摘要
利用已构建的工程菌表达His-HarpinXooc蛋白,分析His-HarpinXooc蛋白的纯化条件、产量、等电点和生物活性等。结果表明:1)在使用HisTrap HP Kit进行纯化时,咪唑浓度对于蛋白纯度影响最大,其中150mM咪唑最适合于洗脱His-HarpinXooc蛋白,缓冲液、洗脱次数等对纯化的影响不大;2)每升菌液可获得高纯度的HisHarpinXooc蛋白为20mg,其等电点约为4.7;3)纯化所得His-HarpinXooc蛋白与不含His标签的HarpinXooc生物活性一致,具有Harpin蛋白诱导烟草产生过敏反应的典型特征。此为His-HarpinXooc蛋白的应用奠定基础。
For analyzing the purity,yield,pI and bioactivity,the His-HarpinXooc recombinant protein is expressed from bacteria and purified by HisTrap HP Kit.Through optimizing the conditions,20 mg pure His-HarpinXooc protein can be produced from bacteria suspension per li-ter.The His-HarpinXooc protein is identified by digesting,and the pI of this protein is about 4.7. The Harpin can induce hypersensitive response on tobacco,which is accorded with HarpinXooc . This study is beneficial to the application of His-HarpinXooc protein.
出处
《金陵科技学院学报》
2014年第1期53-57,共5页
Journal of Jinling Institute of Technology
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA101504)
国际科学与技术合作项目(2009DFA32740)
国家转基因重大专项(2011ZX08004-004)
