摘要
本实验用间接免疫荧光法和电镜免疫胶金法显示培养细胞的胞内凝血Ⅷ因子相关抗原(ⅧR:Ag)反应阳性以及电镜下Weible-Palade(WP)小体存在,证明所分离并经多次传代的细胞为内皮细胞。材料和方法:1.从新生小牛肺动脉中以胶原酶消化法分离出内皮细胞,于199培养液中培养并传代,取第3-5代细胞。实验前细胞培养于涂有鼠尾胶原的载玻片上。2.WP小体检测:细胞以PBS(0.1M,pH=7.4)原位漂洗并分别以3％戊二醛45分钟、1％锇酸30分钟固定;将预聚好的Epon812块扣于经脱水和Epon812浸透的细胞单层上,聚合后用热烤法将细胞层剥离于载玻片,常规超薄切片和铅铀染色,透射电镜下观察。3.ⅧR:Ag检测:(1)间接免疫荧光法:以95％4℃乙醇原位固定细胞10分钟,
出处
《电子显微学报》
CAS
CSCD
1990年第3期19-19,共1页
Journal of Chinese Electron Microscopy Society
