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不同来源乳中乳铁蛋白含量的高通量毛细管凝胶电泳检测 被引量：3
1
作者 路梦凡 孙娜娜 +3 位作者 李香云 李汉芳 徐丹 徐秦峰 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第2期54-57,共4页
本研究在前期建立的毛细管凝胶电泳检测牛源乳铁蛋白的基础上,通过筛选分别能够与人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白特异性结合的DNA序列,实现了母乳及羊奶粉中人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白的快速准确定性定量检测。该方法采用非标记DNA探针替... 本研究在前期建立的毛细管凝胶电泳检测牛源乳铁蛋白的基础上,通过筛选分别能够与人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白特异性结合的DNA序列,实现了母乳及羊奶粉中人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白的快速准确定性定量检测。该方法采用非标记DNA探针替代荧光标记的DNA,进一步降低了检测成本,不需要复杂的样品前处理操作,仅需2 min即可完成一个样品的检测,对人源、羊源乳铁蛋白的检出限分别为11.74μg/m L、3.53μg/m L,可作为适用于其他特色生鲜乳(牦牛乳、骆驼乳、驴乳等)中乳铁蛋白含量的一种通用性检测方法。 展开更多
关键词 不同来源乳 毛细管凝胶电泳 高通量 乳铁蛋白检测
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乳及乳制品中乳铁蛋白含量的电泳迁移率检测 被引量：6
2
作者 黄锐 孙娜娜 +3 位作者 张涵 杨孟迪 刘金虎 徐秦峰 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2021年第1期46-50,共5页
凝胶电泳迁移率(EMSA)是研究蛋白质和DNA分子相互作用的经典分子生物学方法。本研究根据乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)和DNA分子的特异性结合,基于Lf-DNA复合物和DNA分子迁移率差异,建立了一种聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测乳铁蛋白的方法... 凝胶电泳迁移率(EMSA)是研究蛋白质和DNA分子相互作用的经典分子生物学方法。本研究根据乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)和DNA分子的特异性结合,基于Lf-DNA复合物和DNA分子迁移率差异,建立了一种聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测乳铁蛋白的方法。实验中以FAM荧光基团标记DNA分子,根据凝胶成像图中Lf-DNA复合物荧光条带的存在与否、荧光条带灰度值的大小,来判断样品中乳铁蛋白是否存在、含量多少,从而实现乳铁蛋白的定性与定量检测。结果表明,该方法具有良好的特异性及准确性,经过简单稀释后便可直接应用于乳及乳制品中乳铁蛋白的准确定量检测。 展开更多
关键词 乳铁蛋白检测 PAGE 电泳迁移率分析 DNA-蛋白质相互作用
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羊乳中牛乳成分的可视化环介导等温扩增检测方法 被引量：4
3
作者 澹台玮 徐秦峰 +1 位作者 张文娟 李艳妮 《陕西科技大学学报》 CAS 2020年第1期71-75,80,共6页
环介导等温扩增(LAMP)技术能够快速检测食品中的动物源性成分,但常用的有机检测染料稳定性差、Stoke′s位移小等导致荧光颜色区分不够明显.基于此,根据线粒体保守序列设计牛、羊特异性引物,同时采用核酸分子“光开光”钌(II)配合物[Ru(b... 环介导等温扩增(LAMP)技术能够快速检测食品中的动物源性成分,但常用的有机检测染料稳定性差、Stoke′s位移小等导致荧光颜色区分不够明显.基于此,根据线粒体保守序列设计牛、羊特异性引物,同时采用核酸分子“光开光”钌(II)配合物[Ru(bpy)2(dppz)]2+作为荧光染料,建立了一种简便、快速、直观地检测羊奶制品中掺入牛源性奶成分的可视化LAMP方法.结果显示,该方法特异性好,对其他物种没有交叉反应及假阳性现象的发生,对牛、羊的检测灵敏度可达0.007 pg/μL和0.7 pg/μL,并能检测出羊乳中掺假0.1%的牛乳.因此,该方法可直接通过荧光目视比色判定检测结果,具有快速、直观、低成本等优点,为羊奶真实性现场快速检测提供技术支持. 展开更多
关键词 环介导等温扩增 可视化检测 羊乳 牛乳
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羊乳中牛乳成分的直接实时环介导等温扩增检测 被引量：2
4
作者 澹台玮 徐秦峰 +1 位作者 马西亚 张文娟 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2020年第1期38-41,46,共5页
根据线粒体保守序列选取牛、羊特异性引物,建立无需核酸提取的直接实时环介导等温扩增(LAMP)技术,用于羊乳中掺入牛乳成分的检测。结果表明,所建立的LAMP方法特异性好,对其他物种没有交叉反应及假阳性现象的发生,对牛、羊的检测灵敏度可... 根据线粒体保守序列选取牛、羊特异性引物,建立无需核酸提取的直接实时环介导等温扩增(LAMP)技术,用于羊乳中掺入牛乳成分的检测。结果表明,所建立的LAMP方法特异性好,对其他物种没有交叉反应及假阳性现象的发生,对牛、羊的检测灵敏度可达0.07 pg/μL和0.7 pg/μL,在掺假样品(即二元混合乳)中直接实时LAMP技术可检测到掺入1%的牛乳成分。通过对10种市售羊乳制品检测显示,直接实时LAMP方法与经DNA提取的实时LAMP方法检测结果一致。因此建立的直接实时LAMP技术无需核酸提取,样品经简单处理即可作为模板直接进行LAMP扩增,简化了样品前处理过程,缩短了检测时间,适用于羊乳制品中牛乳成分的快速检测。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 直接实时检测 羊乳 牛乳
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