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通过叶绿体基因工程在烟草中合成中长链羟基脂肪酸聚酯 被引量：3

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摘要 中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯.PHA合酶(PHAsynthase,由phaC基因编码)和3-羟酰基-酰基转移蛋白-辅酶A转移酶(3-hydroxyacyl-acylcarrierprotein-coenzymeAtransferase,由phaG基因编码)是mcl-PHAs生物合成途径中的关键酶.以aadA(氨基糖苷-3′-磷酸转移酶)基因做筛选标记,分别构建了含phaC2基因的单价叶绿体转化表达载体pTC2以及同时嵌合phaC和phaG基因的双价叶绿体转化表达载体pTGC.通过PDS1000/He基因枪转化法转化烟草,获得具有壮观霉素抗性的叶绿体型转基因烟草植株,PCR和SouthernBlot结果表明,外源基因确已整合进烟草叶绿体基因组中且基本达到同质化.气相色谱法检测转基因株系中的mcl-PHAs含量最高达4.8mg/g干重,合成的PHAs单体主要成分为3-羟基辛酸(3-hydroxyoctanoate,3-HO)和3-羟基癸酸(3-dydroxydecanoate,3-HD).透射电子显微镜观察到转基因烟草叶片叶绿体中确有PHAs颗粒累积.
作者 王玉华 张秀海 吴忠义 杨清 陈国强 吴琼 黄丛林
机构地区 南京农业大学生命科学学院 北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心 清华大学生物科学与技术系
出处 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第10期979-986,共8页 Chinese Science Bulletin
基金 国家高技术研究发展计划资助项目(批准号:2002AA213051)
关键词 羟基脂肪酸 叶绿体基因工程 长链 Southern 转基因烟草植株 电子显微镜观察 叶绿体转化 生物合成途径 基因枪转化法 叶绿体基因组 基因编码 表达载体 PHAs 微生物聚酯 磷酸转移酶 气相色谱法 叶片叶绿体 筛选标记 氨基糖苷
分类号 S572 [农业科学—烟草工业]
  • 相关文献

参考文献30

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二级参考文献2

共引文献52

同被引文献68

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引证文献3

二级引证文献22

科学通报
2005年 第10期

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