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增强定向造血分化信号提高人胚胎干细胞向自然杀伤细胞生成的效率
1
作者 张朝晖 尹小凤 +7 位作者 徐博宁 毕清华 赖强强 季妍 刘涛 戴礼猛 刘高科 邓有才 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期839-846,共8页
目的探讨在造血分化阶段增强定向造血(DH)信号对人胚胎干细胞(hESCs)分化形成的自然杀伤(NK)细胞(也称为hESC-NK细胞)生成效率和功能的影响。方法hESC(H1)经离心法形成拟胚体,在诱导造血分化的第0至8天,对照组加入BMP4、VEGF、bFGF、SC... 目的探讨在造血分化阶段增强定向造血(DH)信号对人胚胎干细胞(hESCs)分化形成的自然杀伤(NK)细胞(也称为hESC-NK细胞)生成效率和功能的影响。方法hESC(H1)经离心法形成拟胚体,在诱导造血分化的第0至8天,对照组加入BMP4、VEGF、bFGF、SCF等细胞因子;而增强定向造血(DH)组在对照组的基础上添加WNT激动剂(CHIR99021)和Nodal-activin抑制剂(SB431542);进而采用一致的方法分化形成NK细胞。使用流式细胞术和靶细胞K562共培养等方法分析造血分化效率、NK细胞生成效率、体外效应功能及表面受体等相关分子表达。结果相较于对照组,DH组在造血分化阶段第8天动脉生血内皮细胞(CD34^(+)DLL4^(+))数量显著增加,原始造血相关细胞(CD34^(-)CD43^(+))显著降低(P<0.05)。在NK细胞分化第28天分析发现,DH组NK细胞(CD45^(+)CD56^(+))数量显著增加,效应功能相关分子IFN-γ、Granzyme B、Perforin、CD107a虽微弱上升,但无统计学差异,激活性受体CD16a和CD69明显增加,但NKP46显著降低,抑制性受体NKG2A显著增加,CD96显著降低(P<0.05)。结论在hESC向造血分化过程中增强定向造血信号,在不影响NK细胞体外功能的情况下显著提高NK细胞生成效率和CD16a表达,为提高hESC-NK细胞或iPSC-NK细胞生成效率提供了一种新的思路。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 自然杀伤细胞 定向造血 SB431542 CHIR99021
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遗传咨询中应用二代测序技术的伦理边界 被引量：3
2
作者 徐小峰 陈功 +1 位作者 王燕 白云 《中国医学伦理学》 2019年第3期340-344,共5页
二代测序技术已广泛用于遗传咨询,但新技术应用却存在两大问题——缺少统一的技术规范和明确的伦理界限,致使行业发展受限和民众权益受损。前一问题的解决依赖技术进步,而后者则需要划定伦理边界。遗传咨询应遵循WHO的建议和准则,其中... 二代测序技术已广泛用于遗传咨询,但新技术应用却存在两大问题——缺少统一的技术规范和明确的伦理界限,致使行业发展受限和民众权益受损。前一问题的解决依赖技术进步,而后者则需要划定伦理边界。遗传咨询应遵循WHO的建议和准则,其中不伤害、行善、自主和公正的医学伦理四条基本原则构成遗传咨询伦理的原则边界,而实践中知情同意则是二代测序伦理原则边界的刚性红线。国内履行知情同意面临诸多问题,建议首先从技术角度形成应用二代测序时知情同意的五类15个告知要点。 展开更多
关键词 遗传咨询 二代测序 伦理边界
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遗传咨询中应用二代测序技术的法律边界 被引量：1
3
作者 陈功 徐小峰 +1 位作者 王燕 白云 《中国医学伦理学》 2019年第2期217-225,共9页
飞速发展的医学遗传学和民众不断增长的专业医疗服务需求,为二代测序技术的科学研究和临床应用提供了广阔空间。伴随"健康中国"建设目标,精准医疗迅速融入我国民众生活和医疗服务体系。二代测序技术是精准医疗的核心,其在遗... 飞速发展的医学遗传学和民众不断增长的专业医疗服务需求,为二代测序技术的科学研究和临床应用提供了广阔空间。伴随"健康中国"建设目标,精准医疗迅速融入我国民众生活和医疗服务体系。二代测序技术是精准医疗的核心,其在遗传咨询中广泛应用的同时,也产生知情同意、基因隐私和基因歧视等特殊法律问题。通过聚焦基因知情权、基因隐私权、基因平等权等三个层面,系统梳理我国法律和司法解释、行政法规、部门规章、其他规范性文件等的具体条款,揭示在现行法律体系下,如何依据相关法规对遗传咨询新技术所涉法律问题进行规制。 展开更多
关键词 遗传咨询 二代测序 法律边界
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA对食管癌细胞ncRNA/mRNA表达谱的影响 被引量：1
4
作者 王少博 戴礼猛 章波 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第11期1811-1814,共4页
目的:分析组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理前后,食管癌细胞株EC109中差异表达的非编码RNA(ncRNA)和mRNA表达谱,初步预测与TSA作用相关的ncRNA和mRNA。方法:采用MTT、细胞周期等方法检测TSA的效应;运用应用芯片技术分别检测TSA处理前后EC... 目的:分析组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理前后,食管癌细胞株EC109中差异表达的非编码RNA(ncRNA)和mRNA表达谱,初步预测与TSA作用相关的ncRNA和mRNA。方法:采用MTT、细胞周期等方法检测TSA的效应;运用应用芯片技术分别检测TSA处理前后EC109细胞中ncRNA和mRNA表达谱变化,并对差异ncRNA和mRNA表达谱进行整合分析。结果:TSA以剂量时间依赖方式抑制细胞增殖,细胞周期阻滞和凋亡的发生。芯片检测共发现461个ncRNA和758个mRNA显著性差异表达,生物信息学分析显示差异涉及红比霉素、阿霉素代谢过程、氧化还原、核小体的装配、染色质结构组织和端粒的结构组织等。通过数据库分析预测及整合分析,得到了361个ncRNA-mRNA靶基因对。结论:差异表达的ncRNA和mRNA对TSA的生物学效应密切关联,为进一步研究基因功能及其在肿瘤中的生物学意义奠定基础。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 食管癌细胞 非编码RNA 基因芯片
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研究性实验教学在医学遗传学第二课堂中的经验与分析 被引量：2
5
作者 戴礼猛 郭洪 +1 位作者 王艳艳 白云 《中国优生与遗传杂志》 2018年第3期121-122,共2页
医学遗传学第二课堂教学作为第一课堂教学的延伸和补充,有效解决了遗传学理论教学与临床实践脱节的问题。笔者在第二课堂教学改革中,引入研究性实验教学方法,基于临床遗传病例引导学生开展遗传病学习及科学研究。教学过程基于遗传病分... 医学遗传学第二课堂教学作为第一课堂教学的延伸和补充,有效解决了遗传学理论教学与临床实践脱节的问题。笔者在第二课堂教学改革中,引入研究性实验教学方法,基于临床遗传病例引导学生开展遗传病学习及科学研究。教学过程基于遗传病分析流程,从家系分析、文献及数据库运用、实验方案设计实施、结果分析与总结等逐步展开。结果证实该教学法可充分调动教学积极性,培养了学生对遗传病的综合分析能力,训练了学生的科研思维及科研能力,在医学院校中具有推广价值。 展开更多
关键词 研究性实验教学 医学遗传学 第二课堂 教学方法
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