摘要
以巴旦杏DNA为模板,利用L25(56)正交设计,研究了dNTPs、DNA模板、Mg2+、Taq酶和随机引物5种RAPD反应组分浓度变化对扩增结果的影响。量化的分析结果表明,正交试验的方法可以较为准确地反映各个因素在不同水平上对RAPD-PCR的影响。试验研究建立的巴旦杏RAPD-PCR最佳反应体系为:25μLPCR反应体系中,10×TaqBuffer2.5μL,2.0mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,模板DNA为30 ng,随机引物0.8μmol/L,Taq聚合酶1.5 U。
The I25（5^6） orthogonal diagram was applied to study the effects of different concentrations of dNTPs, DNA template, mg^2＋ , Taq polymerase and random Primer on RAPD- PCR result of almond（Amygdalus communis L. ） template. The quantitative analysis result showed that orthogonal diagram can be used to analyse the effects on RAPD - PCR accurately of each factor in different levels. The optimal RAPD - PCR reaction system for Amygdalus communis L. was determined as follows： 25 μL PCR reaction system contains 10 × buffer 2.5 μL, 2.0 mmol/L Mg^2＋ , 0.25 mmol/L dNTP, 30 ng template DNA, 0.8μmol random primer and 1.SU Taq poly- merase.
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
2007年第5期715-719,共5页
Xinjiang Agricultural Sciences
基金
国家自然科学基金项目(30460115)
国家科技支撑计划课题(2007BAD36B01)
关键词
巴旦杏
RAPD
正交设计
Amygdalus communis L.
RAPD
orthogonal diagram
