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大肠杆菌外膜蛋白酶基因OmpT的克隆及表达
被引量：
1
1
作者
董世雷
刘伟
+3 位作者
朱立颖
王学琴
于宏伟
王欣
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
2011年第2期53-58,共6页
OmpT(Outer-membrane proteases T)是革兰氏阴性细菌分泌到细胞表面具有丝氨酸蛋白酶活性的一种重要蛋白。利用大肠杆菌OmpT降解抗菌肽特性来筛选和改造新型抗菌肽,可以为开发抗OmpT蛋白酶水解新抗菌肽序列提供新的思路和创造条件。根...
OmpT(Outer-membrane proteases T)是革兰氏阴性细菌分泌到细胞表面具有丝氨酸蛋白酶活性的一种重要蛋白。利用大肠杆菌OmpT降解抗菌肽特性来筛选和改造新型抗菌肽,可以为开发抗OmpT蛋白酶水解新抗菌肽序列提供新的思路和创造条件。根据大肠杆菌外膜蛋白酶OmpT的基因序列设计一对引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法,从大肠杆菌K12基因组中扩增获得一段为954 bp的序列,测序结果显示此序列与已公布序列同源性达99.99%。将其序列定向克隆到原核表达载体pET28a上构建重组表达质粒pET28a-OmpT。经IPTG诱导后,在表达宿主菌中特异性的表达出分子量约为36 kDa且具有生物活性的OmpT蛋白。生长曲线试验显示,抗菌肽LL37对带重组表达质粒pET28a-OmpT的大肠杆菌生长没有影响,而对照组的生长明显受到抗菌肽的抑制作用。
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关键词
OMPT
克隆与表达
外膜蛋白酶
抗菌肽
下载PDF
职称材料
题名
大肠杆菌外膜蛋白酶基因OmpT的克隆及表达
被引量：
1
1
作者
董世雷
刘伟
朱立颖
王学琴
于宏伟
王欣
机构
浙江师范
大学
化
学
与
生命科
学
学
院
浙江省农业科
学
院
植物保护
与
微生物
研究所
内蒙古工业
大学
化工
学
院
马歇尔
大学
微生物学
与
免疫学
院
出处
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
2011年第2期53-58,共6页
基金
国际科技合作项目(2008DFA32080)资助
文摘
OmpT(Outer-membrane proteases T)是革兰氏阴性细菌分泌到细胞表面具有丝氨酸蛋白酶活性的一种重要蛋白。利用大肠杆菌OmpT降解抗菌肽特性来筛选和改造新型抗菌肽,可以为开发抗OmpT蛋白酶水解新抗菌肽序列提供新的思路和创造条件。根据大肠杆菌外膜蛋白酶OmpT的基因序列设计一对引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法,从大肠杆菌K12基因组中扩增获得一段为954 bp的序列,测序结果显示此序列与已公布序列同源性达99.99%。将其序列定向克隆到原核表达载体pET28a上构建重组表达质粒pET28a-OmpT。经IPTG诱导后,在表达宿主菌中特异性的表达出分子量约为36 kDa且具有生物活性的OmpT蛋白。生长曲线试验显示,抗菌肽LL37对带重组表达质粒pET28a-OmpT的大肠杆菌生长没有影响,而对照组的生长明显受到抗菌肽的抑制作用。
关键词
OMPT
克隆与表达
外膜蛋白酶
抗菌肽
Keywords
OmpT
cloning and expression
outer membrane proteases
antimicrobial peptide
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌外膜蛋白酶基因OmpT的克隆及表达
董世雷
刘伟
朱立颖
王学琴
于宏伟
王欣
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
2011
1
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