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构建轻链次级库提高人抗TNF-α抗体的亲和力 被引量:1

A ffinity mature of hum an anti-TNF-αFabthr-ough constructing a light chain second library
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摘要 目的使用构建轻链次级库的方法,对已经获得的人源抗TNFα单抗mAb的Fab进行轻链置换,并筛选具有更高亲和力的人源抗TNFαmAb的Fab。方法首先,采用RTPCR扩增正常人全套抗体轻链基因,并与已获得的人源抗TNFαmAb的重链基因配对,构建人源抗TNFα噬菌体抗体的轻链次级库。然后筛选与TNFα具有更高亲和力的克隆。结果经过3轮的生物淘筛biopanning,获得了较原来的人源抗TNFαmAbFab具有更高亲和力的人源抗体Fab。结论轻链次级库筛选法,能有效地提高抗体的亲和力,为解决噬菌体抗体库法制备的人源抗体亲和力较低这一难题,提供了一种有效的方法。 AimToobtainhumananti TNF αantibodyFabswithhigheraffinitythroughreplacingthelightchainofthehumananti TNF αantibodyFabfragmentbyconstructingalightchainsecondlibrary.MethodsFirstlyamplifytherepertoireofthehumanlightchainsgenesfromhumanperipheralbloodlympho-cytesusingRT PCRandassemblethemrandomlywiththeheavychaingeneoftheanti TNFαantibodysoastoconstructasecondlightchainlibrarywhichcomprisesasingleheavychaingeneoftheantibodytoTNFαandallofthehumanlightchaingenes.Thenselecttheantibodycloneswithhigherbindingaffinity.ResultsSomenewphagedisplayedantibodieswhichhadhigheraffinityforTNFαwereobtainedfromthenewlibrarythroughthreeroundsofbiopanning.Conclusionconstructinglightchainsecondlibrarycouldeffectivelyimprovetheaffinityoftheantibodyandcouldbeavalidmethodtoovercomethedis-advantageoftheloweraffinityofthehumanantibodyfromphagedisplay.
出处 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期179-181,共3页 Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基金 国家自然科学基金资助 No.39670043
关键词 肿瘤坏死因子 噬菌体显示技术 亲和力成熟 轻链库 tumornecrosisfactorphagedisplayaffinitymaturelightchainlibrary
  • 引文网络
  • 相关文献

参考文献2

  • 1Yuan B,Lett Biotechnol,2000年,11卷,1期,5页 被引量:1
  • 2Yuan B,Lett Biotechnol,1999年,10卷,4期,258页 被引量:1

同被引文献14

引证文献1

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