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改良PCR-RFLP法测定异质性线粒体基因的相对含量

Modified PCR-RFLP determination of relative content of heterogenous mitochondrial gene
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摘要 目的 :改进 PCR- RFL P法 ,确认线粒体异质性基因并测定异质性线粒体基因的相对含量。方法 :依据先期实验中克隆测序得到的 ECV 30 4细胞中线粒体基因 (D- L OOP区 )多态性位点 ,采用两轮 PCR法 ,以第 1轮 PCR胶回收产物为模板 ,作第 2轮 PCR,并在第 2轮 PCR中引入限制性内切酶位点 ,酶切产物行琼脂糖电泳 ,测定异质性线粒体基因的相对含量。结果 :ECV30 4细胞中存在 5 13A/ G异质性 ,二者比例约为 1∶ 3。 结论 :确证 ECV30 4细胞中含有 5 13A/ G异质性碱基 ,改良 PCR-RFL P法测定异质性线粒体基因相对含量较为简单可靠 。
出处 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1036-1037,共2页 Academic Journal of Second Military Medical University
基金 国家自然科学基金 (30 1 71 0 30 )
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