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以器官系统为中心的基础医学课程改革初探 被引量:33
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作者 朱慧芳 刘先俊 +1 位作者 张莹 卜友泉 《基础医学教育》 2013年第7期682-685,共4页
随着现代医学教育的发展,传统的"以学科为中心"的课程模式存在诸多弊端,而"以器官系统为中心"的课程模式受到诸多好评。重庆医科大学初步探索适应校情的基础医学课程教学体系改革,为全面开展以器官系统为中心的基... 随着现代医学教育的发展,传统的"以学科为中心"的课程模式存在诸多弊端,而"以器官系统为中心"的课程模式受到诸多好评。重庆医科大学初步探索适应校情的基础医学课程教学体系改革,为全面开展以器官系统为中心的基础医学课程模式,为培养具有创新精神和综合能力的实用型人才打下基础。 展开更多
关键词 教学改革 课程整合 器官系统
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MOOC背景下生物化学教学的对策与改革 被引量:12
2
作者 张春冬 张莹 +3 位作者 李轶 朱慧芳 雷云龙 卜友泉 《安徽农业科学》 CAS 2015年第14期380-381,383,共3页
将MOOC的教学理念引入生物化学教学中,与课堂教学相结合,对提升教师教学的质量和效率,调动学生的学习积极主动性,以及建立有效的学习效果评价体系等方面进行探讨及改革,以期适应电子信息化时代对提高人才培养质量的需求。
关键词 MOOC 生物化学 传统教学 教学改革
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高等医学院校生物学科主干课程整合与教学体系重构初探 被引量:11
3
作者 李轶 张莹 +5 位作者 刘先俊 陈俊霞 易发平 唐吟宇 朱慧芳 卜友泉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第4期542-546,587,共6页
课程整合及相应的教学体系重构是当前高等医学教育改革的核心与热点。医学教育中,生物学学科主干课程的整合很有必要,但目前尚无成熟的模式。作者尝试将《生物化学》、《分子生物学》、《细胞生物学》和《医学遗传学》四门生物学主干课... 课程整合及相应的教学体系重构是当前高等医学教育改革的核心与热点。医学教育中,生物学学科主干课程的整合很有必要,但目前尚无成熟的模式。作者尝试将《生物化学》、《分子生物学》、《细胞生物学》和《医学遗传学》四门生物学主干课程进行整合,对原有教学内容进行优化、精简和融合,形成了一门新的整合课程。在课程教学中,"以学生为中心",采用基于案例和问题的小组讨论式教学;采取形成性评价与总结性评价相结合的方法进行课程考核和成绩评定;跨科室组建教学团队,实行多学科联组教学。这些尝试为高等医学院校生物学相关课程的整合提供了有益的借鉴和经验。 展开更多
关键词 生物化学 分子生物学 细胞生物学 医学遗传学 整合课程
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人PRR11启动子的结构与功能初步分析 被引量:9
4
作者 艾青 卜友泉 +6 位作者 刘竹 兰欢 吉颖 杜刚 杨正梅 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期356-363,共8页
PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启... PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启动子进行了克隆鉴定和初步分析.首先,应用5'RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了PRR11基因的转录起始位点,发现了其具有多个转录起始位点.通过PCR定向克隆和DNA blunting技术,构建了6个相互重叠并覆盖PRR11基因转录起始位点附近约2.0 kb区域的PRR 11基因启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,PRR 11基因启动子主要定位于转录起始位点附近-563 bp~+341 bp的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,PRR 11基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒、CCAAT盒以及潜在的经典转录因子E2F1和MYB的结合位点,提示Sp1、NF-Y、E2F1和MYB等经典转录因子可能参与PRR 11基因的转录调控. 展开更多
关键词 PRR11(proline-rich PROTEIN 11) 启动子 转录调控 肿瘤相关基因
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CyclinE-CDK2分子活性调节机制 被引量:6
5
作者 陈济 宋方洲 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期220-222,230,共4页
Cyc linE-CDK2是细胞周期G1/S期的转折中的关键调控因子,其分子活性受各种细胞因子、磷酸化/去磷酸化修饰、泛素介导的蛋白降解途径及细胞周期依赖性蛋白激酶抑制物(cyc lin-dependent k inase in-h ib itor,CK Is)等多种方式构成的精... Cyc linE-CDK2是细胞周期G1/S期的转折中的关键调控因子,其分子活性受各种细胞因子、磷酸化/去磷酸化修饰、泛素介导的蛋白降解途径及细胞周期依赖性蛋白激酶抑制物(cyc lin-dependent k inase in-h ib itor,CK Is)等多种方式构成的精细调控网络调节。其活性失调将导致细胞增殖紊乱甚至肿瘤的发生。认识Cyc linE-CDK2分子活性调节机制有助于理解它在肿瘤形成中的作用。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白E 细胞周期蛋白依赖性激酶2 细胞周期依赖性蛋白激酶抑制物 分子活性 调节机制
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SCF在糖尿病胃轻瘫大鼠胃壁中表达的研究 被引量:8
6
作者 商文静 王继红 +1 位作者 陈辉 程大林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期824-826,891,共4页
目的:制备糖尿病胃轻瘫大鼠模型,通过检测其胃壁组织SCF的表达水平,探讨SCF与糖尿病胃轻瘫的关系。方法:用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)建立糖尿病胃轻瘫大鼠模型,应用RT-PCR和Wester blotting方法分别检测各实验组胃壁SCF基因(cDNA)... 目的:制备糖尿病胃轻瘫大鼠模型,通过检测其胃壁组织SCF的表达水平,探讨SCF与糖尿病胃轻瘫的关系。方法:用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)建立糖尿病胃轻瘫大鼠模型,应用RT-PCR和Wester blotting方法分别检测各实验组胃壁SCF基因(cDNA)及蛋白质的表达水平,分析SCF表达水平与糖尿病胃轻瘫的关系。结果:糖尿病胃轻瘫大鼠胃排空明显延迟;SCF基因和蛋白的表达水平明显降低;用西沙必利处理后表达升高,且与病情轻重有相关性。结论:SCF与糖尿病胃轻瘫发病有关,SCF在糖尿病胃轻瘫中的表达水平可以反映其病情发展过程。 展开更多
关键词 胃轻瘫 SCF CAJAL间质细胞
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血清蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立 被引量:8
7
作者 母昭德 彭咏波 +1 位作者 易发平 邱宗荫 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期821-823,840,共4页
目的:建立血清蛋白质组双向凝胶电泳(2-DE)技术。方法:对血清蛋白质2-DE的各种条件进行调整、优化。结果:建立了稳定的2-DE技术。结论:已建立的血清蛋白质2-DE技术,将为进一步开展疾病的血清蛋白质组学研究奠定基础。
关键词 血清蛋白质组学 蛋白质组 双向凝胶电泳
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树突状细胞疫苗的制备及其体外诱导细胞毒性T淋巴细胞对宫颈癌CaSki细胞的杀伤作用 被引量:8
8
作者 焦庆昉 易发平 +5 位作者 陈全 兰欢 艾青 符少月 俞垚 宋方洲 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期106-110,共5页
目的:制备树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗并观察其在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。方法:分离培养小鼠未成熟DCs,FCM检测小鼠未成熟DCs表面标志物CD40、CD86、主要组织... 目的:制备树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗并观察其在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。方法:分离培养小鼠未成熟DCs,FCM检测小鼠未成熟DCs表面标志物CD40、CD86、主要组织相容性复合体-Ⅱ(major histocompatibility complex-Ⅱ,MHC-Ⅱ)和CD11c;将已成功构建的携带人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16E6E7基因的重组腺病毒pAd-E6E7感染体外培养的小鼠未成熟DCs,提取CaSki细胞裂解物负载DCs,制备DC疫苗,激光共聚焦显微镜下观察pAd-E6E7感染的小鼠未成熟DCs绿色荧光蛋白表达,Western印迹法检测E6蛋白的表达;DCs疫苗诱导产生CTLs后与CaSki细胞共培养,CCK8(cell countingkit8)法检测其对CaSki细胞的杀伤效应。结果:成功分离培养了小鼠未成熟DCs,并制备获得了HPV16E6E7特异性DCs疫苗。DCs疫苗诱导产生的CTLs对CaSki细胞具有杀伤作用,pAd-E6E7感染组对CaSki的杀伤效应明显高于CaSki细胞裂解物负载组及未处理DCs组(P<0.05)。结论:以携带HPV16E6E7基因的重组腺病毒感染DCs制备基因修饰的DCs疫苗,具有诱导CTLs体外杀伤子宫颈癌CaSki细胞的作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 疫苗 合成 人乳头瘤病毒 T淋巴细胞 细胞毒性 树突状细胞 CASKI细胞
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人NFBD1启动子的鉴定与初步分析 被引量:9
9
作者 卜友泉 宋方洲 +1 位作者 易发平 马永平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期631-637,共7页
NFBD1,也称MDC1,是一个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为了进一步深入研究其转录调控机制,本研究克隆鉴定了NFBD1的启动子.首先应用5′RACE技术鉴定了NFBD1的转录起始位点,首次发现NFBD1至少存在3种丰度和转录起始位点不... NFBD1,也称MDC1,是一个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为了进一步深入研究其转录调控机制,本研究克隆鉴定了NFBD1的启动子.首先应用5′RACE技术鉴定了NFBD1的转录起始位点,首次发现NFBD1至少存在3种丰度和转录起始位点不同的转录变异体.然后,通过PCR定向克隆和酶切亚克隆策略,构建了覆盖NFBD1基因5′侧翼区起始密码子ATG上游5kb区域的一系列NFBD1启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,NFBD1启动子区域定位于主要转录起始位点区域附近1.5kb的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,NFBD1启动子缺乏TATA盒,但含有典型的CCAAT盒和GC盒以及其它潜在的转录因子结合位点,提示Sp1和NF-Y等转录因子可能参与NFBD1的转录调控. 展开更多
关键词 NFBDl RACE 启动子 转录调控
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生物化学实验教学改革的几点思考 被引量:10
10
作者 白永涛 刘革力 +2 位作者 左渝萍 王咏梅 申纯加 《山西医科大学学报(基础医学教育版)》 2006年第2期200-202,共3页
生物化学实验课是生化教学的重要组成部份,有其自身的发生、发展和教学规律。为了提高生化实验教学的效果。改革生物化学教学方式和内容,增设综合性、设计性、开放性实验,培养高素质的医学创新人才。
关键词 生物化学 实验教学 教学改革
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葡萄糖对人肝细胞血管生成素样蛋白3表达的影响 被引量:8
11
作者 李倩 王继红 +2 位作者 程梅 王欣 曾建涛 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第3期248-251,共4页
目的:观察高浓度葡萄糖对人肝细胞株(L02)及胰岛素抵抗细胞模型(IR-L02)的血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)表达的影响,探讨ANGPTL3与糖尿病(DM)并发高脂血症的关系,在细胞水平分析DM并发高脂血症的分子机制.方法:以L02为研究对象,并建立胰... 目的:观察高浓度葡萄糖对人肝细胞株(L02)及胰岛素抵抗细胞模型(IR-L02)的血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)表达的影响,探讨ANGPTL3与糖尿病(DM)并发高脂血症的关系,在细胞水平分析DM并发高脂血症的分子机制.方法:以L02为研究对象,并建立胰岛素抵抗模型(IR-L02).L02和IR-L02两组细胞分别在含5.6,7.0,11.1,28.0和33.0mmol/L葡萄糖的培养液中培养,5.6mmol/L组作为对照组.用RT-PCR方法检测ANGPTL3的mRNA表达量,并用WesternBlot方法检测ANGPTL3蛋白质表达水平,分析ANGPTL3与DM并发高脂血症的关系.结果:高浓度葡萄糖可促进L02和IR-L02两组细胞ANGPTL3的mRNA和蛋白质表达,并呈一定的量效关系,变化差异均有统计学意义(P<0.0001);IR-L02细胞对葡萄糖的刺激尤为敏感(P<0.0001).结论:高浓度葡萄糖可上调ANGPTL3的基因和蛋白质表达,其在DM并发高脂血症中可能起重要作用. 展开更多
关键词 血管生成素样蛋白3 糖尿病 高脂血症 葡萄糖 胰岛素抗药性
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抑制PRR11基因表达对H1299细胞周期的影响 被引量:7
12
作者 张春冬 王义涛 +5 位作者 张莹 李轶 朱慧芳 蔡伟 朱远远 卜友泉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1133-1140,共8页
Proline-rich protein 11(PRR11)是一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因。前期研究表明,PRR11敲减后导致肿瘤细胞周期S期阻滞。该研究利用流式细胞检测和免疫荧光方法在人肺癌细胞系H1299中分析siRNA介导的PRR11表达沉... Proline-rich protein 11(PRR11)是一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因。前期研究表明,PRR11敲减后导致肿瘤细胞周期S期阻滞。该研究利用流式细胞检测和免疫荧光方法在人肺癌细胞系H1299中分析siRNA介导的PRR11表达沉默对细胞周期产生的影响,通过添加dNTPs分析核糖核苷酸还原酶表达下降在PRR11敲降导致的S期阻滞中的作用。Brdu标记结果表明,PRR11敲减阻滞细胞周期在S期,并且核糖核苷酸还原酶表达下降导致细胞周期阻滞。使用分裂期标记蛋白pHH3分析结果表明,PRR11下调表达同时也导致细胞在G2期产生阻滞,从而抑制细胞进入有丝分裂。研究结果表明,在细胞周期过程中抑制PRR11的表达会阻滞DNA合成和有丝分裂进行,推测PRR11异常表达可能导致细胞周期紊乱,从而促进肿瘤的发生发展。 展开更多
关键词 肺癌 细胞周期 PRR11 脱氧核糖核苷酸
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应用SYBR实时荧光定量Real—TimePCR法检测人宫颈癌MCPH1 mRNA表达 被引量:7
13
作者 苟小燕 袁成福 +6 位作者 胡仁智 麦力 卜友泉 易发平 武向梅 刘革力 宋方洲 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期415-418,共4页
目的 应用SYBR实时荧光定量RT-PCR法检测MCPH1/BRIT1 mRNA的表达.方法 提取人宫颈癌总RNA,经逆转录PCR获得靶基因(MCPH1)及管家基因(GAPDH)的CDNA,采用SYBR Green 荧光实时定量法检测,以GAPDH基因作为内参,计算各组MCPH1 mRNA的相... 目的 应用SYBR实时荧光定量RT-PCR法检测MCPH1/BRIT1 mRNA的表达.方法 提取人宫颈癌总RNA,经逆转录PCR获得靶基因(MCPH1)及管家基因(GAPDH)的CDNA,采用SYBR Green 荧光实时定量法检测,以GAPDH基因作为内参,计算各组MCPH1 mRNA的相对表达量.结果 在31例宫颈癌标本中,MCPH1基因mRNA的表达,19例癌比正常低,1 例癌比正常高,其余标本无统计学意义;6例癌比癌旁低,1例癌比癌旁高,其余无统计学意义.结论 利用SYBR实时荧光定量RT-PCR检测出人宫颈癌中MCPH1基因mRNA的表达下调,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用及功能奠定了基础. 展开更多
关键词 MCPH1 Real—Time PCR 宫颈癌
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沉默Bmi-1表达可促进MCF-7乳腺癌细胞凋亡并抑制其侵袭 被引量:7
14
作者 邓小园 武向梅 +1 位作者 翁华莉 宋方洲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1036-1040,共5页
目的探讨B细胞特异的Moloney鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)基因沉默对细胞增殖与侵袭的影响及可能的分子机制。方法收集经病理确诊的乳腺癌及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检测Bmi-1的表达差异;采用LipofectamineRNAi MAX转染试剂将靶... 目的探讨B细胞特异的Moloney鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)基因沉默对细胞增殖与侵袭的影响及可能的分子机制。方法收集经病理确诊的乳腺癌及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检测Bmi-1的表达差异;采用LipofectamineRNAi MAX转染试剂将靶向Bmi-1基因的小干扰RNA(siRNA)转染MCF-7细胞,流式细胞术检测Bmi-1沉默后细胞周期和凋亡的改变,Western blot法检测凋亡相关基因P21、Bax、Bcl-2的表达变化。TranswellTM侵袭实验检测MCF-7细胞侵袭力变化,Western blot法检测上皮钙黏素(E-cadherin),神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达水平。结果乳腺癌组织Bmi-1 mRNA表达量高于癌旁组织,沉默Bmi-1基因可使MCF-7细胞周期阻滞于G1期,凋亡细胞增多;与空白对照组、阴性对照siRNA转染组相比,Bmi-1-siRNA组中P21与Bax的表达水平明显上调,Bcl-2明显下调。沉默Bmi-1基因表达可抑制MCF-7细胞的侵袭力,与对照组相比,下调Bmi-1可增强E-cadherin的表达,减少N-cadherin、vimentin的表达。结论下调Bmi-1的表达可引起MCF-7细胞G1期阻滞,促进细胞凋亡,与P21表达上调,Bax/Bcl-2比率升高有关;下调Bmi-1水平可抑制MCF-7细胞侵袭性,与抑制肿瘤细胞上皮间质转化有关。 展开更多
关键词 BMI-1 乳腺癌 细胞凋亡 细胞侵袭
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人FAM33A基因启动子的克隆与鉴定 被引量:6
15
作者 杜刚 卜友泉 +5 位作者 杨正梅 兰欢 崔涛 镇磊 刘革力 宋方洲 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期219-224,共6页
目的鉴定人FAM33A基因的启动子,为进一步研究其转录调控机制奠定基础。方法采用5’RACE技术(5’端cDNA快速扩增)鉴定FAM33A的转录起始位点。采用PCR定向克隆、酶切亚克隆等策略,构建FAM33A启动子荧光素酶报告基因。采用Lipofeetamin... 目的鉴定人FAM33A基因的启动子,为进一步研究其转录调控机制奠定基础。方法采用5’RACE技术(5’端cDNA快速扩增)鉴定FAM33A的转录起始位点。采用PCR定向克隆、酶切亚克隆等策略,构建FAM33A启动子荧光素酶报告基因。采用Lipofeetamine^TM2000转染H1299细胞,并通过Dual-Lu-ciferase@ Reporter Assay System进行荧光素酶报告基因活性检测。结果确定了FAM33A的转录起始位点,构建了覆盖FAM33A 5’端ATG附近约2kb区域的一系列FAM33A启动子荧光素酶报告基因。启动子活性分析表明,这些重组体均具有较高的启动子活性,同时含有典型的GC盒以及Sp1、E2F和GATA-1等潜在的转录因子结合位点。结论FAM33A启动子区域主要定位于转录起始位点附近约590bp的区域内。 展开更多
关键词 FAM33A基因 启动子 转录调控 细胞周期
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血小板衍生生长因子受体β与骨肉瘤的关系研究进展 被引量:7
16
作者 邢思宁 彭妍 +3 位作者 汪长东 易发平 刘革力 武向梅 《医学分子生物学杂志》 CAS 2018年第3期181-185,共5页
PDGFR是单链跨膜糖蛋白,属于Ⅲ型酪氨酸蛋白激酶家族,是信号转导途径中的重要成员。PDGFR可激活细胞内多种信号转导通路从而促进细胞的趋化、分裂与增殖,在机体生长发育、创伤修复等生理过程中发挥重要作用。PDGFRβ是PDGFR的重要亚... PDGFR是单链跨膜糖蛋白,属于Ⅲ型酪氨酸蛋白激酶家族,是信号转导途径中的重要成员。PDGFR可激活细胞内多种信号转导通路从而促进细胞的趋化、分裂与增殖,在机体生长发育、创伤修复等生理过程中发挥重要作用。PDGFRβ是PDGFR的重要亚型。近年研究发现。PDGFRβ与配体结合生成的PDGF/PDGFRD复合物与肿瘤的发生发展密切相关,其已成为多种肿瘤治疗的靶点。在骨肉瘤研究中也发现PDGFRβ在骨肉瘤标本中过表达,用激酶抑制剂作用于PDGFRβ后能降低骨肉瘤细胞的恶性行为。文章综述了PDGFRβ与骨肉瘤的研究现状。 展开更多
关键词 血小板衍生生长因子受体 肿瘤 骨肉瘤
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siRNA介导的NFBD1表达沉默对HeLa细胞增殖与凋亡的影响 被引量:7
17
作者 卜友泉 杨正梅 +3 位作者 兰欢 镇磊 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期943-949,共7页
NFBD1,也称MDC1,是1个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为探讨NFBD1在细胞增殖和凋亡中的作用及其作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值,本研究采用siRNA技术抑制NFBD1的表达,并观察了其对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和细胞凋... NFBD1,也称MDC1,是1个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为探讨NFBD1在细胞增殖和凋亡中的作用及其作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值,本研究采用siRNA技术抑制NFBD1的表达,并观察了其对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和细胞凋亡的影响.半定量RT-PCR和蛋白质印迹分析结果表明,筛选到的短链NFBD1 siRNA能有效抑制内源NFBD1的表达,抑制程度约100%.细胞生长曲线分析结果表明,siRNA介导的NFBD1表达沉默导致HeLa细胞生长增殖的显著抑制.FACS分析结果表明,NFBD1表达抑制导致sub-G1峰的出现,同时蛋白质印迹分析观察到了caspase 3和PARP(poly-ADP-ribose polymerase)的剪接激活,表明NFBD1表达抑制诱发了细胞凋亡.在该凋亡过程中,P53及其下游靶分子Bax和Puma的表达水平均没有发生明显变化,但Noxa的表达在mRNA和蛋白质水平上均显著上调,强烈提示该凋亡过程很可能是1个不依赖P53的凋亡途径,且Noxa的转录激活在该凋亡过程中可能起着重要作用.这些结果表明,NFBD1参与细胞生长增殖和凋亡的调节,是一个潜在的肿瘤治疗新靶点. 展开更多
关键词 NFBD1 SIRNA 细胞增殖 细胞凋亡
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诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究 被引量:5
18
作者 陈小菊 王嫣 +5 位作者 王兰 左国伟 寇小琴 谭启华 周兰 冯涛 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1185-1187,I0001,I0002,共5页
目的明确大鼠骨髓间充质干细胞(bone mensenchymal stem cells,BMSCs)在体外全骨髓培养条件下的生物学特性及其向成骨细胞分化的能力,探索更为简便有效的BMSCs体外培养方法。方法提取大鼠原代BMSCs,用αMEM完全培养基和成骨诱导条件培... 目的明确大鼠骨髓间充质干细胞(bone mensenchymal stem cells,BMSCs)在体外全骨髓培养条件下的生物学特性及其向成骨细胞分化的能力,探索更为简便有效的BMSCs体外培养方法。方法提取大鼠原代BMSCs,用αMEM完全培养基和成骨诱导条件培养基体外培养,倒置相差显微镜和HE染色观察细胞形态;台盼蓝活细胞计数绘制细胞生长曲线;ALP检测试剂盒检测ALP含量变化和von Kossa染色检测细胞矿化结节,以判断细胞是否向成骨细胞分化。结果全骨髓培养法在体外培养的大鼠原代BMSCs贴壁生长,呈梭形或多角形;使用Dex-SaMEM向成骨诱导后的BMSCs具有与成骨细胞在体外培养时相似的特征,倍增时间延长;合成ALP能力显著增强(P<0.05),von Kossa染色出现阳性的棕褐色或棕黑色团块的钙化结节。结论全骨髓培养法取材方便,经成骨诱导培养的BMSCs表现出成骨细胞的形态特征和生物学特性,该方法可作为骨组织工程种子细胞培养的常规方法。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨诱导 组织工程
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siRNA介导的PRR11表达抑制导致肺癌细胞系基因表达谱变化的分析 被引量:6
19
作者 龙银江 吉颖 +8 位作者 翁华莉 张春冬 谢濛宇 蔡伟 王义涛 朱远远 李轶 张莹 卜友泉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期196-202,共7页
Proline rich 11(PRR11)是本课题组鉴定的一个新的肿瘤相关基因。为研究PRR11介导肺癌发生发展相关的分子机制,本研究分析了PRR11表达被抑制后人肺癌细胞系H1299的全基因组基因表达谱的变化。首先,采用siRNA抑制H1299细胞中PRR11的表达... Proline rich 11(PRR11)是本课题组鉴定的一个新的肿瘤相关基因。为研究PRR11介导肺癌发生发展相关的分子机制,本研究分析了PRR11表达被抑制后人肺癌细胞系H1299的全基因组基因表达谱的变化。首先,采用siRNA抑制H1299细胞中PRR11的表达,提取总RNA,采用基因芯片分析全基因组基因表达谱的变化。然后,对呈现差异表达的基因进行GO和Pathway富集分析,并对部分重要的候选基因进行定量RT-PCR验证。基因芯片结果表明,采用siRNA有效抑制H1299细胞中PRR11表达后,共有550个基因的mRNA水平出现明显变化,其中139个基因表达上调,411个基因表达下调。生物信息学分析结果表明,上述差异表达的基因显著富集于细胞周期和MAPK通路。定量RT-PCR验证分析结果表明,PRR11表达抑制后确实可导致多个与细胞周期和肿瘤发生发展密切相关的基因(包括DHRS2、EPB41L3、CCNA1、MAP4K4、RRM1、NFIB)呈现显著的表达变化。这些结果提示,PRR11可能通过上述通路和/或基因的表达变化参与肺癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 PRR11 基因芯片 肺癌 差异表达基因
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BRIT1基因过表达对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响 被引量:6
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作者 胡仁智 宋方洲 +5 位作者 袁成福 苟小燕 卜友泉 易发平 刘革力 吉颖 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期429-432,共4页
目的探讨BRIT1基因过表达对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。方法真核表达质粒pcDNA3.1(-)/BRIT1经双酶切和测序鉴定后转染HeLa细胞,并设空载体转染组(阴性对照)和未处理组。转染后48 h,采用RT-PCR和Real timePCR法检测细胞中BRIT1基因mRN... 目的探讨BRIT1基因过表达对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。方法真核表达质粒pcDNA3.1(-)/BRIT1经双酶切和测序鉴定后转染HeLa细胞,并设空载体转染组(阴性对照)和未处理组。转染后48 h,采用RT-PCR和Real timePCR法检测细胞中BRIT1基因mRNA的转录和表达情况,Western blot检测细胞中BRIT1蛋白的表达水平,流式细胞术分析细胞的凋亡情况。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)/BRIT1经双酶切和测序证实构建正确;转染48 h后,可有效上调HeLa细胞中BRIT1基因mRNA和蛋白的表达,细胞凋亡率[(12.37±0.19)%]较阴性对照组[(1.81±0.22)%]和未处理组[(2.06±0.10)%]明显增加,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 BRIT1基因过表达能诱导人宫颈癌HeLa细胞体外凋亡,为进一步研究BRIT1基因在宫颈癌细胞凋亡中的作用及其机制奠定了基础。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 BRIT1基因 HELA细胞 细胞凋亡
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