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非小细胞肺癌的转移特征及预后分析 被引量:23
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作者 许子寒 郑林鹏 +3 位作者 杨峤 李奉 余永新 孙建国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期871-876,共6页
目的基于大量人群的数据集,分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)转移部位的特异性及不同转移模式的预后差异。方法从SEER(Surveillance, Epidemiology, and End Results)数据库中收集2010-2014年诊断为NSCLC的转移性患... 目的基于大量人群的数据集,分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)转移部位的特异性及不同转移模式的预后差异。方法从SEER(Surveillance, Epidemiology, and End Results)数据库中收集2010-2014年诊断为NSCLC的转移性患者,利用Kaplan-Meier法和对数秩检验进行生存分析,通过Cox比例风险模型分析改善总体生存(overall survival, OS)的相关因素。结果从SEER数据库中收集到38 755例具有骨、肝、脑、肺任一部位转移的NSCLC患者。诊断时,年龄超过50岁的患者占93.89%,且以白种人为主(77.38%)。入组患者中,肿瘤中度分化(Ⅱ级)患者约占12.50%,肿瘤低分化(Ⅲ级)患者占25.55%,组织学亚型以腺癌为主,约占72.52%。对于所有NSCLC患者,最常见的单转移部位是骨(22.43%),最少累及的部位是肝(5.87%),骨和肺是最常见的双部位转移组合(7.40%),骨、肝和肺是最常见的三部位转移组合(3.16%)。孤立性肝转移在单转移中具有最差的OS(P<0.001),多部位转移中,含有肝转移的组合也具有更差的OS(P<0.001)。结论 NSCLC不论是单个还是多个器官转移,骨都是最常累及的靶器官。单独肝转移或多部位联合肝转移的NSCLC患者预后较差,孤立性肺转移预后最好。 展开更多
关键词 转移模式 预后 SEER数据库 非小细胞肺癌 组织学亚型
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首发肺癌患者的心理弹性水平及其影响因素 被引量:8
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作者 汤玲一 叶容 +2 位作者 李冬梅 王旖旎 赵静 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2019年第6期762-764,共3页
癌症是威胁人类健康的重大疾病之一,其发病率呈持续升高的总体趋势,已经成为危害人类健康的重大疾病[1]。大多数初诊患者都会经历心理阶梯,初期否认阶段,是产生焦虑、抑郁等负面情绪的时期,却也是接受治疗的重要时期。其产生的负面情绪... 癌症是威胁人类健康的重大疾病之一,其发病率呈持续升高的总体趋势,已经成为危害人类健康的重大疾病[1]。大多数初诊患者都会经历心理阶梯,初期否认阶段,是产生焦虑、抑郁等负面情绪的时期,却也是接受治疗的重要时期。其产生的负面情绪会降低治疗的顺从性和积极性,成为拖延治疗的重要因素。受经济、卫生资源配置等多因素的限制,癌症患者的照护工作下放至各个家庭,患者的配偶、子女或父母成为主要照顾者,参与患者的疾病治疗、护理、康复等多重任务[2]。肺癌患者由于生存率较低、躯体症状及心理社会问题较多,因而支持性照护需求较为突出,所以其照护者也不堪其扰。因此,如何改善首发肺癌患者的心理健康、提高患者接受能力成为关注要点[3]。心理弹性是指个体面对压力和逆境时表现出的一种能力或特质,使个体能够成功地适应和良好的发展[4]。这是成为解决心理问题的重要因素,作为积极心理学的重要分支。研究认为,心理弹性水平不仅受到个体的后天教育、训练及环境的影响,也以先天特性为发生基础。研究说明心理弹性水平与个体适应力呈正相关,则心理弹性水平越高,个体适应力越强[5]。本文将心理弹性量表应用于首诊肺癌患者,目的在于了解该群体心理弹性水平及其影响因素,以便为首发肺癌患者提高生活质量提供准确依据。 展开更多
关键词 肺癌 心理弹性水平 照护需求
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三结构域蛋白21通过下调自噬相关蛋白4B抑制肝细胞癌细胞增殖的实验研究 被引量:8
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作者 李涛 陈岺曦 +3 位作者 孙梁博 闫小晶 连继勤 何凤田 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期815-822,共8页
目的探讨三结构域蛋白21(tripartite motif 21,TRIM21)抑制肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖的可能机制。方法采用TCGA数据库的样本数据分析TRIM21在HCC组织中的表达水平;Western blot检测HCC细胞系中TRIM21表达情况,在H... 目的探讨三结构域蛋白21(tripartite motif 21,TRIM21)抑制肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖的可能机制。方法采用TCGA数据库的样本数据分析TRIM21在HCC组织中的表达水平;Western blot检测HCC细胞系中TRIM21表达情况,在HepG2细胞中过表达TRIM21,并在SMMC7721细胞中敲低TRIM21;CCK-8和细胞克隆形成实验分别检测过表达和敲低TRIM21对HepG2和SMMC7721细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡的情况;Western blot检测TRIM21对自噬相关蛋白4B(autophagy related 4B,ATG4B)水平的影响;分别在HepG2细胞中下调ATG4B表达和在SMMC7721细胞中过表达ATG4B,CCK-8检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞周期变化。结果 TRIM21在HCC组织中的表达水平较正常肝组织显著下调(n=49,P<0.05);在HepG2细胞中过表达TRIM21能显著降低细胞存活率(P<0.01)、抑制细胞增殖(P<0.01),在SMMC7721细胞中下调TRIM21的表达能显著增加细胞存活率(P<0.05)、促进细胞增殖(P<0.05)。过表达或敲低TRIM21对HCC细胞凋亡影响不明显;TRIM21在HCC细胞中可以抑制ATG4B的表达;而在HCC细胞中过表达或下调ATG4B也可以发挥促进或抑制细胞增殖的效果(P<0.05),ATG4B影响HCC细胞增殖的机制主要是改变细胞周期进程。结论 TRIM21在HCC中可通过下调ATG4B而抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 三结构域蛋白21 细胞增殖 自噬相关蛋白4B 肝癌
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基于iRECIST标准的晚期NSCLC免疫治疗的真实世界研究 被引量:5
4
作者 陈明镜 杨峤 +5 位作者 许子寒 李奉 杨光荣 游启爱 余永新 孙建国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期480-486,共7页
目的根据iRECIST标准(modified RECIST1.1 for immune based therapeutics),评估免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的真实世界数据。方法按真实世界研究方法... 目的根据iRECIST标准(modified RECIST1.1 for immune based therapeutics),评估免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的真实世界数据。方法按真实世界研究方法,纳入本院2016年8月10日至2019年7月10日接受免疫检查点抑制剂治疗的晚期NSCLC患者,按iRECIST标准评估一线单药、一线联合、二线单药、二线联合的临床疗效,包括最佳应答(best overall response,bOR)、无进展生存时间(progression-free survival,PFS)、缓解持续时间(duration of response,DoR)等,并评价免疫相关不良反应(immue-related adverse events,irAEs)。结果共纳入61例Ⅳ期NSCLC患者,其中男性54例,女性7例;中位年龄58岁;腺癌31例,鳞癌30例。一线单药bOR为27.3%,中位PFS(mPFS)为11.8个月;一线联合bOR为47.1%,mPFS未达到;一线总体bOR为35.9%,mPFS为11.8个月;二线单药bOR为30%,mPFS为6.0个月;二线联合bOR为41.7%,mPFS未达到;二线总体bOR为36.4%,mPFS为6.3个月。最常见的irAEs为1~2级皮肤毒性(5例,8.20%)。结论基于iRECIST标准评估免疫检测点抑制剂治疗晚期NSCLC的真实世界研究显示,一线单药、一线联合及二线单药bOR及PFS获益优于既往RCT研究结果,而二线联合的bOR及PFS显著优于单药治疗,irAEs可控。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 免疫检查点抑制剂 最佳应答 无进展生存期 免疫相关不良反应
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B细胞在荷瘤小鼠PD-(L)1抗体治疗中的作用
5
作者 侯俊雷 杨学智 +3 位作者 董芬 查皓然 杨菲 朱波 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期804-814,共11页
目的探讨肿瘤浸润性B细胞对程序性死亡受体(配体)1[programmed death(ligand)1,PD-(L)1]抑制剂治疗效果的影响,阐明B细胞影响免疫治疗的潜在机制。方法通过使用公共数据库中的黑色素瘤患者免疫治疗队列,分析B细胞与无进展生存时间(progr... 目的探讨肿瘤浸润性B细胞对程序性死亡受体(配体)1[programmed death(ligand)1,PD-(L)1]抑制剂治疗效果的影响,阐明B细胞影响免疫治疗的潜在机制。方法通过使用公共数据库中的黑色素瘤患者免疫治疗队列,分析B细胞与无进展生存时间(progression-free survival,PFS)以及免疫治疗响应的关系;使用TC-1和B16-OVA肿瘤细胞对6~8周龄雌性C57BL/6小鼠的皮下及肝脏进行荷瘤,构建肿瘤模型。比较B细胞清除对PD-(L)1抗体治疗效果的影响;对第15天的TC-1肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)进行流式细胞术检测,明确T细胞的数目、功能及表型变化;通过流式细胞术及实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测B细胞表面分子以及细胞因子。结果基于ICBatlas公共数据库中的ERP105482数据分析,肿瘤中CD19高表达的黑色素瘤患者PFS较低表达者更长(753 d vs 95 d,HR=0.3,95%CI:0.13~0.65,P=0.003)。B细胞在免疫治疗应答的患者中显著富集(P=0.01)。在小鼠TC-1肝脏荷瘤模型中,PD-(L)1抗体治疗后肿瘤质量明显减小(P<0.01),而B细胞的清除削弱了治疗效果。B细胞通过促进T细胞浸润和功能来增强PD-(L)1抗体治疗,且治疗后B细胞亚群发生变化,表现为PD-1低表达亚群增加(P<0.01)。结论PD-(L)1抗体治疗后,B细胞亚群中PD-1表达的下降可能是B细胞促进PD-(L)1抗体治疗效果的潜在机制。 展开更多
关键词 程序性死亡受体配体1 程序性死亡受体1 B细胞 肿瘤微环境 免疫检查点抑制剂
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肿瘤相关性贫血与SARS-CoV-2特异性记忆CD8^(+)T细胞丰度的相关性分析
6
作者 杨学智 侯俊雷 +3 位作者 朱恩健 龙海霞 查皓然 朱波 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1047-1056,共10页
目的 探讨肿瘤相关性贫血对外周血中新型冠状病毒特异性记忆CD8^(+)T细胞丰度的影响。方法 纳入2023年6-7月在火箭军特色医学中心住院治疗的HLA-A*11∶01阳性中晚期实体瘤患者34例。根据血红蛋白浓度将患者分为无贫血组(HGB≥120 g/L,n=... 目的 探讨肿瘤相关性贫血对外周血中新型冠状病毒特异性记忆CD8^(+)T细胞丰度的影响。方法 纳入2023年6-7月在火箭军特色医学中心住院治疗的HLA-A*11∶01阳性中晚期实体瘤患者34例。根据血红蛋白浓度将患者分为无贫血组(HGB≥120 g/L,n=14)、轻度贫血组(120 g/L> HGB≥90 g/L,n=14)与中重度贫血组(HGB<90 g/L,n=6)。分离外周血单个核细胞,利用新冠病毒抗原表位刺激并扩增记忆CD8^(+)T细胞,使用ELISPOT筛选阳性表位,构建Tetramer。利用扩增后细胞检测Tetramer+细胞比例、数量及ELISPOT斑点数,用以反映新冠病毒特异性记忆CD8^(+)T细胞丰度。分析患者血红蛋白浓度与Tetramer+细胞比例、数量及ELISPOT斑点数的相关性。分析不同贫血组Tetramer+细胞比例、数量及ELISPOT斑点数的差异。结果 34例患者中男性25例,女性9例;年龄36~78岁,中位年龄57岁。患者扩增后Tetramer+细胞比例、数量及ELISPOT斑点数与血红蛋白浓度均呈正相关关系(P<0.05);与无贫血组相比,中重度贫血组患者Tetramer+细胞比例、数量及ELISPOT斑点数均明显降低(P<0.05)。结论 肿瘤患者外周血新冠病毒特异性记忆CD8^(+)T细胞的丰度与血红蛋白浓度正相关,提示肿瘤相关性贫血可能通过降低外周血中记忆CD8^(+)T细胞的丰度导致患者病毒易感性增高。 展开更多
关键词 肿瘤相关性贫血 记忆T细胞 新型冠状病毒
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临床参数对Ⅳ期非小细胞肺癌一线EGFR-TKIs疗效的预测价值 被引量:4
7
作者 郑林鹏 许子寒 +4 位作者 朱广阔 李奉 杨峤 余永新 孙建国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期346-352,共7页
目的通过分析临床参数与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factorreceptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)疗效的关系,为一线Ⅳ期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) EGFR-TKIs治疗疗效寻找简... 目的通过分析临床参数与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factorreceptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)疗效的关系,为一线Ⅳ期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) EGFR-TKIs治疗疗效寻找简易的标志物。方法回顾性分析2010-2016年在本院接受一线EGFR-TKIs (厄洛替尼、吉非替尼、埃克替尼)治疗的Ⅳ期EGFR阳性突变NSCLC患者的临床参数与疗效的关系。结果共纳入123例,其中男性43例,女性80例,年龄28~84岁,客观缓解率(objective response rate,ORR) 47. 97%,疾病控制率(disease control rate,DCR) 100%,中位无进展生存期(median progression-free survival,m PFS) 11. 0个月,中位总生存期(median overall survival,m OS) 22. 7个月。单因素分析显示治疗前低NSE、CA125或Cyfra21-1者PFS较长(14. 2 vs 9. 1个月,P <0. 001; 12. 4 vs9. 5个月,P=0. 024; 12. 3 vs 9. 5个月,P=0. 033)。而PS评分0~1分,低NSE、CA125、Cyfra21-1或CA15-3者OS较长(m OS:24. 0 vs 16. 5个月,P=0. 001; 27. 7 vs 17. 3个月,P <0. 001; 25. 4 vs 20. 2个月,P=0. 002; 25. 7 vs 18. 1个月,P=0. 027; 25. 5 vs 18. 7个月,P=0. 009)。多因素分析结果显示CA125和NSE是PFS的独立影响因素,而CA125、NSE、CA15-3、肝转移、PS评分是OS的独立影响因素。CA125、Cyfra21-1、CA15-3和NSE 4个参数中多个参数升高的PFS、OS较单个参数升高短(m PFS:9. 3 vs11. 8个月,P=0. 045; m OS:18. 7 vs 27. 4个月,P=0. 001)。结论治疗前低水平的CA125或NSE预示着Ⅳ期NSCLC一线EGFR-TKIs治疗的PFS较长,而PS评分0~1分,低水平的NSE、CA125或CA15-3则预示OS较长。CA125、Cyfra21-1、CA15-3和NSE 4个临床参数联合有望成为预测Ⅳ期NSCLC一线EGFR-TKIs疗效的简易标志物。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体 酪氨酸激酶抑制剂 临床参数 肿瘤标志物 预后
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肺大细胞神经内分泌癌临床特征分析及预后模型建立 被引量:3
8
作者 杨峤 许子寒 +3 位作者 郑林鹏 陈明镜 余永新 孙建国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1156-1160,共5页
目的基于监测、流行病学和结果数据库(Surveillance, Epidemiology, and End Results,SEER),分析肺大细胞神经内分泌癌(pulmonary large cell neuroendocrine carcinoma, PLCNEC)的临床特征和患者生存情况,建立预后模型。方法从SEER数... 目的基于监测、流行病学和结果数据库(Surveillance, Epidemiology, and End Results,SEER),分析肺大细胞神经内分泌癌(pulmonary large cell neuroendocrine carcinoma, PLCNEC)的临床特征和患者生存情况,建立预后模型。方法从SEER数据库中收集2004-2013年诊断为PLCNEC的患者1 656例,描述其基本临床特征,通过Kaplan-Meier法绘制生存曲线并进行生存分析。使用Cox比例风险模型探索与总生存期(overall survival,OS)相关的临床特征,并建立可视化的预测患者预后的列线图(nomogram)模型,通过重复抽样对模型进行验证。结果 1 656例PLCNEC患者中,男性(55.37%)和诊断年龄≥65岁(52.05%)居多,以白种人(84.12%)为主;40.94%做过手术治疗,37.80%做过放疗,51.93%做过化疗。生存分析发现:患者中位生存期为11个月,1年生存率为46.5%。Cox比例风险模型多因素分析发现:女性、黑种人及其他种族、手术治疗、放疗及化疗为保护因素,而年龄≥65岁,肿瘤长径增大,肿瘤向邻近组织、区域淋巴结及远处扩散为危害因素,肿瘤部位对生存影响无明显差异。利用上述与OS相关的临床特征,建立可视化列线图模型,可通过基本临床特征来预测PLCNEC患者的1年生存率。重复抽样验证发现该模型1年生存率预测值与实际值一致性较好(C-index为0.76)。结论 PLCNEC患者中位OS为11个月,1年生存率为46.5%;性别、诊断年龄、种族、基线肿瘤长径、肿瘤扩散、手术治疗、放射治疗及化疗等临床特征与PLCNEC生存预后相关;成功建立可视化列线图模型,可预测PLCNEC患者1年生存率。 展开更多
关键词 肺大细胞神经内分泌癌 临床特征 SEER数据库 列线图 预后模型
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己糖激酶2在NSCLC厄洛替尼耐药中的作用及机制 被引量:3
9
作者 游启爱 卓文磊 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期453-459,共7页
目的观察糖酵解关键酶己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,探讨HK2在NSCLC厄洛替尼耐药中的作用及机制。方法在线数据库分析肺癌组织中HK2的表达与预后的关系以及厄洛替尼对NS... 目的观察糖酵解关键酶己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,探讨HK2在NSCLC厄洛替尼耐药中的作用及机制。方法在线数据库分析肺癌组织中HK2的表达与预后的关系以及厄洛替尼对NSCLC HK2基因表达的影响;q-PCR体外验证HK2在正常肺上皮细胞、肺癌细胞中的表达差异;q-PCR、Western blot检测厄洛替尼敏感细胞(PC9)、耐药细胞(PC9/ER)中HK2的基础表达以及厄洛替尼干预后HK2的表达情况;进而使用HK2抑制剂3-溴丙酮酸处理PC9/ER,采用CCK-8法检测PC9/ER耐药性、流式细胞术分析PC9/ER的增殖能力。结果HK2与肺癌患者预后不良相关,HK2高表达组患者的总体生存期(overall survival,OS)较低表达组明显缩短(P<0.05);细胞实验证实HK2在PC9/ER中相对高表达,且厄洛替尼可降低PC9细胞中HK2的表达,而对PC9/ER细胞HK2的表达无显著影响;3-溴丙酮酸可有效抑制PC9/ER中HK2的表达,CCK-8法结果表明,PC9/ER 3-溴丙酮酸处理组厄洛替尼IC_(50)值较PC9/ER对照组显著降低[(0.005±0.001)vs(1.967±0.436)μmol/L,P=0.016],提示3-溴丙酮酸处理后能让耐药的PC9/ER细胞恢复对厄洛替尼的敏感性;3-溴丙酮酸处理组增殖指数为(14.1±0.8)%,较对照组(30.4±2.3)%显著减少(P=0.008),提示3-溴丙酮酸能明显抑制耐药细胞增殖。结论HK2是NSCLC患者的不良预后指标,可诱导NSCLC厄洛替尼耐药。可能和其促进糖酵解的机制有关,抑制其表达有望成为逆转NSCLC厄洛替尼耐药的有效策略。 展开更多
关键词 己糖激酶2 非小细胞肺癌 厄洛替尼 细胞增殖
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外周血中性粒细胞与淋巴细胞比率对NSCLC患者放疗效果的预测价值 被引量:2
10
作者 孔锐 李奉 +1 位作者 郑林鹏 孙建国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期1261-1266,共6页
目的探讨放疗前后外周血中性粒细胞与淋巴细胞比率(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)及其变化(ΔNLR)对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者放疗效果的预测价值。方法回顾性分析2011年3月至2016年5月本院行单... 目的探讨放疗前后外周血中性粒细胞与淋巴细胞比率(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)及其变化(ΔNLR)对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者放疗效果的预测价值。方法回顾性分析2011年3月至2016年5月本院行单纯放疗有完整随访资料的70例晚期NSCLC患者的临床资料,近期疗效分放疗敏感(PR+CR)组和非敏感(SD+PD)组,远期疗效以中位PFS为临界值分两组,分别检测各组放疗前后的血常规。以中位NLR为临界值分为高低两组,以放疗后NLR升高或降低分组,分别对比各组近期疗效的差别。结果放疗前NLR及其他血细胞指标与放疗敏感性、无进展生存期(progression-free survival,PFS)无相关性(P>0.05)。放疗后NLR、ΔNLR与近期疗效呈负相关(P<0.05),而与PFS无明显相关;放疗后NLR中位值为4.93,当NLR<4.93时,客观缓解率(ORR)为69%,NLR≥4.93时,ORR为37%;与放疗前比较,放疗后NLR降低(ΔNLR<0)组ORR为71%,而放疗后NLR升高(ΔNLR≥0)组ORR为45%。放疗后PLR、MLR及ΔPLR、ΔMLR也与近期疗效呈负相关(P<0.05),且放疗后PLR、MLR与NLR存在一致性,ΔPLR、ΔMLR与ΔNLR存在一致性(r>0.5,P<0.001)。结论放疗后的NLR、ΔNLR可作为与放疗近期疗效相关的预测指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 NLR ΔNLR 放射治疗
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新型血浆外参照设计及核酸检测分析的研究
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作者 古骄阳 牛凯 +4 位作者 余永新 郑林鹏 杨峤 张露萍 孙建国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期1239-1245,共7页
目的设计新型血浆外参照(plasma external reference,PLACON),用于人类血浆mRNA、miRNA的检测分析。方法从低级别物种秀丽隐杆线虫基因组中选取一段保守序列,利用BLAST检索PLACON序列的特异性,设计成为新型血浆外参照。以恶性肿瘤患者... 目的设计新型血浆外参照(plasma external reference,PLACON),用于人类血浆mRNA、miRNA的检测分析。方法从低级别物种秀丽隐杆线虫基因组中选取一段保守序列,利用BLAST检索PLACON序列的特异性,设计成为新型血浆外参照。以恶性肿瘤患者血浆样品及癌细胞株上清液,利用实时荧光定量PCR法,在血浆或细胞上清液中分别以PLACON、β-actin、GAPDH、U6为参照,检测血浆mRNA、miRNA和细胞上清液mRNA并进行对比分析。结果 BLAST检索出PLACON序列具有较好的特异性,与人类基因组无交叉性。熔解曲线均显示RT-qPCR反应特异性较高,PLACON在血浆中mRNA水平扩增的循环阈值(cycle threshold,CT)均显著低于GAPDH、β-actin(P<0.01),在血浆中miRNA水平扩增的CT值显著低于U6(P<0.01)。PLACON在癌细胞上清中进行mRNA扩增实验的验证,得到相似的结果。结论 PLACON序列特异性好,在血浆中比内参照更有优势,稳定性更高,扩增效率更高,可用于血浆mRNA、miRNA的定量检测。 展开更多
关键词 外参照 内参照 RT-QPCR 血浆miRNA
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二氯乙酸盐激活ROS-JNK通路增强索拉非尼对肝癌细胞增殖的抑制作用 被引量:1
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作者 孙梁博 姚洁 +4 位作者 李涛 陈岺曦 闫小晶 何凤田 连继勤 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期1627-1634,共8页
目的探讨二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)与索拉非尼(sorafenib)联合使用对肝癌细胞Hep3B增殖抑制的效果及可能机制。方法将Hep3B细胞分为对照组(DMSO)、DCA处理组(5 mmol/L)、索拉非尼处理组(10μmol/L)和联合组(5 mmol/L DCA联合10μ... 目的探讨二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)与索拉非尼(sorafenib)联合使用对肝癌细胞Hep3B增殖抑制的效果及可能机制。方法将Hep3B细胞分为对照组(DMSO)、DCA处理组(5 mmol/L)、索拉非尼处理组(10μmol/L)和联合组(5 mmol/L DCA联合10μmol/L索拉非尼)4个组,处理24 h后,在显微镜下观察各组细胞形态;采用CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡;通过Western blot检测凋亡相关蛋白PARP的表达和p-JNK的水平;采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞ROS的变化;用流式细胞仪检测加入抗氧化剂和阻断JNK通路后的细胞凋亡的变化。结果 DCA和索拉非尼联合处理24 h能够显著改变细胞形态,杀伤细胞。与对照组和单独用药组比较,联合组显著增强对肝癌Hep3B细胞的增殖抑制效果(P<0.05),明显增加Hep3B细胞中PARP的剪切与JNK的磷酸化水平,胞内ROS水平也明显升高;联合使用抗氧化剂NAC可显著抑制DCA和索拉非尼处理导致的JNK磷酸化水平升高和对Hep3B细胞的增殖抑制效果。结论 DCA和索拉非尼联合使用可显著抑制肝癌细胞Hep3B的增殖,其机制可能与激活ROS-JNK通路有关。 展开更多
关键词 二氯乙酸盐 索拉非尼 肝癌 细胞增殖 ROS-JNK通路
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引流淋巴结在肿瘤记忆CD8+T细胞形成中的作用
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作者 谢双龙 查皓然 +2 位作者 杨菲 朱波 林治华 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期645-651,共7页
目的探究引流淋巴结(tumor-draining lymph nodes,TDLN)在肿瘤记忆CD8^(+)T细胞形成中的作用,明确新辅助PD-L1抗体治疗对抗肿瘤免疫记忆的影响。方法建立小鼠CT26/MC38-OVA结直肠癌皮下移植瘤模型,采用新辅助PD-L1抗体治疗,荷瘤15 d后... 目的探究引流淋巴结(tumor-draining lymph nodes,TDLN)在肿瘤记忆CD8^(+)T细胞形成中的作用,明确新辅助PD-L1抗体治疗对抗肿瘤免疫记忆的影响。方法建立小鼠CT26/MC38-OVA结直肠癌皮下移植瘤模型,采用新辅助PD-L1抗体治疗,荷瘤15 d后手术切除肿瘤和TDLN。手术30 d后运用肿瘤再挑战模型评估TDLN在新辅助PD-L1抗体治疗条件下对免疫记忆形成的影响。利用过继回输实验探究新辅助PD-L1对肿瘤特异性CD8^(+)T细胞的影响,运用流式细胞术在术时(效应阶段)和术后30 d(记忆阶段)检测CD45.1^(+)CD8^(+)T细胞在各组织中的分布以及记忆表型变化。结果新辅助PD-L1抗体治疗显著缩小手术时肿瘤大小(P<0.05),肿瘤再挑战结果显示,接受新辅助PD-L抗体治疗,肿瘤生长显著减缓,而TDLN的切除导致肿瘤生长加剧(P<0.05)。但对肿瘤再挑战进行长期观察发现,无论是否接受新辅助PD-L1抗体治疗,肿瘤最终均消退。过继回输实验结果表明,TDLN及非引流淋巴结(no-draining lymph nodes,NLN)中贮存的CD45.1^(+)CD8^(+)T细胞数量最多(P<0.05),且在记忆阶段,中枢记忆T细胞(Tcm)和组织驻留记忆T细胞(Trm)主要分布于TDLN及NLN(P<0.05)。新辅助PD-L1抗体治疗后,引流淋巴结及非引流淋巴结等组织中CD45.1^(+)CD8^(+)T细胞的分布和记忆表型没有明显变化。结论TDLN是记忆CD8^(+)T细胞的主要驻留场所,但新辅助PD-L1抗体治疗条件下,TDLN切除并不影响其长期抗肿瘤免疫能力。 展开更多
关键词 肿瘤引流淋巴结 记忆T细胞 新辅助免疫检查点阻断
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