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2019年四川省部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的遗传变异分析 被引量：3
1
作者 孔军 朱国坡 +4 位作者 康斌 武玉梅 李少丽 邵攀峰 尹忠良 《江苏农业科学》 北大核心 2021年第8期68-73,共6页
为了解2019年四川省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因的遗传变异情况,采用RT-PCR方法对来自该省部分地区猪场的36份疑似PRRS猪的组织样品进行PRRSV ORF5基因测序,并对所获得的基因序列进行了生物信息学分析。结果显示,成功扩增出1... 为了解2019年四川省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因的遗传变异情况,采用RT-PCR方法对来自该省部分地区猪场的36份疑似PRRS猪的组织样品进行PRRSV ORF5基因测序,并对所获得的基因序列进行了生物信息学分析。结果显示,成功扩增出14条PRRSV ORF5基因片段。同源性分析显示,14条PRRSV ORF5基因序列均为基因Ⅱ型毒株,分属于1、3、8这3个不同的谱系,以NADC30为代表的谱系1和以QYYZ为代表的谱系3各5株,以JXA1为代表的谱系8毒株4株,各毒株间核苷酸和推导氨基酸的同源性分别为78.5%~100.0%、78.0%~100.0%。氨基酸序列分析结果显示,14个毒株GP5蛋白上3个主要的抗原表位上均存在广泛的变异,同时谱系1和谱系3毒株与毒力相关的位点也发生了不同程度的突变,这些突变可能影响病毒毒力及有助于病毒逃避机体的免疫系统。结果表明,2019年四川省PRRSV呈多亚型毒株同时流行的复杂局面,有必要对PRRSV的流行和变异情况进行实时监测,以此选择更为合适的疫苗毒株及免疫程序,结合严格的生物安全措施,从而达到科学防控PRRS的效果。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 遗传变异
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猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒抗原含量实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：1
2
作者 李雪峰 康斌 +6 位作者 赵炳武 武玉梅 戴伶俐 董鹏 张建春 张春阳 斯琴高娃 《畜牧与饲料科学》 2021年第1期8-13,共6页
依据GenBank公布的猪圆环病毒2型Cap基因序列,在保守区域设计特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系,建立评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并验证灭活剂用量和灭... 依据GenBank公布的猪圆环病毒2型Cap基因序列,在保守区域设计特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系,建立评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并验证灭活剂用量和灭活时间对检测结果的影响。结果显示:该方法只对猪圆环病毒2型基因有特异性扩增,其他3种对照病毒基因的扩增结果均为阴性;检测灵敏度达到102.0 TCID50/mL,比普通PCR方法高100倍;方法的重复性好,对同一样品进行10次检测,变异系数为2.28%;不同灭活剂用量和灭活时间对结果的影响较小,不会因各厂家使用的灭活剂用量和灭活时间不同,影响疫苗对比实验的公平性。该研究成功建立了一种评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,用于猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中病毒抗原含量的定量,其结果可以反映不同猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中抗原含量差异,为研究猪圆环病毒2型灭活疫苗病毒抗原含量评估方法提供了新的思路。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 猪圆环病毒2型 灭活疫苗 Cap基因
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实时荧光定量PCR法检测猪伪狂犬病毒灭活疫苗抗原含量的研究 被引量：1
3
作者 李雪峰 康斌 +3 位作者 戴伶俐 武玉梅 赵炳武 张春阳 《四川畜牧兽医》 2021年第3期29-31,34,共4页
本研究根据GenBank公布的猪伪狂犬病毒gB基因保守序列设计引物和TaqMan探针,采用实时荧光定量PCR方法检测猪伪狂犬病毒灭活疫苗的抗原含量,并对方法的特异性和敏感性进行验证。结果显示:该方法灵敏度可达10~2 TCID_(50)/mL,只对猪伪狂... 本研究根据GenBank公布的猪伪狂犬病毒gB基因保守序列设计引物和TaqMan探针,采用实时荧光定量PCR方法检测猪伪狂犬病毒灭活疫苗的抗原含量,并对方法的特异性和敏感性进行验证。结果显示:该方法灵敏度可达10~2 TCID_(50)/mL,只对猪伪狂犬病毒有特异性扩增曲线,其他4种对照病毒均为阴性;检测猪伪狂犬病毒灭活疫苗样品,结果可以反映出疫苗样品中病毒抗原含量有差异。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 猪伪狂犬病毒 灭活疫苗 抗原
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微生物拮抗检测方法的优化及其在秸秆发酵用菌株的应用 被引量：2
4
作者 萨初拉 陶金山 +6 位作者 苏少锋 吴青海 其布日 高娃 吉鹏华 朱兴宇 呼和 《畜牧与饲料科学》 2020年第5期19-26,共8页
在利用复合菌添加剂提高青贮品质和营养价值的研究中,首先需要确定菌株间的拮抗特性,以便获得最佳组合效果。利用传统的1/2组合菌饼法和牛津杯法检测了6种微生物间的拮抗特性。结果显示,仅产朊假丝酵母菌和黑曲霉菌之间存在弱拮抗现象... 在利用复合菌添加剂提高青贮品质和营养价值的研究中,首先需要确定菌株间的拮抗特性,以便获得最佳组合效果。利用传统的1/2组合菌饼法和牛津杯法检测了6种微生物间的拮抗特性。结果显示,仅产朊假丝酵母菌和黑曲霉菌之间存在弱拮抗现象。在后续全组合液滴法检测中不仅观察到了以上拮抗现象,还检测到了枯草芽孢杆菌与产朊假丝酵母菌,以及绿色木霉菌与黑曲霉菌之间的拮抗现象。通过显微镜观察绿色木霉菌与黑曲霉菌之间的接触区域,进一步证实了拮抗现象的存在。在所用的6种微生物中,乳酸菌与其他受试菌无明显拮抗,能够与其他微生物进行复配。产朊假丝酵母菌与枯草芽孢杆菌和黑曲霉菌存在拮抗,因此,可与乳酸菌和绿色木霉菌进行组合发酵。同样,枯草芽孢杆菌和黑曲霉菌可单独与乳酸菌进行组合使用。综上表明,与传统的1/2组合菌饼法和牛津杯法相比,全组合液滴法具有操作简便、接触充分、不易污染和结果全面等优点。 展开更多
关键词 拮抗 全组合液滴法 秸秆发酵 微生物菌株
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