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重复性低氧对小鼠脑组织MMP-2及MMP-9含量与活性的影响 被引量：2
1
作者 崔秀玉 李俊发 +1 位作者 牛晨晨 韩松 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期298-301,共4页
目的：探讨重复性低氧对小鼠脑组织内MMP-2和MMP-9的蛋白表达量及活性的变化。方法：将BALA／C小鼠随机分成常氧对照组（I加）、急性低氧1、2、3、4次组（H1～H4）共5组。应用SDS-PAGE、Western—blot等生化技术，并结合Gel Doc凝胶成... 目的：探讨重复性低氧对小鼠脑组织内MMP-2和MMP-9的蛋白表达量及活性的变化。方法：将BALA／C小鼠随机分成常氧对照组（I加）、急性低氧1、2、3、4次组（H1～H4）共5组。应用SDS-PAGE、Western—blot等生化技术，并结合Gel Doc凝胶成像系统，半定量检测5组小鼠大脑皮层和海马组织内MMP-2及MMP-9的蛋白表达量及其活性的变化。结果：①随着低氧次数的增加，小鼠海马组织内MMP-2的蛋白表达量呈现先增后降的趋势，其中H4组MMP-2蛋白表达量的降低显著（P〈0．05，n=6），而小鼠大脑皮层组织内MMP-2的蛋白表达量变化不明显。此外，在海马和大脑皮层组织内均未检测到MMP-2的活性组分；②海马组织内MMP-9的蛋白表达量随重复性低氧次数的增加，其含量也呈现先增后降的趋势，且H1组MMP-9表达量的增高和H4组MMP-9表达量的降低均具有显著意义（P〈0．05）。同样，海马组织内MMP-9活性组分的变化与其蛋白表达量变化趋势一致，与H0组相比．H1组MMP-9活性组分增高和H4组的降低均显著（P〈0．05）。大脑皮层组织内MMP-9表达量及其活性组分在脑低氧预处理过程中均无显著性变化。结论：MMP-2和MMP-9可能在脑低氧预处理过程中具有一定的作用．且提示其蛋白表达量及活性在大脑皮层和海马组织内的差异变化可能与大脑皮层和海马组织对低氧的选择易损性不同有关。 展开更多
关键词 低氧预处理 基质金属蛋白酶-2/9(MMP-2/9) 海马 大脑皮层
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129位丝氨酸磷酸化α-突触核蛋白DELFIA检测方法的建立及初步应用 被引量：1
2
作者 高歌 查旭 +1 位作者 刘伟进 杨慧 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第5期776-782,共7页
目的建立解离-增强镧系荧光免疫分析(dissociation enhanced lanthanide fluorescent immunoassay,DELFIA)检测129位丝氨酸磷酸化α-突触核蛋白的方法及初步应用。方法使用体外蛋白重组技术纯化得到人源α-syn蛋白单体(α-syn),用Polo... 目的建立解离-增强镧系荧光免疫分析(dissociation enhanced lanthanide fluorescent immunoassay,DELFIA)检测129位丝氨酸磷酸化α-突触核蛋白的方法及初步应用。方法使用体外蛋白重组技术纯化得到人源α-syn蛋白单体(α-syn),用Polo样激酶催化α-syn获得磷酸化α-syn单体(phosphorylatedα-syn monomer,p-α-syn),用4-氧代壬烯醛制备α-syn聚集体(aggregates ofα-syn,OW)及磷酸化α-syn聚集体(aggregates of p-α-syn,OP)。使用Western blotting法和间接ELISA方法验证本实验室前期制备的识别α-syn蛋白N端的多克隆抗体SN16和识别129位丝氨酸磷酸化α-syn蛋白的单克隆抗体C140S。使用SN16作为捕获抗体,C140S作为检测抗体的双抗夹心DELFIA法建立检测OP的标准曲线,并检测Thy 1-α-SYN转基因小鼠血浆内OP的变化。结果考马斯亮蓝染色和Western blotting法检测结果显示体外纯化的人源α-syn蛋白单体(17000)纯度高,并通过催化获得了p-α-syn、OW和OP纯蛋白,均可用作建立标准曲线的标准抗原。Western blotting和酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)结果显示SN16对α-syn、p-α-syn、OW、OP这4种形式的蛋白均可识别,C140S可以识别p-α-syn和OP,说明SN16和C140S可以用作双抗夹心法的配对抗体。间接DELFIA检测结果显示C140S对OP的识别效率更好。双抗夹心DELFIA检测结果显示,SN16-C140S作为配对抗体检测标准抗原的范围为:0.625~20 ng/mL,并建立了检测OP的标准曲线。Wt及Tg组小鼠血浆中OP在12月龄均较6月龄有所增加(P<0.001),Tg组6月龄小鼠血浆中OP显著高于同月龄Wt组(P<0.001),Tg组12月龄小鼠血浆OP较Wt组有增高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论本文建立的SN16-C140S配对的双抗夹心DELFIA体系可以检测Thy1-α-SYN转基因小鼠血浆中聚集的磷酸化α-syn变化情况。 展开更多
关键词 帕金森病 Α-突触核蛋白 磷酸化α-突触核蛋白 解离-增强镧系荧光免疫分析
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Thy1-αSYN转基因小鼠出现代谢紊乱和胰岛形态及功能的改变
3
作者 高歌 卢勇泉 +3 位作者 刘伟进 杨汝宁 张启迪 杨慧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期222-228,共7页
帕金森病(PD)是第二大神经退行性疾病。PD的发病机制仍然不明确,普遍认为α-突触核蛋白(α-synuclein)的聚集和传播引起的神经损伤、线粒体功能障碍、炎症和氧化应激,自噬功能障碍等在PD的发生发展中发挥作用。越来越多的研究认为,代谢... 帕金森病(PD)是第二大神经退行性疾病。PD的发病机制仍然不明确,普遍认为α-突触核蛋白(α-synuclein)的聚集和传播引起的神经损伤、线粒体功能障碍、炎症和氧化应激,自噬功能障碍等在PD的发生发展中发挥作用。越来越多的研究认为,代谢紊乱也是PD的发病机制之一。我们检测了过表达α-突触核蛋白是否能引起小鼠代谢紊乱以及可能的机制。研究分为Thy1-αSYN转基因小鼠组(TG)及同窝对照野生小鼠组(WT),分别检测它们在转棒仪上的停留时间,体重情况,血浆中胰岛素含量,小鼠糖耐量及胰岛素耐量等外周代谢情况。使用苏木精-伊红染色法对两组小鼠胰岛的形态进行观察,分离小鼠胰岛并使用葡萄糖刺激胰岛素分泌检测胰岛素分泌功能。结果显示,12月龄的TG组小鼠与WT组相比运动耐力下降23.1%(P<0.05),体重增加7%(P<0.01),糖耐量降低(P<0.05),胰岛素耐量降低(P<0.05),外周血中胰岛素含量降低20%(P<0.05)。TG组小鼠胰腺内α-突触核蛋白水平较WT组增加1.32倍(P<0.05),TG组小鼠的胰岛面积变小(P<0.05),胰岛个数减少(P<0.01),胰岛素分泌功能下降(P<0.01)。我们的研究提示,α-突触核蛋白在PD中的作用不局限于对多巴胺能神经元的损伤,它能影响代谢及外周器官的形态及功能,这为PD的发病机制提供新的理论依据。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 帕金森病 代谢紊乱 糖耐量 胰岛
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胰岛素抵抗与帕金森病 被引量：4
4
作者 高歌 汪志鹏 +1 位作者 段春礼 杨慧 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2019年第4期249-255,共7页
帕金森病(PD)是第二大神经退行性疾病,而糖尿病是帕金森病的一个高危因素。胰岛素不仅是一种作用于外周的激素,负责葡萄糖平衡和能量代谢,它也可以通过血脑屏障,影响大脑的许多生命过程,包括调节神经元存活和生长、维持突触稳定性等。... 帕金森病(PD)是第二大神经退行性疾病,而糖尿病是帕金森病的一个高危因素。胰岛素不仅是一种作用于外周的激素,负责葡萄糖平衡和能量代谢,它也可以通过血脑屏障,影响大脑的许多生命过程,包括调节神经元存活和生长、维持突触稳定性等。越来越多的研究显示,在帕金森病患者和动物模型的脑中出现胰岛素抵抗。胰岛素信号通路的异常引起α-突触核蛋白的聚集、线粒体功能障碍、神经炎症,以及认知功能减退等。这些都是与PD的发病机制紧密相关的。使用胰岛素增敏药物将是一种潜在的,缓解PD神经退行性病变的新策略。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 帕金森病 Α-突触核蛋白 线粒体功能障碍 神经炎症
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七年制医学本科生神经生物学导师制教育模式探讨(摘要)
5
作者 李峰 李俊发 徐群渊 《青岛大学医学院学报》 CAS 2009年第3期204-204,共1页
关键词 神经生物学 七年制 导师制教学模式
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