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毛囊来源的神经嵴干细胞修复大鼠坐骨神经缺损 被引量:1
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作者 张路 张洁元 +2 位作者 李兵仓 刘争 刘彬 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期605-614,共10页
毛囊来源的神经嵴干细胞(Epidermal Neural Crest Stem Cell,EPI-NCSC)由于取材方便,具有多种分化潜能,是一种具有良好应用前景的组织工程种子细胞。目前,在神经损伤修复领域中,EPI-NCSC主要被应用于脊髓损伤的修复。为了探讨EPI-NCSC... 毛囊来源的神经嵴干细胞(Epidermal Neural Crest Stem Cell,EPI-NCSC)由于取材方便,具有多种分化潜能,是一种具有良好应用前景的组织工程种子细胞。目前,在神经损伤修复领域中,EPI-NCSC主要被应用于脊髓损伤的修复。为了探讨EPI-NCSC对周围神经缺损的修复作用,对原代培养的GFP-SD大鼠来源的EPI-NCSC的体外性质进行了考察,并以其为种子细胞,将其等量与细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)混合后,预置入聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(Poly lactic acid co glycolic acid copolymer,PLGA)导管中,同时,以等量的达尔伯克(氏)改良伊格尔(氏)培养基(Dulbecco's Modified Eagle's medium,DMEM)代替EPI-NCSC作为对照,以用于修复大鼠坐骨神经10 mm距离的缺失。噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色分析结果显示,EPI-NCSC在PLGA膜上的初期粘附率为89.7%。在第1、3、5、7天细胞相对增殖率分别为89.3%、87.6%、85.6%和96.6%。细胞周期与DNA倍体分析表明,与PLGA共培养的EPI-NCSC与单独培养的EPI-NCSC相比较,二者的细胞周期变化趋势相同,增殖指数变化趋势也相同。在神经导管移植4周,术部实现了组织学水平的修复。大鼠手术一侧后肢感觉功能有所恢复,坐骨神经指数有所提高。研究结果表明,在PLGA导管中预置EPI-NCSC,有望实现较好的周围神经缺损的修复效果。 展开更多
关键词 表皮神经嵴干细胞 周围神经 细胞外基质(ECM) 聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA) 细胞周期
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表皮神经嵴干细胞移植对大鼠脊髓损伤后GDNF表达的影响及意义 被引量:2
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作者 刘争 张洁元 +4 位作者 段朝霞 陈慧俊 余华荣 张路 李兵仓 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期243-246,共4页
目的探讨表皮神经嵴干细胞(EPI-NCSC)移植对大鼠损伤脊髓修复过程中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响。方法分离培养绿色荧光蛋白转基因大鼠的EPI-NCSC,备移植用。取30只SD大鼠,暴露T,o脊髓并在NYU_Ⅱ撞击机下以10g... 目的探讨表皮神经嵴干细胞(EPI-NCSC)移植对大鼠损伤脊髓修复过程中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响。方法分离培养绿色荧光蛋白转基因大鼠的EPI-NCSC,备移植用。取30只SD大鼠,暴露T,o脊髓并在NYU_Ⅱ撞击机下以10g×25rnlTl的致伤力挫伤脊髓建立脊髓损伤模型,大鼠分为空白损伤组、DMEM对照组和实验组。脊髓损伤后1周,将EPI-NCSC悬液注射入大鼠损伤的脊髓处,DMEM对照组用单纯的DMEM/F12培养液代替,空白损伤组未处理。脊髓损伤后每周进行1次BBB评分以评估大鼠的运动功能,移植后6周取材,检测GDNFmRNA及GDNF蛋白的表达。结果实验组大鼠的BBB评分从移植后第2周开始就显著高于其他两组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。实验组损伤的脊髓组织处GDNFmRNA和蛋白的表达均明显高于其他两组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。而空白损伤组和DMEM对照组间BBB评分及GDNFmRNA和蛋白表达量均无明显差异(P〉0.05)。结论EPI-NCSC移植后,EPI-NCSC能促进大鼠脊髓组织GDNF的表达,从而有助于修复大鼠损伤的脊髓。 展开更多
关键词 大鼠 脊髓损伤 表皮神经嵴干细胞 细胞移植 胶质细胞源性神经营养因子
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周围神经组织液对大鼠EPI-NCSCs体外分化的影响
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作者 张路 张洁元 +2 位作者 刘彬 刘争 李兵仓 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期438-445,共8页
为了探讨周围神经组织环境因素对EPI-NCSCs(epidermal neural crest stem cells)分化的影响,该文用坐骨神经组织提取液为环境因素,对体外培养的EPI-NCSCs进行分化诱导。以正常培养的EPI-NCSCs为对照组,细胞培养液成分为:DMEM/F12、10%FB... 为了探讨周围神经组织环境因素对EPI-NCSCs(epidermal neural crest stem cells)分化的影响,该文用坐骨神经组织提取液为环境因素,对体外培养的EPI-NCSCs进行分化诱导。以正常培养的EPI-NCSCs为对照组,细胞培养液成分为:DMEM/F12、10%FBS、2%B27、20 ng/mL bFGF。在细胞培养液中添加1%周围神经组织液作为实验组。MTT结果显示,周围神经组织液对EPI-NCSCs的活性和增殖无影响;对照组和实验组EPI-NCSCs都呈多种形态。RT-PCR分析显示,在对照组和实验组中EPI-NCSCs均表达GFAP、S-100、β-III Tubulin(Tuj1),但在实验组中,这3种蛋白的表达量均高于对照组。免疫组化分析显示,在对照组中,EPI-NCSCs同时表现了雪旺细胞和早期神经元的鉴定特征;在实验组中,EPI-NCSCs没有神经元的鉴定特征,只表达雪旺氏细胞的鉴定特征。这表明,周围神经组织液可以诱导体外培养的EPI-NCSCs向雪旺氏细胞分化。 展开更多
关键词 表皮神经嵴干细胞 雪旺氏细胞 周围神经 分化 胶质纤维酸性蛋白
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