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MTMR14通过PTEN/Akt信号通路改善低氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的机制研究
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作者 钟妮尔 杨光 安慧仙 《河北医学》 CAS 2023年第5期705-710,共6页
目的:研究肌管相关蛋白14(myotubularin-related protein 14,MTMR14)在低氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤中的作用及机制。方法:小鼠心肌细胞采用低氧6 h和复氧12h构建H/R模型。采用腺相关病毒(adeno-associated ... 目的:研究肌管相关蛋白14(myotubularin-related protein 14,MTMR14)在低氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤中的作用及机制。方法:小鼠心肌细胞采用低氧6 h和复氧12h构建H/R模型。采用腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的基因转染技术来过表达MTMR14。心肌细胞分为常氧组、H/R组、H/R+control AAV组、H/R+AAV-MTMR14组、H/R+AAV-MTMR14+AAV-PTEN组、H/R+AAV-MTMR14+MK-2206组。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)方法检测MTMR14的mRNA表达水平。采用Western blotting检测MTMR14、Bax、Bcl2、Caspase-3、PTEN、Akt的蛋白水平。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测心肌细胞存活率。采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)细胞毒性实验检测心肌细胞损伤。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling,TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果:与常氧组比较,H/R组MTMR14表达水平显著降低(P<0.05)。与H/R+control AAV组比较,H/R+AAV-MTMR14组MTMR14表达水平显著升高(P<0.01)。与H/R组和H/R+control AAV组比较,H/R+AAV-MTMR14组心肌细胞的存活率显著提高,凋亡率显著降低(P<0.01)。与H/R组和H/R+control AAV组比较,H/R+AAV-MTMR14组PTEN蛋白水平显著降低,Akt蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01)。与H/R+AAV-MTMR14组比较,H/R+AAV-MTMR14+AAV-PTEN组PTEN蛋白水平显著身高,Akt蛋白磷酸化水平显著降低,心肌细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。与H/R+AAV-MTMR14组比较,H/R+AAV-MTMR14+MK-2206组Akt蛋白磷酸化水平显著降低,心肌细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论:MTMR14通过调控PTEN/Akt信号通路来改善H/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 心肌细胞 低氧/复氧 肌管相关蛋白14 Akt PTEN
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