摘要
猪卵透明带（PZP）是包绕在卵母细胞外的由ZPI、ZP3a和ZP35组成的一层丝状体酸性糖蛋白。其中的猪ZP39蛋白（分子量55kD，完全去糖基后为32kD）jfl当于小鼠精子受体ZP3和人ZP3蛋白，PZP35在受精过程中起何作用？特别是其抗体与猪精子受体PZP3a抗体一样也能在体外试验中阻断人精卵受精，所以长期以来PZP印也一直是生殖生物学和免疫避孕科研人员关注的研究对象。过去分离该蛋白组分是通过繁琐的生化提纯技术，随着分子生物学技术的广泛应用，以相对简便价廉的遗传工程方法大量制备无卵巢因子混杂的ZP目的蛋白已是势在必行。本文首次报道了PZP35基因在大肠杆菌中的表达，为以后制备相应的单克隆抗体，鉴别抗原决定簇进而研究ZP耿避孕疫苗打下了基础。一、目的基因的DNA测序为选择表达载体构建符合pZP30CDNA阅读框的融合基因，先用T。引物对pZ57质粒中PZP30基因的5’端重新作了DNA测序分析，结果发现已报道的该基因5’端非编码区漏读了二个碱基（T、G）。二、表达载体PWR450-2／ZP那的构建质粒PWR450-2带有裁短的LacZ’基因（编码6一半乳糖背酶N端461个氨基酸残基），外源基因插入LacZ’基因下游多聚克隆部位形成融合基因，以异丙基一p-Dwt代半乳糖着（IPTG）诱导上游的强启动子比c即产生高水平表达。
出处
《生殖与避孕》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第1期57-58,共2页
Reproduction and Contraception
