18 （250 mm × 4.6 mm, 5 μm ）column with the gradient elution of acetonitrile-methanol-0. 3% phosphoric acid solution in a gradient mode at the flow rate of 1.0 mL. min-1 . The column temperature was set at 25 ℃. The UV detection wavelength was set at 327 nm for chlorogenic acid in 0-15.5 min, 250 nm for loganin in 15.5-23 min, 280 nm for liquiritin and baicalin in 23-41.5 min, 245 nm for harpagoside in 41.5-46 min, 215 nm for baicalein in 46-50. 5 min, 250 nm for glycyrrhizic acid in 50.5-53 min, 276 nm for wogonin in 53-72 min, and 250 nm for carbenoxolone in 72-80 min, respectively. Results： Excellent chromatographic separation was achieved and the ranges for linear correlation of chlorogenicacid, loganin, liquiritin, baicalin, harpagoside, baicalein, glycyrrhizic acid, wogonin and carbenoxolone were 1.408-140.8 μg. mL-1 （ r=0.999 9 ）, 3.060-306. 0 μg. mL-1 （ r=0.999 9 ）, 1.984-198.4 μg. mL-1 （ r=0.999 9 ）, 8.187-818.7 μg. mL-1 （ r=1.000 0 ）, 5.146-514.6 μg. mL-1 （ r=0. 999 9 ）, 1.172-117.2 μg. mL-1 （ r=0. 999 9 ）,3. 318-331.8 μg. mL-1 （ r=0. 999 9 ）, 1. 072-107.2 μg. mL-1 （ r=0. 999 9 ）, and 2.121-212.1 μg. mL-1 （ r=0. 999 8 ）, respectively. The average recoveries （ n=6 ） of the nine components were 99.1% （ RSD=1.7% ） , 98.7% （ RSD=1. 8% ） , 98.1% （ RSD=2.5% ） , 100.2% （ RSD=1.2% ）, 97.0% （ RSD=2.2% ）, 99.2% （RSD=2.5%） , 98.6%（RSD=1.9%） , 99.1%（RSD=2.2%） , and 99.6% （ RSD=2.6% ）, respectively. The content ranges for three batches of samples of ehlorogenicacid, loganin, liquiritin, baicalin, harpagoside, baicalein, glycyrrhizic acid, wogonin and carbenoxolone were 0.813-0.827 mg. mL
出处
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期1981-1987,共7页
Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis
基金
成都中医药大学发展基金(CGZH201203)
四川省科技厅科技支撑计划(2014SZ0140)
关键词
绿原酸
马钱苷
甘草苷
黄芩苷
哈巴俄苷
黄芩素
甘草酸
汉黄芩素
甘草次酸
方法验证
中药复方多组分测定
高效液相色谱波长切换
三元流动相系统
chlorogenic acid
loganin
liquiritin
baicalin
harpagoside
baicalein
glycyrrhizic acid
wogonin
carbenoxolone
method validation
muhicompnent assay of Chinese herbal compound
HPLC with switchingwavelength
the ternary mobile phase system
