摘要
V79_8细胞是一个没有可测定G1和G2期的变异细胞株 ,其母系细胞系V79有G1期 ,但没有G2期 ,为了探讨V79_8的G1期缺乏是否与CDK4的调控有关 ,研究了CDK4对其细胞周期的影响 .构建反义CDK4质粒转染V79_8细胞筛选得到V79_8_asCDK4细胞 ,通过研究V79_8_asCDK4与对照组细胞的细胞生长曲线 ,测定其细胞的GT(细胞倍增时间 ) ,用FCM测定细胞周期中各个周期时相所占的比例 ,比较各期细胞数量的变化 ,同时检测其内源CDK4及其他增殖相关基因的表达 .V79_8_asCDK4生长变缓慢 ,GT时间约增长了 2 .5h ,FCM结果G2 +M无明显变化 ,而G1期比对照组明显增加 ,因此 2 .5h主要是出现了G1期所致 .Northern杂交结果表明 ,V79_8_asCDK4细胞中内源CDK4的表达降低 ,cyclinD1及Rb略有减少 ,TGF_β表达增加 ,而cyclinB1无明显变化 .CDK4主要在G1及G1 /S起作用 ,反义CDK4转染V79_8细胞可部分抑制CDK4mRNA的表达 ,降低CDK4/cyclinD激酶复合物水平 ,降低了Rb的磷酸化程度 ,延长G1期过程 ,而G1 /S转换处也因受到检验点的调控而出现了延迟 ,导致出现明显的G1期 .
出处
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
1998年第18期1958-1963,共6页
Chinese Science Bulletin
基金
国家自然科学基金!(批准号 :394 30 0 80 )
