摘要
目的体外表达ＣａｇＡ蛋白，发展快速而简便的检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的免疫学方法．方法用ＰＣＲ技术克隆ｃａｇＡ基因５端片段（８５４ｂｐ）于ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α中温度诱导表达Ｍｒ３８０００的单体ＦＣａｇＡ，复性后分别作阴离子交换及凝胶柱层析，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ＦＣａｇＡ的抗原性．以重组ＦＣａｇＡ为抗原，通过制备胶体金及免疫胶体金，建立了斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法．结果ＦＣａｇＡ具有抗原性．以该抗原所建立的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法仅需２ｍｉｎ～３ｍｉｎ可完成，无需特殊设备，并可单人份操作．经过与ＥＩＡ法对比检测２６２例患者血清，本方法的特异性为９８５％，敏感度为９６８％．结论具有抗原活性的ＦＣａｇＡ蛋白的表达及ＤＩＧＦＡ检测抗ＣａｇＡ抗体方法的建立。
