摘要
用AKP、OCT-4染色技术鉴定精原干细胞的多能性,以期为牛精原干细胞的深入研究奠定基础。将新生牛睾丸解离成单细胞悬液,差速贴壁法纯化精原干细胞,并用RT-PCR和免疫组化的方法鉴定分离的细胞;分离后的精原干细胞进行体外培养,形成集落后转移到支持细胞饲养层上继续培养,形成集落后进行AKP、OCT-4染色鉴定多能性。结果表明:分离纯化后的精原干细胞表达精原干细胞的标志基因PGP9.5,不表达GDNF的受体基因GFRa1,精原干细胞的AKP、OCT-4染色呈阳性;精原干细胞体外培养可形成葡萄串状细胞集落和类ES细胞集落,葡萄串状细胞集落转移到支持细胞饲养层上能在GDNF培养液中增殖,类ES细胞集落转移到支持细胞饲养层上能在LIF培养液中增殖,细胞集落AKP、OCT-4染色呈阳性。
出处
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2013年第19期29-32,共4页
Chinese Journal of Animal Science
基金
黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室开放课题资助项目(GXZDSYS-2012-07)
东北农业大学博士启动基金(2012RCB27)
