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血浆miRNA在儿童急性淋巴细胞白血病中表达特点 被引量：6
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作者 黄鹏丽 许丽亭 +5 位作者 江倩 郜慧芳 孙嫣然 李伟京 高超 郑胡镛 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2015年第2期69-73,共5页
目的研究血浆miRNAs(hsa-let-7d-5p、hsa-miR-27a-3 p、hsa-miR-29a-3p、hsa-miR-197-3p、hsa-miR-652-3p)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)不同疾病状态的表达特点。方法选取北京儿童医院2009年1月-2013年12月住院的ALL患儿血浆标本70例... 目的研究血浆miRNAs(hsa-let-7d-5p、hsa-miR-27a-3 p、hsa-miR-29a-3p、hsa-miR-197-3p、hsa-miR-652-3p)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)不同疾病状态的表达特点。方法选取北京儿童医院2009年1月-2013年12月住院的ALL患儿血浆标本70例次,包括初诊-缓解配对30对,复发10例;对照组为2013年8月在北京儿童医院进行健康体检的志愿者30例。采用不提取RNA而直接RT-PCR方法检测患儿血浆中5种miRR NAs的表达情况,分析其表达与儿童ALL的诊断、治疗以及与TEL/AML1融合基因之间的关系。结果 5种miRNAs表达水平均呈现初诊组表达水平低于正常组,缓解后表达水平升高,而复发后表达水平再次明显降低的特点,各组间比较差异有显著性(P<0.05);5种miRNAs对儿童ALL的诊断效能提示:ROC曲线下面积(AUC)均≥0.844,其中以hsa-let-7d-5p表达最高,AUC=0.956;在初诊组和缓解组,5种miRNAs的表达情况在有无TEL/AML1融合基因患儿血浆间差异无显著性(P>0.05)。结论血浆中hsa-let-7d-5p、hsa-miR-27a-3p、hsa-miR-29a-3p、hsa-miR-197-3p、hsa-miR-652-3p在儿童ALL的发病过程中可能起到抑癌基因的作用,这为血浆miRNA用于儿童ALL的诊断、治疗及预后监测的分子标记物提供了一定的依据。 展开更多
关键词 儿童 白血病 急性淋巴细胞性 RT-PCR 血浆miRNA
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甲氨蝶呤通过RAS/MAPK/ERK/MYC/CD47信号通路抑制胶质母细胞瘤的生长 被引量：4
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作者 白玥 钟晓松 李文斌 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2018年第2期144-150,共7页
目的研究MTX对RAS蛋白定位改变以及下游信号途径的影响,并探讨MTX抑制人胶质母细胞瘤细胞株U87生长的可能机制。方法不同浓度的MTX(75nmol/L、375nmol/L、750nmol/L、7,500nmol/L、15,000nmol/L)处理U87细胞后,采用MTT法和FCM法分别检... 目的研究MTX对RAS蛋白定位改变以及下游信号途径的影响,并探讨MTX抑制人胶质母细胞瘤细胞株U87生长的可能机制。方法不同浓度的MTX(75nmol/L、375nmol/L、750nmol/L、7,500nmol/L、15,000nmol/L)处理U87细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞活力,细胞凋亡率及细胞周期。RAS-GFP和蛋白质印迹法分别检测RAS蛋白的分布定位和其下游MAPK/ERK蛋白的表达水平。采用逆转录病毒法将RAS-GFP融合基因转导至U87细胞,共聚焦显微镜技术能检测到RAS活化后定位分布,与不同的MAKP/ERK信号途径特异性抑制剂(U0126和PD98059)共培养,采用蛋白质印迹法检测MTX对P-P42/P44 MARK蛋白磷酸化水平的影响以及其调控转录因子c-MYC表达水平发的影响。50nmol/L的MTX处理U87细胞后,进一步用FCM法检测细胞表面分子CD47的表达水平。结果不同浓度的MTX(75nmol/L、375nmol/L、750nmol/L、7,500nmol/L、15,000nmol/L)均能抑制人神经胶质母细胞瘤细胞株U87的增殖,呈剂量依赖性,不同浓度的MTX可将U87细胞阻滞于个G2/S期,并不能直接诱导细胞发生凋亡。转导RAS-GFP融合基因到U87细胞(100%GFP),同对照组相比,用MTX处理后发现RAS蛋白从细胞膜转移到细胞质,从而通过降低或者抑制P-p42/p44MARK蛋白磷酸化水平(P<0.05),以及抑制转录因子c-MYC的表达水平(P<0.05),导致U87细胞生长受到抑制。我们还近一步证明了MTX抑制与神经胶质母细胞瘤生长密切相关的细胞表面分子CD47在不同时间的表达水平。结论我们首次证明MTX通过改变RAS蛋白定位抑制MAPK/ERK/C-MYC信号导致神经胶质母细胞瘤U87细胞株的生长收到抑制,细胞停滞在G2/S期,提示MTX有可能作为复发胶质瘤患者可选的治疗药物。 展开更多
关键词 神经胶质母细胞瘤 甲氨蝶呤 RAS/MAPK/ERK/C-MYC
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