摘要
目的 探讨丹参酮ⅡA（TanⅡA）体外对人胃癌SGC7901细胞自噬的影响及机制.方法 不同浓度（0.5、1、2和4 mg/L） TanⅡA作用体外培养的胃癌SGC7901细胞24、48、72 h后,噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖活力的改变；TanⅡA（1、2和4mg/L）作用48 h,流式细胞术检测细胞自噬小体的含量；Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ的蛋白的表达水平及磷酸肌醇3激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）-雷帕霉素靶蛋白（mTOR）-p70S6激酶1（p70S6K1）的活性.结果 0.5 mg/L TanⅡA对胃癌SGC7901细胞没有明显的生长抑制作用,1、2和4 mg/L TanⅡA对胃癌SGC7901细胞则有明显的生长抑制作用,且抑制作用呈剂量和时间依赖性（P＜0.05）；流式细胞分析结果显示,1、2和4 mg/L TanⅡA组细胞内酸性自噬小体含量分别为（9.77±1.92）、（13.28 ±2.95）和（16.54±3.28）％,与对照组（4.16±0.64）％比较,差异有统计学意义（P＜0.05）；Westem blot结果显示,1、2和4 mg/L TanⅡA作用后胃癌SGC7901细胞中Beclin-1的相对表达量为0.62±0.12、0.71±0.11和0.85±0.13,与对照组（0.37±0.05）比较,差异有统计学意义（P＜0.05）；1、2和4 mg/L TanⅡA作用后胃癌SGC7901细胞中LC3-Ⅱ的相对表达量为0.48±0.06、0.65 ±0.11和0.86 ±0.14,与对照组（0.31±0.03）比较,差异有统计学意义（P＜0.05）；此外,1、2和4 mg/L TanⅡA作用后胃癌SGC7901细胞PI3K-Akt-mTOR-p70S6K1活性则下降（P＜0.05）.结论 TanⅡA可通过抑制PI3 K-Akt-mTOR-p70S6K1信号通路促进人胃癌SGC7901细胞自噬.
Objective To investigate the effects of Tanshinone Ⅱ A （Tan Ⅱ A） on the autophagy of gastric cancer cell SGC7901.Methods SGC7901 cells were cultured in vitro.After treatment with different concentrations （0.5,1,2,and 4 mg/L） of Tan Ⅱ A for different durations （24,48,and 72 h）,methyl thiazol tetrazolium （MTT） assay was used to detect the cell proliferation.After treatment with different concentrations （1,2,and 4 mg/L） of Tan lⅡ A for 48 h,the content of acidic vesicular organelles （AVOs） was examined by using flow cytometry （FCM）.The expression of autophagy-associated protein Beclin-1 and microtubule-associated protein 1 light chain 3 （LC3）-Ⅱ,as well as phosphatidylinositol 3 kinase （PI3K）-protein kinase B （Akt）-mammalian target of rapamycin （mTOR）-p70S6K1 signaling pathways were detected by using Western blotting.Results Tan Ⅱ A （0.5 mg/L） had no significant effect on proliferation of SGC7901 cells compared to dimethylsurfoxide （DMSO） group （P ＞0.05）.Tan Ⅱ A showed a dose-and time-dependent growth inhibition when the concentration above 1 mg/L （P ＜ 0.05）.As compared with DMSO group [（4.16 ± 0.64）％],the content of AVOs was significantly increased in 1 mg/L Tan Ⅱ A group [（9.77 ± 1.92） ％],2 mg/L Tan Ⅱ A group [（13.28 ± 2.95） ％],and 4 mg/L Tan Ⅱ A group [（16.54 ± 3.28） ％] （P ＜ 0.05）.The protein levels of Beclinl and LC3-Ⅱ were significantly higher in TanⅡAgroup [（0.62±0.12）,（0.71±0.11）,and （0.85 ±0.13） vs.（0.37±0.05） for Beclinl,P＜0.05; （0.48±0.06）,（0.65±0.11）,and （0.86±0.14） vs.（0.31 ±0.03） for LC3-Ⅱ,P ＜0.05].In addition,Tan Ⅱ A decreased the phospho-Akt,phospho-mTOR,and phospho-p70S6K1 （P ＜ 0.05）.Conclusion Tan ⅡA induces the auophagy of human gastric cancer SGC7901 cells via blocking PI3K-Akt-mTOR-p70S6K1 in vitro.
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期2098-2100,共3页
Chinese Journal of Experimental Surgery
关键词
丹参酮ⅡA
胃癌
自噬
磷酸肌醇3激酶
Tanshinone Ⅱ A
Gastric cancer
Autophagy
Phosphatidylinositol 3 kinase
