摘要
目的研究重组人肿瘤坏死因子（rhTNF—NC）逆转人慢性髓性白血病耐阿霉素（Dox）细胞株（K562／Dox）耐药及机制。方法应用MTT法测定不同浓度rhTNF—NC处理的肿瘤细胞对0—20μmol／LDox的敏感性。通过流式细胞仪观察rhT—NF—NC对细胞内药物蓄积的影响。半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法分析rhTNF-NC处理耐药细胞后对多药耐药基因（MDR1）、多药耐药相关蛋白（MRP）、谷胱甘肽S转移酶π（GST-π）和拓扑异构酶（TopoⅡα）mRNA、P糖蛋白（P—gp）及蛋白激酶c（PKCct）表达的变化。结果rhTNF-NC对K562／Dox的耐药性具有明显的逆转作用。rhTNF—NC在500、2500和5000U／mL浓度时，其联用的Dox半数肿瘤生长抑制浓度（IC50）分别为2．22±0．34、1．41±0．13和1．04±0．09μmol／L，增强K562／Dox细胞对Dox敏感性的倍数分别为2．51，3．94和5．33，与单用Dox比具有统计学差异（P〈0．05）。rhTNF—NC处理细胞1h后，Dox在细胞内蓄积量明显增加，并呈浓度依赖性。rhTNF—NC作用下，MDRl的mRNA和蛋白表达为与时间和浓度相关的显著降低，GST-π和TopoⅡα的mRNA表达水平分别降低和升高。此外PKCa蛋白表达也被抑制，提示多种机制参与肿瘤多药耐药。结论rhTNF-NC通过影响MDR1、MRP、GST-π、TopoⅡα及PKCα基因或蛋白的表达促使K562／Dox细胞内药物蓄积，逆转K562／Dox细胞多药耐药。
出处
《实用临床医药杂志》
CAS
2015年第E01期23-26,共4页
Journal of Clinical Medicine in Practice
