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隐花色素1基因在肿瘤坏死因子α诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用研究
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作者 李锴 朱志辉 《临床内科杂志》 CAS 2021年第4期262-266,共5页
目的探讨隐花色素1(CRY1)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法采用10 ng/ml的TNF-α处理肾小管上皮细胞HK-2,分别培养0 h(0 h组)、12 h(12 h组)、24 h(24 h组)、48 h(48 h组),并以正常培养的细胞作为对照(NC... 目的探讨隐花色素1(CRY1)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法采用10 ng/ml的TNF-α处理肾小管上皮细胞HK-2,分别培养0 h(0 h组)、12 h(12 h组)、24 h(24 h组)、48 h(48 h组),并以正常培养的细胞作为对照(NC)组。将si-con、si-CRY1质粒转染至HK-2中后(si-con组和si-CRY1组)再用10 ng/ml的TNF-α培养24 h,分别记为TNF-α+si-con组和TNF-α+si-CRY1组。采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、CRY1、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白表达水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CRY1 mRNA表达水平。结果与0 h组相比,12 h、24 h、48 h组肾小管上皮细胞细胞凋亡率、Cleaved caspase-3、Bax、CRY1表达水平、IL-1β、IFN-γ、IL-6水平显著升高,Bcl-2表达水平显著降低;与si-con组相比,si-CRY1组肾小管上皮细胞凋亡率、CRY1、Cleaved caspase-3、Bax表达水平、IL-1β、IFN-γ、IL-6水平显著降低,Bcl-2表达水平显著升高;与TNF-α+si-con组相比,TNF-α+si-CRY1组肾小管上皮细胞细胞凋亡率、CRY1、Cleaved caspase-3、Bax表达水平、IL-1β、IFN-γ、IL-6水平显著降低,Bcl-2表达水平显著升高;与si-con组相比,si-CRY1组肾小管上皮细胞p-p38 MAPK表达水平显著降低;与NC组相比,TNF-α组肾小管上皮细胞p-p38 MAPK表达水平显著升高;与TNF-α+si-con组相比,TNF-α+si-CRY1组肾小管上皮细胞p-p38 MAPK表达水平显著降低(P<0.05)。结论CRY1可抑制TNF-α诱导的肾小管上皮细胞凋亡和炎症因子分泌,其机制可能与p38 MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 隐花素1 肿瘤坏死因子-Α 肾小管上皮细胞 凋亡 p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路
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