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基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS和网络药理学的川蛭通络胶囊化学成分及作用机制研究 被引量：5
1
作者 杨柯楠 关永霞 +4 位作者 范建伟 袁晓梅 张龙霏 刘谦 李静 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期5216-5234,共19页
采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术对川蛭通络胶囊内化学成分进行分析和鉴定,明确其药效物质基础,同时结合网络药理学研究方法探讨川蛭通络胶囊治疗脑梗死的作用机制。以乙腈-1%乙酸... 采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术对川蛭通络胶囊内化学成分进行分析和鉴定,明确其药效物质基础,同时结合网络药理学研究方法探讨川蛭通络胶囊治疗脑梗死的作用机制。以乙腈-1%乙酸水为流动相进行梯度洗脱,质谱正、负离子模式扫描。采用Xcalibur 4.2软件,精确质荷比、二级质谱裂解碎片等信息结合对照品的比对和文献数据进行化合物解析。共鉴定得出152个化合物,包括有机酸类32个,黄酮及其苷类35个,二萜类33个,苯酞类13个,三萜及三萜皂苷类12个,含氮类23个以及其他类4个,并分析其裂解规律。利用SwissTargetPrediction、GeneCards、DAVID等数据库对川蛭通络胶囊发挥药效作用的核心靶点及作用机制进行预测分析,PPI网络拓扑分析得到TNF、VEGFA、EGFR、IL1B、CTNNB1等10个核心靶点,KEGG富集显示川蛭通络胶囊主要通过调控脂质和动脉粥样硬化、癌症中的糖聚蛋白、癌症中的microRNAs、流体剪切应力和动脉粥样硬化等通路发挥作用。对关键成分与核心靶点进行分子对接,分子对接结果显示川蛭通络胶囊关键成分与核心靶点初步展现出较强的结合能力。该研究阐明了川蛭通络胶囊中的化学成分,同时结合网络药理学探究川蛭通络胶囊治疗脑梗死的核心靶点及作用机制,为川蛭通络胶囊的药效物质基础研究及其制剂质量标准制定提供科学参考。 展开更多
关键词 川蛭通络胶囊 UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS 化学成分 网络药理学
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基于肠道菌群测序和粪便代谢组学的荆防颗粒保护急性肺损伤机制研究 被引量：1
2
作者 肖贺 孙兴旭 +3 位作者 孙成宏 王恩力 王现珍 姚景春 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1915-1923,共9页
为了阐明荆防颗粒治疗急性肺损伤的效果及作用机制,并考察荆防颗粒对急性肺损伤粪便内源性代谢物代谢紊乱和肠道菌群稳态的调控作用,将小鼠随机分为假手术组、模型组、荆防颗粒组,造模后持续给药6 d。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场... 为了阐明荆防颗粒治疗急性肺损伤的效果及作用机制,并考察荆防颗粒对急性肺损伤粪便内源性代谢物代谢紊乱和肠道菌群稳态的调控作用,将小鼠随机分为假手术组、模型组、荆防颗粒组,造模后持续给药6 d。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用仪(UHPLC-HESI-QE-Orbitrap-MS/MS)代谢组学技术和16S rRNA高通量测序技术,测定小鼠肠道中内源性小分子物质和肠道菌群的变化,并寻找出潜在的生物标志物。结果显示,荆防颗粒可以对11个生物标志物L-谷氨酸、琥珀酸、花生四烯酸、亚油酸、亚麻酸、苯丙氨酸、鞘氨醇、丁酸、丙酮酸、色氨酸、棕榈酸进行调控。对这11个生物标志物通过在线软件MetaboAnalyst进行代谢通路分析,得到潜在的主要代谢通路,其中共有10条代谢通路与荆防颗粒治疗急性肺损伤密切相关,包括丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢,氨基酰基tRNA生物合成,三羧酸循环,乙醛酸及二羧酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,亚油酸和亚麻酸代谢,氮代谢,谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢。肠道菌群结果显示显著性差异菌主要有Bacteroides、Akkermansia、Lachnospiraceae_NK4A136_group、Lachnoclostridium和Klebsiella。Spearman分析证实,Akkermansia、Lachnospiraceae_NK4A136_group与琥珀酸、花生四烯酸、亚麻酸、亚油酸、丁酸、丙酮酸丰度呈显著正相关;Bacteroides、Klebsiella、Lachnoclostridium与L-谷氨酸、苯丙氨酸、鞘氨醇丰度呈显著正相关。以上结果表明荆防颗粒治疗急性肺损伤作用是通过改善急性肺损伤小鼠肠道菌群失调,与平衡丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢,氨基酰基tRNA生物合成,三羧酸循环,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,亚油酸代谢等通路来实现的。 展开更多
关键词 荆防颗粒 急性肺损伤 代谢组学 肠道菌群 代谢通路
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小建中合剂活性炭除杂工艺优化及其制剂稳定性影响研究
3
作者 张微 刘震远 +6 位作者 杜昊忱 郭田甜 杨梅 王善栋 韩培 宋祥云 张贵民 《山东科学》 CAS 2024年第4期1-8,共8页
为提高小建中合剂制剂澄清度与稳定性,选用活性炭除杂工艺纯化小建中合剂,采用正交试验评价法,以活性炭的用量、煮炭时间、除炭时的药液温度为考察因素,以芍药苷转移率、干物质转移率为考察指标,进行方差分析、直观分析结合加速稳定性... 为提高小建中合剂制剂澄清度与稳定性,选用活性炭除杂工艺纯化小建中合剂,采用正交试验评价法,以活性炭的用量、煮炭时间、除炭时的药液温度为考察因素,以芍药苷转移率、干物质转移率为考察指标,进行方差分析、直观分析结合加速稳定性试验结果,优选小建中合剂活性炭除杂工艺,并在该条件下生产3批小建中合剂制剂进行长期稳定性试验。结果表明小建中合剂制剂煮炭除杂最佳工艺参数为活性炭使用量0.4%、煮炭时间30 min及滤过时药液温度100℃,此工艺条件扩大生产的平均芍药苷转移率为75.24%、干物质转移率为89.08%。该试验所得最佳煮炭除杂工艺可保证小建中合剂澄清度及稳定性,同时最大程度保留芍药苷及干物质,从而保证药品疗效的稳定均一,为小建中合剂煮炭除杂纯化工艺参数的明确及优化提供了科学、合理的依据。 展开更多
关键词 小建中合剂 活性炭 高效液相色谱 芍药苷 干物质
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基于HPLC指纹图谱的葶苈大枣泻肺汤相关评价
4
作者 马云 关永霞 +7 位作者 王艳 严琴琴 周冰 申凤霞 李倩 聂宗恒 范建伟 赵利枝 《中国现代中药》 CAS 2024年第2期342-347,共6页
目的:建立葶苈大枣泻肺汤物质基准的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱和6个指标成分的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱梯度洗脱法,借助“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012A版)建立14批葶苈大枣泻肺汤的HPLC特征指纹图谱,同... 目的:建立葶苈大枣泻肺汤物质基准的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱和6个指标成分的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱梯度洗脱法,借助“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012A版)建立14批葶苈大枣泻肺汤的HPLC特征指纹图谱,同时测定槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、芦丁、异槲皮苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和异鼠李素6个指标成分的含量。结果:葶苈大枣泻肺汤的HPLC特征指纹图谱共标定了27个共有峰,6个特征峰分别为5号峰(槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷)、18号峰(芦丁)、19号峰(异槲皮苷)、21号峰(异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖)、24号峰(槲皮素)和27号峰(异鼠李素)。对14批葶苈大枣泻肺汤进行含量测定,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、芦丁、异槲皮苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和异鼠李素质量浓度分别为111.33~118.71、9.16~9.36、16.51~17.26、12.23~12.62、3.10~3.36、3.51~3.62μg·mL-1,方法精密度、稳定性、重复性均良好。结论:建立的HPLC指纹图谱和多指标成分含量测定方法稳定可靠,可为葶苈大枣泻肺汤的质量标准研究提供参考。 展开更多
关键词 葶苈大枣泻肺汤 物质基准 高效液相色谱法 指纹图谱 含量测定
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桔梗生药粉湿热灭菌工艺优化及不同灭菌方法对其质量的影响
5
作者 孙艳 刘源慧 +6 位作者 郭田甜 毕艳艳 金凤 沈庆国 张娜娜 高艳红 关永霞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期418-423,共6页
目的 优化桔梗生药粉湿热灭菌工艺,并考察辐照灭菌、湿热灭菌、乙醇灭菌、干热灭菌对其质量的影响。方法 在单因素试验基础上,以灭菌时间、灭菌温度、干燥温度为影响因素,桔梗总皂苷、桔梗皂苷D含量及灭菌率的综合评分为评价指标,响应... 目的 优化桔梗生药粉湿热灭菌工艺,并考察辐照灭菌、湿热灭菌、乙醇灭菌、干热灭菌对其质量的影响。方法 在单因素试验基础上,以灭菌时间、灭菌温度、干燥温度为影响因素,桔梗总皂苷、桔梗皂苷D含量及灭菌率的综合评分为评价指标,响应面法优化湿热灭菌工艺。评价不同灭菌方法对微生物限度、鉴别项、水分、总灰分、浸出物、含量测定、指纹图谱相似度的影响。结果 最佳条件为灭菌时间35 min,灭菌温度103℃,干燥温度76℃,综合评分为95.14分。4种灭菌方法下微生物限度检查全部合格;灭菌后桔梗皂苷D含量有不同程度的下降,依次为辐照灭菌>湿热灭菌>乙醇灭菌>干热灭菌;指纹图谱相似度依次为辐照灭菌>乙醇灭菌>湿热灭菌>干热灭菌。结论 该方法便于操作,重复性好,生产成本低,灭菌彻底,可为桔梗生药粉大规模工业化生产提供理论依据。 展开更多
关键词 桔梗 生药粉 湿热灭菌工艺 响应面法 灭菌方法 质量
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中药治疗功能性便秘潜在机制研究进展
6
作者 张亚薇 董洋 +5 位作者 潘丽红 陈倩 王丹 刘梦扬 吴昱铮 王涛 《天津中医药》 CAS 2024年第9期1206-1213,共8页
功能性便秘是慢性便秘中最常见的类型,属于慢性功能性肠道疾病,具有反复发作,迁延难愈的特点。虽然,短期便秘不会危及生命,但是便秘引起的胃肠道不适严重影响患者的生活质量,且长期便秘可能增加结直肠肿瘤发生率。中药在增强胃肠动力,... 功能性便秘是慢性便秘中最常见的类型,属于慢性功能性肠道疾病,具有反复发作,迁延难愈的特点。虽然,短期便秘不会危及生命,但是便秘引起的胃肠道不适严重影响患者的生活质量,且长期便秘可能增加结直肠肿瘤发生率。中药在增强胃肠动力,调节肠道蠕动节律等方面具有多成分、多靶点综合调节的明显优势。文章主要总结近年来中药在治疗功能性便秘中的应用和机制研究进展,为进一步研究中药治疗功能性便秘的药效和机制提供参考。 展开更多
关键词 中药 功能性便秘 作用机制
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外来植物药卡瓦胡椒的文献研究及中药药性探讨
7
作者 王晨曦 赵天伦 +5 位作者 秦露 刘广绪 刘亚丽 杨敏 冯帅 李峰 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第10期1526-1531,共6页
卡瓦胡椒药用价值广泛,在欧洲和美国颇负盛名,是欧美地区最受欢迎的植物药之一。要加强对外来植物药的“中药化”研究,赋予其中药药性,必将产生巨大的经济和社会价值,促进中医药事业的长远发展。卡瓦胡椒主要以根及根茎入药,性温热,味苦... 卡瓦胡椒药用价值广泛,在欧洲和美国颇负盛名,是欧美地区最受欢迎的植物药之一。要加强对外来植物药的“中药化”研究,赋予其中药药性,必将产生巨大的经济和社会价值,促进中医药事业的长远发展。卡瓦胡椒主要以根及根茎入药,性温热,味苦辛,归心、肝、肾经;有镇静安神,息风止痉,疏肝解郁,麻醉止痛,祛湿利水等功效。可用于心神不宁,心悸失眠,抽搐痉挛,风湿、舌苔厚白、小便不畅等证。 展开更多
关键词 中医药 外来植物 卡瓦胡椒 中药药性 归经 性味 升降浮沉
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一测多评法同时测定金藤清痹颗粒中7种成分的含量
8
作者 郭威 田雨晴 +2 位作者 沈庆国 关永霞 张贵民 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2334-2338,共5页
目的建立一测多评法同时测定金藤清痹颗粒中没食子酸、新绿原酸、青藤碱、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的含量。方法分析采用AgilentZORBAXSB-C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相水(含0.5%磷酸)-甲醇,梯度洗脱;体... 目的建立一测多评法同时测定金藤清痹颗粒中没食子酸、新绿原酸、青藤碱、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的含量。方法分析采用AgilentZORBAXSB-C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相水(含0.5%磷酸)-甲醇,梯度洗脱;体积流量1.0mL/min;柱温30℃;检测波长262、330nm。以青藤碱为内标,计算其他6种成分的相对校正因子,测定其含量。结果7种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9999),平均加样回收率95.01%~103.59%,RSD0.50%~2.50%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法准确、稳定、可靠,可用于金藤清痹颗粒的质量控制。 展开更多
关键词 金藤清痹颗粒 化学成分 含量测定 一测多评
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熊胆粉不同极性部位HPLC指纹图谱及化学模式识别研究
9
作者 王晨曦 杨敏 +4 位作者 梁红宝 姚景春 张贵民 冯帅 李峰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期770-779,共10页
目的建立熊胆Fel Ursi粉不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价熊胆粉的质量评价提供参考。方法将熊胆粉分别用醋酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、无水乙醇、乙腈依次提取,浓缩干燥,用甲醇溶解,建立HPLC... 目的建立熊胆Fel Ursi粉不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价熊胆粉的质量评价提供参考。方法将熊胆粉分别用醋酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、无水乙醇、乙腈依次提取,浓缩干燥,用甲醇溶解,建立HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析。结果10批熊胆粉醋酸乙酯部位共有模式共标记6个共有峰,三氯甲烷部位共有模式共标记8个共有峰,丙酮部位共有模式共标记8个共有峰,乙腈部位共有模式共标记10个共有峰,乙醇部位共有模式共标记16个共有峰,5种溶剂提取物均指认了4个共有指纹峰(牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸)。综合聚类分析和主成分分析(principal component analysis,PCA)结果,发现相同产地的熊胆粉,受不同厂家加工方法不同的影响,也存在一定的质量差异。通过正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA),发现牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、乙醇部位10号峰、乙腈部位1、2号峰可能是熊胆粉质量差异的主要标志性成分。结论所建立的HPLC指纹图谱可以反映熊胆粉的化学成分分布,为熊胆粉的整体质量评价提供参考,并为熊胆粉谱效关系研究提供一定依据。 展开更多
关键词 熊胆粉 极性部位 HPLC 指纹图谱 质量评价 化学模式识别 牛磺熊去氧胆酸 牛磺鹅去氧胆酸 熊去氧胆酸 鹅去氧胆酸 聚类分析 主成分分析 正交偏最小二乘-判别分析
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白桦脂酸对乳腺癌的干预作用及核心通路预测
10
作者 倪雯婷 邢中夫 +3 位作者 孙成宏 姚景春 张晓平 张贵民 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期50-58,共9页
目的:探索白桦脂酸治疗乳腺癌的潜在作用机制。方法:分别通过PharmMapper、Genecards、Drugbank和Therapeutic Target Database (TTD)数据库获得药物和疾病靶点,用String数据库构建蛋白之间的相互作用关系,通过Metascape数据库获得基因... 目的:探索白桦脂酸治疗乳腺癌的潜在作用机制。方法:分别通过PharmMapper、Genecards、Drugbank和Therapeutic Target Database (TTD)数据库获得药物和疾病靶点,用String数据库构建蛋白之间的相互作用关系,通过Metascape数据库获得基因本体(GO)和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。用Autodock vina软件进行分子对接并使用Pymol对其进行可视化分析。使用Kaplan-Meier Plotter对关键核心靶点进行预后生存分析。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、克隆形成试验、细胞划痕试验、Transwell试验观察白桦脂酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移能力的影响;AO/EB染色及Annexin V-FITC/PI染色观察白桦脂酸对细胞凋亡的影响;Western blot法观察白桦脂酸对PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。结果:筛选出白桦脂酸与乳腺癌的交集靶点的蛋白相互作用网络共有33个节点和100条边,平均节点度值为6.06,筛选得到的关键核心靶点为NR3C1、SRC、ALB、MAPK8、PGR和GRB2,其与白桦脂酸对接得到的结合能均<-5 KJ/mol;GO功能富集中的生物学过程得到473个条目,主要有细胞对激素刺激的反应、细胞内受体信号通路、介导激素信号通路等,分子功能得到42个条目,主要有脂质结合、蛋白激酶活性、转录因子结合等,细胞组分得到7个条目,主要涉及受体复合物、转录因子复合物、膜阀等;KEGG富集分析中共得到172条信号通路,主要有PI3K/AKT通路、Ras通路、ErbB通路、GnRH通路和EGFR通路等。体外实验验证显示:白桦脂酸可以抑制乳腺癌细胞的增殖,且具有剂量依赖性和时间依赖性;白桦脂酸可抑制乳腺癌细胞的迁移、侵袭能力;从定性、定量两个方面证实白桦脂酸可以促进细胞凋亡;白桦脂酸可以显著下调PI3K、AKT和mTOR蛋白表达(P<0.01)。结论:白桦脂酸可抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖、迁移等恶性生物学行为,其机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达相关。 展开更多
关键词 白桦脂酸 网络药理学 乳腺癌 磷脂酰肌醇激酶 蛋白激酶 雷帕霉素
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