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坛紫菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 张晓娟 王广策 +1 位作者 何林文 陈昌生 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期70-76,共7页
采用同源克隆的方法和RACE技术,从坛紫菜cDNA中获得了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)的序列,该段序列含2538个核苷酸包含一个终止密码子TAG和191 bp的3′端非编码区(UTR),可编码846个氨基酸。该段序列中无跨膜结构和信号肽序列,推导的氨... 采用同源克隆的方法和RACE技术,从坛紫菜cDNA中获得了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)的序列,该段序列含2538个核苷酸包含一个终止密码子TAG和191 bp的3′端非编码区(UTR),可编码846个氨基酸。该段序列中无跨膜结构和信号肽序列,推导的氨基酸序列中C末端第813位氨基酸是丙氨酸(A),表明是一个C3型基因。相似性分析表明,坛紫菜PEPC与其他物种有很高的一致性,约为35%~50%。结构分析显示,该序列具有两个PEPC基因保守活性位点和5种模式的其他功能位点。进化分析显示,坛紫菜PEPC羧化酶氨基酸序列更接近于C3型,进化上更为古老。该实验对进一步深入研究坛紫菜PEPC羧化酶功能及坛紫菜光合作用、碳代谢等具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 坛紫菜 PEPC基因 序列分析 系统进化分析
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草鱼肝细胞中细胞色素P450 3A的酶促动力学 被引量:1
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作者 李聃 杨先乐 +3 位作者 张书俊 胡鲲 林茂 邱军强 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期863-867,共5页
用分光光度计法和反相高效液相色谱法研究了草鱼肝细胞系(GCL)中 CYP3A 探针酶类红霉素-N-脱甲基酶(ERND)和6β-睾酮羟化酶(6β-TOH)的酶促反应。药物利福平(RIF)在浓度为40μM时对 GCL 细胞中 CYP3A 活性具有显著诱导作用,而苯巴比妥(... 用分光光度计法和反相高效液相色谱法研究了草鱼肝细胞系(GCL)中 CYP3A 探针酶类红霉素-N-脱甲基酶(ERND)和6β-睾酮羟化酶(6β-TOH)的酶促反应。药物利福平(RIF)在浓度为40μM时对 GCL 细胞中 CYP3A 活性具有显著诱导作用,而苯巴比妥(PB)和地塞米松(DEX)无显著诱导作用(P<0.05)。在低浓度底物条件下,对照组和40μMRIF 诱导组 GEL 细胞中 ERND 的酶促动力学方程分别为1/V=234.08×1/[S]+2.6544和1/V=85.632×1/[S]+1.9458,6β-TOH 的酶促动力学方程分别为1/V=529.91×1/[S]+14.615和1/V=56.337×1/[S]+2.1017;酶动力学参数表明,RIF 诱导的 CYP3A 亲和力较强,催化效能较高。当底物浓度进一步增高,EYP3A 活性反而降低,致使动力学曲线偏离经典的米氏动力学曲线,该结果表明 GCL 细胞中 CYP3A 存在特殊的负协同效应,这一现象是对鱼类细胞色素 P450(CYP)酶促动力学的有利补充。 展开更多
关键词 细胞色素P450 3A 草鱼肝细胞 酶促动力学 协同效应 利福平
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