摘要
探究激光捕获显微切割技术(LCM)在检测肾脏相关基因的条件及可行性。方法 收集成年BALB/C小鼠肾脏组织,将组织制成6μm冰冻切片。利用显微切割仪分别获取不同数量的肾组织主要结构,包括肾小球、肾小管及肾小动脉。分别提取不同肾组织结构的RNA,逆转录后通过RT-PCR及琼脂糖凝胶电泳检测不同数量肾组织固有结构中管家基因的表达量。 结果 当获取50个组织时,小动脉、肾小管和肾小球的Ct值分别为18.9,20和19.4,结果与获取25个组织时相比有较为显著的差异。结论 通过LCM技术提取肾组织特定结构并进行相应基因检测的方法可行,推荐切割获取的肾组织结构数量为50个。
基金
中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金(2018PT32018)。