摘要
目的 用转基因干细胞在体外构建组织工程骨.方法 用携带有人骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和增强型绿色荧光蛋白（eGFP）的慢病毒感染骨髓基质干细胞（BMSCs）后接种于纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸（nHAC/PLA）支架.荧光显微镜下观察eGFP表达,判断感染效率;RT-PCR、ELISA和Western-blot用于基因转染的表达检测;流式细胞仪检测细胞增殖;扫描电镜观察细胞在支架材料中的黏附、生长状况;ALP活性检测成骨能力.结果 慢病毒24 h对BMSCs的转染率约为90%;RT-PCR检测到BMP-2阳性表达,与实际值1191 bp基本一致;ELIISA检测24 h BMP-2蛋白含量为（148.2±21.6）pg/ml;流式细胞仪检测到细胞S期比例增加;ALP活性检测基因转染组明显强于对照组（P＜0.05）;扫描电镜见细胞在nHAC/PLA支架上粘附生长良好;第8周时Western-blot仍可检测到BMP-2在相对分子质量26×10^3处出现阳性条带.结论 BMP-2基因可在BMSCs稳定表达并诱导其向成骨分化,与nHAC/PLA复合培养可用于组织工程骨构建.
出处
《中华显微外科杂志》
CSCD
北大核心
2010年第2期143-145,共3页
Chinese Journal of Microsurgery
基金
山西省自然科学基金（2008012011-1）
