摘要
目的探讨大电导钙激活钾通道（BKca）是否通过Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号途径影响兔主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）的增殖。方法用低浓度的四乙胺（TEA）处理体外传代培养的家兔胸主动脉VSMC。采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）和流式细胞术（FCM）检测TEA对VSMC的增殖和细胞周期的影响,分别采用免疫组化法和免疫印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（P-ERK1/2）蛋白表达。结果 （1）MTT法检测结果显示,TEA能够呈时间依赖性和剂量依赖性地降低吸光值、增加细胞抑制率（P〈0.05）;（2）流式细胞术分选结果显示,TEA处理48 h后能够呈剂量依赖性地增加G1期细胞比例,减少S期、G2期细胞比例（P〈0.05）;（3）免疫组化检测结果显示,随着TEA浓度的增加,VSMC的PCNA阳性表达率逐渐下降（P〈0.01）;（4）免疫印迹法结果表明,经400μmol/L的TEA处理48 h后,ERK1/2、P-ERK1/2蛋白表达,ERK活化率与未经处理的对照组比较,均无统计学意义（t=0.354-1.035,P〉0.05）。结论 TEA可呈浓度依赖性地阻止细胞周期由G1向S期推进,抑制VSMC增殖;该过程的分子机制不经由Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号途径介导。
出处
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期16-19,共4页
Chinese Journal of Gerontology
基金
广西自然科学基金(No.2010GXNSFA013175)
