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分子生物学技术在食源性致病菌快速检测中的研究进展 被引量：4
1
作者 张德福 高乐 +6 位作者 张明 杜知心 吕欣然 柏雪 张国清 李学鹏 励建荣 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第13期368-377,共10页
食源性致病菌是影响食品安全的重要因素之一,高效快速的食源性致病菌检测技术对保障食品安全尤为重要。在食源性致病菌快速检测方法中,分子生物学技术因特异性强、精准度高、检测速度快等优势得到广泛应用。本文介绍了多种分子生物学技... 食源性致病菌是影响食品安全的重要因素之一,高效快速的食源性致病菌检测技术对保障食品安全尤为重要。在食源性致病菌快速检测方法中,分子生物学技术因特异性强、精准度高、检测速度快等优势得到广泛应用。本文介绍了多种分子生物学技术在食源性致病菌快速检测中的应用,包括聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、依赖核酸序列的扩增(nuclear acid sequence-based amplification,NAS-BA)、重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)、重组酶介导的等温核酸扩增(recombinase-aided isothermal amplification,RAA)、基因芯片(gene chip,GC),并对这些技术的应用现状、适用范围以及存在的问题等进行了分析总结,以期对未来的食源性致病菌快速检测技术提供理论参考。 展开更多
关键词 分子生物学技术 食源性致病菌 快速检测 食品安全
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副溶血性弧菌不耐热溶血素的生物信息学分析与分子动力学模拟
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作者 张德福 于振兴 +4 位作者 张明 吕欣然 张永勤 张国清 励建荣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期251-257,I0009-I0012,共11页
副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性人畜共患致病菌,可引发人类胃肠炎等食源性疾病。副溶血性弧菌具有多种毒力因子,热不稳定溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)即是其中之一。该研究对副溶血性弧菌的tlh基因进行了克隆及测序,对tlh基因编码... 副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性人畜共患致病菌,可引发人类胃肠炎等食源性疾病。副溶血性弧菌具有多种毒力因子,热不稳定溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)即是其中之一。该研究对副溶血性弧菌的tlh基因进行了克隆及测序,对tlh基因编码的TLH蛋白进行了生物信息学分析及结构和功能预测。结果表明,TLH蛋白由418个氨基酸组成,预测分子质量为47.36 kDa。在TLH蛋白中确定了几个保守的结构域和基序,包括SGNH水解酶结构域和GDSL基序;对TLH蛋白的三维结构进行了同源建模及验证,在此基础上通过分子动力学模拟分析其稳定性、与4-硝基苯基月桂酸酯(p-nitrophenylaurate,PNPL)的相互作用能力及结合底物对结构紧密度和残基灵活性的影响,揭示了催化三联体Ser153-His390-Asp393周边是一个重要的药物靶点活性口袋,具有高度保守的残基序列,并在底物结合后表现出残基灵活性差异。该研究分析了副溶血性弧菌TLH蛋白的性质和结构,可以为保障水产品的安全性、提高水产品原料安全评价水平提供理论支持。 展开更多
关键词 基因克隆 副溶血性弧菌 不耐热溶血素(tlh) 生物信息学分析 分子动力学模拟
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大肠杆菌噬菌体的分离、生物学特性及初步应用 被引量：1
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作者 张明 寇文利 +5 位作者 张国清 董浩 张永勤 宋钢 张德福 励建荣 《中国渔业质量与标准》 2023年第5期31-38,共8页
本研究以大肠杆菌SPHJ965为宿主菌,从生活污水中分离到一株大肠杆菌噬菌体,并命名为ΦSPHJ965,进一步分析了该噬菌体对温度和pH的稳定性、对紫外线和氯仿的敏感性,测定了最佳感染复数及一步生长曲线,最后进行了清除污水中大肠杆菌的初... 本研究以大肠杆菌SPHJ965为宿主菌,从生活污水中分离到一株大肠杆菌噬菌体,并命名为ΦSPHJ965,进一步分析了该噬菌体对温度和pH的稳定性、对紫外线和氯仿的敏感性,测定了最佳感染复数及一步生长曲线,最后进行了清除污水中大肠杆菌的初步应用。结果表明,ΦSPHJ965的效价为3.4×10^(9)PFU/mL,对pH以及氯仿的耐受性较强,但对温度和紫外线较敏感,60℃以上时滴度有明显的下降,经紫外线照射30 min后便丧失对宿主菌的裂解能力。该噬菌体最佳感染复数是0.00001,潜伏期为10 min,暴发期为90 min,暴发量为40 PFU/cell。对宿主菌的清除实验表明,ΦSPHJ965在6 h内对宿主菌有较好的抑制作用,6 h后实验组的OD_(595)值逐渐升高,但始终远低于对照组值,说明该噬菌体对宿主菌具有一定的裂解效果,但不能将宿主菌完全裂解。污水经ΦSPHJ965处理1 h后菌落总数和大肠杆菌数均有明显的下降,说明该噬菌体有较好的抑菌效果。综上可知,ΦSPHJ965的效价较高,对大肠杆菌的去除效果较好,具有作为大肠杆菌生物清除剂的应用潜能。 展开更多
关键词 大肠杆菌 噬菌体 分离 生物学特性
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日本对虾与海参生态健康混养技术 被引量：1
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作者 张国清 李静 +5 位作者 刘闯 张皓 王丰 金勇 朱俊 张冬冬 《科学养鱼》 2023年第3期66-67,共2页
自2005年以来,海参养殖产业是辽宁锦州市渔业支柱产业,年产值20亿元以上。这一产业极大地促进了当地水产捕捞、加工及相关服务业的蓬勃发展,带动了渔民的生产就业,经济效益、社会效益显著。北方海参养殖业充分利用海参养殖池塘资源套养... 自2005年以来,海参养殖产业是辽宁锦州市渔业支柱产业,年产值20亿元以上。这一产业极大地促进了当地水产捕捞、加工及相关服务业的蓬勃发展,带动了渔民的生产就业,经济效益、社会效益显著。北方海参养殖业充分利用海参养殖池塘资源套养日本对虾,以实现经济效益和生态效益最大化。笔者于2019-2022年进行混养试验研究。 展开更多
关键词 支柱产业 日本对虾 服务业 水产捕捞 生态健康 海参养殖 混养技术 辽宁锦州
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