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染色及激光显微切割对小鼠牙胚组织总RNA完整度的影响 被引量：2
1
作者 党平 聂敏媛 +5 位作者 崔三哲 汤楚华 史亮 郑翰圣 董蕊 施生根 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期319-322,共4页
目的:观察以常规染色结合激光显微切割(laser microdissection,LMD)技术精确分离获取小鼠牙胚间充质组织对所获得组织总RNA完整度的影响。方法:以LMD技术获取胚胎17 d(embryonic 17,E17)和出生后2 d(postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌... 目的:观察以常规染色结合激光显微切割(laser microdissection,LMD)技术精确分离获取小鼠牙胚间充质组织对所获得组织总RNA完整度的影响。方法:以LMD技术获取胚胎17 d(embryonic 17,E17)和出生后2 d(postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙囊和牙乳头组织;提取组织总RNA后再以2100生物分析仪所提供的核糖体RNA 28s/18s比值(28s/18s Ratio)、RNA完整度数值(RNA integrity number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度。结果:与未经LMD切割的对照组相比,经染色及LMD切割的实验组所提取牙胚组织样品总RNA完整度明显降低;非染色仅实行LMD组样品总RNA完整度高于染色及LMD组,但其完整度仍低于通常基因芯片实验要求。结论:常规染色及LMD过程对所提取牙胚组织总RNA完整度有显著影响。 展开更多
关键词 激光显微切割技术 牙胚发育 间充质 RNA完整度
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小鼠牙胚特异组织的激光显微切割与观察 被引量：1
2
作者 党平 聂敏媛 +5 位作者 崔三哲 汤楚华 史亮 郑翰圣 董蕊 施生根 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第6期376-379,共4页
目的:探索应用激光显微切割(Laser microdissection,LMD)技术获取小鼠牙胚特定部位组织的可行性。方法:选取胚胎期和出生后等多个时期CD1小鼠,取材后制作冰冻切片。经甲酚紫染色后再以莱卡LMD6000激光显微切割系统在高倍镜下分离获取下... 目的:探索应用激光显微切割(Laser microdissection,LMD)技术获取小鼠牙胚特定部位组织的可行性。方法:选取胚胎期和出生后等多个时期CD1小鼠,取材后制作冰冻切片。经甲酚紫染色后再以莱卡LMD6000激光显微切割系统在高倍镜下分离获取下颌第一磨牙牙囊和牙乳头组织;下颌切牙根端上皮组织及其外围间充质组织。结果:应用LMD技术可实现对小鼠下颌第一磨牙及切牙胚胎期、出生后多个时期牙胚特定组织的精确分离。结论:LMD技术可用于分离获取相对均一的小鼠切牙、磨牙牙胚特异组织。 展开更多
关键词 激光显微切割技术 牙胚发育 上皮 间充质
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应用两种激光显微切割系统获取小鼠牙胚特异组织的比较与体会
3
作者 党平 聂敏媛 +6 位作者 崔三哲 董亮 汤楚华 史亮 郑翰圣 董蕊 施生根 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期30-33,共4页
目的:探索2种激光显微切割(laser microdissection)系统应用于切割分离小鼠牙胚特定组织的不同特点。方法:以莱卡LMD6000和蔡司PALM激光显微切割系统分别获取CD1小鼠胚胎期17 d和出生后2 d的下颌第一磨牙牙囊和牙乳头组织。以Trizol法提... 目的:探索2种激光显微切割(laser microdissection)系统应用于切割分离小鼠牙胚特定组织的不同特点。方法:以莱卡LMD6000和蔡司PALM激光显微切割系统分别获取CD1小鼠胚胎期17 d和出生后2 d的下颌第一磨牙牙囊和牙乳头组织。以Trizol法提取2套切割系统获取组织中总RNA,再以RT-PCR法检测两者中管家基因GAPDH表达量的差异。结果:应用莱卡LMD系统获得小鼠下颌第一磨牙牙胚组织中GAPDH基因表达量显著高于以蔡司的PALM系统获得组织中相同基因表达量。莱卡LMD6000激光显微切割系统操作界面友好,切割组织迅速。结论:莱卡LMD6000更适合于下游芯片实验对提取组织RNA完整度较高的要求。 展开更多
关键词 激光显微切割技术 牙胚发育 组织再生
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不同RNA抽提方法对激光显微切割分离小鼠牙胚样品总RNA浓度及完整度影响的研究 被引量：1
4
作者 党平 聂敏媛 +6 位作者 董亮 崔三哲 汤楚华 史亮 郑翰圣 董蕊 施生根 《口腔医学》 CAS 2013年第7期446-449,共4页
目的观察不同RNA抽提方法对激光显微切割(laser microdissection,LMD)分离牙胚样品总RNA浓度及完整度影响。方法本实验按照RNA抽提的不同方式分为试剂盒组、经典Trizol法组以及改良Trizol法组。以LMD技术获取胚胎17d(embryonic 17,E17)... 目的观察不同RNA抽提方法对激光显微切割(laser microdissection,LMD)分离牙胚样品总RNA浓度及完整度影响。方法本实验按照RNA抽提的不同方式分为试剂盒组、经典Trizol法组以及改良Trizol法组。以LMD技术获取胚胎17d(embryonic 17,E17)和出生后2 d(postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙胚组织;以3种不同方法提取各组总RNA后再以安捷伦公司的2100生物分析仪所提供的核糖体RNA 28 S/18 S比值(28 S/18 S ratio)、RNA完整度数值(RNA in-tegrity number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度。比较各组RNA的浓度和完整度,以SPSS软件进行统计分析。结果改良Trizol法所获得RNA浓度最高,与其余2组相比,差异均有显著性;经典Trizol法组RNA浓度略高于试剂盒组,但差异并无显著性;3组间以RIN值、28 S/18 S以及样品电泳图的图形为完整度指标进行比较,均无显著性差异。结论3种RNA抽提方式对样品总RNA获得率和完整度的影响,以改良Trizol法提取的总RNA获得率最高,而3种方法对所提取总RNA完整度影响无统计学差异。改良Trizol法将有利于获得符合高通量实验质检标准的芯片实验样本。 展开更多
关键词 激光显微切割技术 牙胚发育 间充质 RNA完整度 小鼠
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不同乙醇预处理方式对LMD分离牙胚组织总RNA完整度的影响
5
作者 党平 聂敏媛 +6 位作者 董亮 崔三哲 汤楚华 史亮 郑翰圣 董蕊 施生根 《中华老年口腔医学杂志》 2012年第5期265-268,303,共5页
目的:探求不同乙醇预处理方式是否对激光显微切割(Laser microdissection,LMD)技术分离获得的小鼠牙胚组织总RNA完整度有影响。以提高LMD技术获取样品的完整度,使之满足后续基因芯片等高通量实验对样品的质检要求。方法:本实验按照LMD... 目的:探求不同乙醇预处理方式是否对激光显微切割(Laser microdissection,LMD)技术分离获得的小鼠牙胚组织总RNA完整度有影响。以提高LMD技术获取样品的完整度,使之满足后续基因芯片等高通量实验对样品的质检要求。方法:本实验按照LMD切割前是否乙醇预处理的方式分为无预处理LMD组、梯度乙醇处理组以及100%乙醇处理组三组。以LMD技术获取胚胎17天(Embryonic 17,E17)和出生后2天(Postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙胚组织;提取各组总RNA,再以核糖体RNA 28s/18s比值、RNA完整度数值(RNA Integrity Number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度。数据进行统计分析。结果:100%乙醇处理组,RIN值最高且与另两组相比差异有显著性,梯度乙醇处理组RIN值与无预处理LMD组相比,并无显著性差异;以28s/18s比值为指标,100%乙醇预处理组高于其它两组,但差异并无显著性;梯度乙醇处理组与无预处理LMD组间差异亦无统计学意义。结论:100%乙醇直接处理方式更适合用于LMD切割样品的防降解预处理,可显著减少切割过程中的组织RNA完整度破坏。该步操作将有利于获得符合高通量实验质检标准的芯片实验样本。 展开更多
关键词 激光显微切割技术 牙胚发育 间充质 RNA完整度
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