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脑缺血再灌注损伤程度与自噬相关基因LC3、mTOR表达的相关性研究 被引量：15
1
作者 李丹丹 肖学进 +1 位作者 秦书俭 包翠芬 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期182-186,共5页
目的探讨局灶性脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion,CIR）程度与自噬微管相关蛋白轻链3抗体-Ⅱ（Autophagy microtubule associated protein light chain 3 antibody-Ⅱ,LC3-Ⅱ）、雷帕霉素靶蛋白抗体（Rapamycin target ... 目的探讨局灶性脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion,CIR）程度与自噬微管相关蛋白轻链3抗体-Ⅱ（Autophagy microtubule associated protein light chain 3 antibody-Ⅱ,LC3-Ⅱ）、雷帕霉素靶蛋白抗体（Rapamycin target protein antibody,m TOR）表达的相关性。方法采用线栓阻断法阻塞大脑中动脉2 h制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型;观察各组间的神经功能缺失评分、TTC梗死体积;应用免疫印迹、免疫荧光法检测大脑顶叶的LC3-Ⅱ、m TOR的表达。结果 TTC染色显示,梗死体积在缺血再灌24 h达高峰。WB、免疫荧光显示,LC3-Ⅱ在IR中表达增加,且在缺血再灌24 h表达最高;m TOR在缺血再灌24 h、48 h表达最低。相关性分析显示,TTC染色梗死体积与LC3-Ⅱ表达水平高度正相关。结论脑缺血再灌注损伤程度可能与LC3、m TOR的表达水平相关。 展开更多
关键词 自噬 局灶性脑缺血再灌注 自噬微管相关蛋白轻链3抗体 雷帕霉素靶蛋白抗体
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自噬相关基因Atg12和LC3-Ⅱ在脑缺血再灌注大脑表达的实验研究 被引量：4
2
作者 杜晓薇 韩瑞祎 +4 位作者 闵鹤鸣 李丹丹 肖学进 包翠芬 包翠芳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期162-166,共5页
目的:探讨局灶性脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIR)时大脑皮质自噬相关蛋白-12(autophagy related protein-12,Atg12)和自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ(autophagy microtubule-associated protein light chain ... 目的:探讨局灶性脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIR)时大脑皮质自噬相关蛋白-12(autophagy related protein-12,Atg12)和自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ(autophagy microtubule-associated protein light chain 3 antibodyⅡ,LC3-Ⅱ)的激活规律,在此基础上探讨其对脑组织自噬的影响。方法:实验分为假手术组(sham组)和缺血再灌注组(CIR组),且CIR组下设CIR 0、6、12、24、48、72h共6个亚组。除sham组和CIR 24h组为每组20只外(其中10只用于模型鉴定),其余为每组10只。采用大脑中动脉栓塞术制备局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后采用神经功能评分、2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色、脑组织含水量来鉴定脑缺血模型是否成功。采用免疫组化和免疫印迹方法检测大脑皮质Atg12和LC3-Ⅱ的表达规律。结果:与sham组比较,CIR 24h组可见明显的神经功能缺损、脑梗死和明显的脑水肿。免疫组化结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[阳性率分别为(15.49±4.18)%、(18.54±3.62)%],在24~48 h达高峰[(33.63±3.26)%、(29.62±1.73)%],72 h之后逐渐减弱[(24.90±3.96)%、(20.36±3.51)%]。免疫印迹结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[表达量为(0.372 3±0.076 5)、(0.148 4±0.011 5)],在24~48 h达高峰[(0.741 7±0.071 8)、(0.451 3±0.019 0)],72 h之后逐渐减弱[(0.365 0±0.042 0)、(0.245 1±0.030 3)]。结论:脑缺血时Atg12和LC3-Ⅱ在调节脑缺血的脑组织自噬方式中具有重要的作用。 展开更多
关键词 自噬 脑缺血再灌注 自噬相关蛋白-12 自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ
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ZHX3基因沉默对BMSCs中BMP2/smad通路的影响 被引量：1
3
作者 李艳芹 张苗苗 +3 位作者 闵鹤鸣 王艳 秦书俭 袁静 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期990-994,共5页
目的:探讨转录抑制因子——锌指蛋白和同源框3(zinc fingers and homeoboxes 3,ZHX3)基因沉默对骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)中BMP2/smad通路相关因子骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、磷酸化smad1(... 目的:探讨转录抑制因子——锌指蛋白和同源框3(zinc fingers and homeoboxes 3,ZHX3)基因沉默对骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)中BMP2/smad通路相关因子骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、磷酸化smad1(phospho-smad1(或pho-smad1))表达的影响。方法:构建ZHX3低表达慢病毒载体转染大鼠BMSCs,同时设阴性对照空载病毒转染BMSCs及空白对照不做任何处理的BMSCs。采用荧光显微镜下测定细胞转染率、免疫印迹技术鉴定转染效果、免疫细胞化学和免疫印迹技术定性定量检测ZHX3沉默时BMP2、pho-smad1和smad4的表达情况。细胞经成骨诱导液处理后进行碱性磷酸酶和茜素红染色检测各组细胞成骨能力。结果:1复苏培养的细胞具有BMSCs形态。2转染后,ZHX3低表达组和空载体对照组均表达绿色荧光,转染率分别为(93.18±4.41)%和(92.56±4.35)%,空白对照组不表达荧光,未见转染阳性细胞(F=1 123.464,P<0.05)。3免疫细胞化学及免疫印迹结果显示,BMP2、pho-smad1、smad4于3组细胞内均可见阳性表达,但ZHX3低表达组的BMP2、pho-smad1水平(0.383 0±0.006 3,0.329 1±0.025 8)明显高于空白对照组(0.306 2±0.011 6,0.209 0±0.017 0)和空载体对照组(0.291 2±0.022 2,0.180 0±0.018 7),P<0.05;而ZHX3低表达组smad4的表达(0.107 4±0.004 3)显著低于空白对照组(0.380 1±0.023 6)和空载体对照组(0.353 7±0.016 7),P<0.05。4空白对照组、空载体对照组、ZHX3低表达组均可见碱性磷酸酶阳性表达的细胞及矿化结节,但后者数量均小于前两者。结论:ZHX3基因低表达可延迟BMSCs体外成骨能力,可能通过调控BMP2/smad通路中的smad4来发挥作用。 展开更多
关键词 锌指蛋白和同源框3 基因沉默 骨髓间充质干细胞 骨形成蛋白 SMAD
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氯喹对大鼠脑缺血再灌注自噬相关蛋白的影响
4
作者 肖学进 李丹丹 +3 位作者 梁佳 李霞 秦书俭 包翠芬 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期402-408,共7页
目的探讨氯喹对大鼠脑缺血再灌注自噬相关蛋白的影响及其机制。方法取75只大鼠随机分为假手术组(Sham),模型组(Model),氯喹(CQ)20、40、60 mg/kg组,每组15只。应用线栓法使右脑中动脉栓塞(MCAO),栓塞2 h。3个药物组于栓塞后立即腹腔注射... 目的探讨氯喹对大鼠脑缺血再灌注自噬相关蛋白的影响及其机制。方法取75只大鼠随机分为假手术组(Sham),模型组(Model),氯喹(CQ)20、40、60 mg/kg组,每组15只。应用线栓法使右脑中动脉栓塞(MCAO),栓塞2 h。3个药物组于栓塞后立即腹腔注射CQ 20、40、60 mg/kg,其余各组注射2 ml 0.9%氯化钠。再灌注24 h后,采用神经功能缺损评分、TTC染色判断模型是否制作成功,采用免疫荧光和免疫印迹法检测大鼠脑自噬相关蛋白的表达。结果 (1)Sham组,Model组,CQ 20、40、60 mg/kg组神经功能缺损评分,分别为0、2.67±0.49、2.93±0.26、2.40±0.51及1.93±0.70。通过TTC染色与Model组比较梗死面积,CQ 20 mg/kg组增大,CQ 40 mg/kg组无明显变化,CQ 60 mg/kg组减小。(2)免疫荧光和免疫印迹结果显示各组均有蛋白(Atg5、Atg7、Beclin1、Atg12)表达,与Model组比较,其中Sham组仅有极少量表达(P<0.05),CQ 20 mg/kg组表达量无明显差异,CQ 60 mg/kg组的表达量明显减少(P<0.05)。结论氯喹对大鼠脑缺血再灌注损伤有双重作用,低剂量20 mg/kg加重损伤,高剂量60 mg/kg减轻损伤。其机制可能与某些脑自噬相关蛋白表达的量有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 氯喹 自噬
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原花青素对2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠脑组织半胱氨酸蛋白酶3表达的影响 被引量：2
5
作者 宋程光 闵鹤鸣 +2 位作者 杨鑫 赵传胜 闵连秋 《中国基层医药》 CAS 2019年第6期693-696,共4页
目的研究原花青素(Procyanidin,PC)对2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠脑组织半胱氨酸蛋白酶3表达的影响.方法遵循随机原则,将40只健康SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠按顺序编号,分为正常大鼠脑缺血组、2型糖尿病脑缺血组、原花青素三个剂量组(原... 目的研究原花青素(Procyanidin,PC)对2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠脑组织半胱氨酸蛋白酶3表达的影响.方法遵循随机原则,将40只健康SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠按顺序编号,分为正常大鼠脑缺血组、2型糖尿病脑缺血组、原花青素三个剂量组(原花青素-1、2、3组,分别予原花青素粉剂50 mg·kg^-1·次^-1、100 mg·kg^-1·次^-1、200 mg·kg^-1·次^-1),每组8只大鼠.制作2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠模型,免疫组化SABC染色法检测半胱氨酸蛋白酶3(cysteine proteinase-3,Caspase-3)的表达,计数大鼠缺血侧大脑皮质区每高倍镜视野Caspase-3蛋白的阳性细胞数.结果与正常大鼠脑缺血组的(11.42±2.52)个比较,2型糖尿病脑缺血组大鼠脑组织Caspase-3阳性细胞数(15.00±2.38)个(t=2.17,P<0.01);与2型糖尿病脑缺血组比较:原花青素-1、2、3组均能不同程度减少,Caspase-3蛋白表达(9.38±2.00)个,(7.71±1.55)个,(6.96±1.57)个(t=2.86、3.13、3.36,均P<0.01),其中原花青素-2、3组较原花青素-1组下降更明显(t=1.92、2.03,P<0.01),但原花青素-2、3组间差异无统计学意义(t=1.13,P>0.05).结论 2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠Caspase-3蛋白表达明显增加,原花青素能降低Caspase-3蛋白的表达,从而可能抑制细胞凋亡. 展开更多
关键词 缺氧缺血 脑 糖尿病 2型 原花青素类 半胱氨酸蛋白水解酶类 细胞凋亡 自由基 再灌注损伤 大鼠 Sprague-dawley
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留学生医学胚胎学全英文教学的实践
6
作者 王丹 张秋华 +1 位作者 王雅光 夏蒲 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期347-348,共2页
组织学与胚胎学是一门重要的基础医学课程。胚胎学同属形态学和发育生物学的范畴，是儿科、妇产科等临床学科的基础课程，是研究人体发生、生长和发育机制的科学。根据以往教学情况，学生理解和记忆都较为困难，另对于留学生，国内教师... 组织学与胚胎学是一门重要的基础医学课程。胚胎学同属形态学和发育生物学的范畴，是儿科、妇产科等临床学科的基础课程，是研究人体发生、生长和发育机制的科学。根据以往教学情况，学生理解和记忆都较为困难，另对于留学生，国内教师采用英文授课，其课堂讲授和教学效果对教师是挑战。笔者通过教学实践，就我校留学生授课的准备工作和课堂情况总结几点体会。 展开更多
关键词 基础医学课程 教学情况 胚胎学 留学生 英文 课堂讲授 发育生物学 基础课程
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