摘要
本研究旨在筛选获取优质ICM集落的实验方法。以昆明系小鼠为实验动物,采集3.5、4 d和4.5 d的胚胎,分别移入DMEM培养液、DMEM+白血病抑制因子(LIF)和小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系中进行培养,观察比较内细胞团(ICM)从透明带中孵出的时间、孵化囊胚贴壁情况以及ICM集落形成情况。结果表明:妊娠3.5 d的胚胎61%为桑椹胚,需要经过4~5 d的体外培养才能形成ICM集落;妊娠4 d的扩张囊胚经过3~4 d的共培养后形成ICM集落;妊娠4.5 d的孵化囊胚经过1~2 d的共培养即可形成ICM集落;ICM形成率以妊娠4.5 d的胚胎最高,显著高于妊娠4 d和3.5 d的胚胎(P<0.01),但妊娠4.5 d冲出孵化囊胚数量显著降低(P<0.01);小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系优于DMEM和DMEM+LIF培养液。因此,采集妊娠4 d的昆明小鼠胚胎,选择小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系,在体外培养3~4 d,能够有效分离培养出可用于胚胎干细胞研究的优质ICM。
出处
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2012年第7期26-28,共3页
Chinese Journal of Animal Science
基金
重庆市自然科学基金计划项目(CSTC
2009BB5301)
西南大学基本科研业务费专项资金项目(XDJK2009C163)
西南大学动物科技学院青年教师科研基金项目