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iTRAQ标记技术与差异蛋白质组学的生物标志物研究 被引量：26
1
作者 王林纤 戴勇 涂植光 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期135-140,共6页
结合多维液相色谱和串联质谱分析,iTRAQ技术已成为差异蛋白质组学定量研究的主要工具之一。而寻找和发现区别于正常生理状态下的疾病特异表达蛋白质,有利于阐明疾病的发病机理,对疾病的预防、诊断、预后和疗效监测具有重要作用,并有助... 结合多维液相色谱和串联质谱分析,iTRAQ技术已成为差异蛋白质组学定量研究的主要工具之一。而寻找和发现区别于正常生理状态下的疾病特异表达蛋白质,有利于阐明疾病的发病机理,对疾病的预防、诊断、预后和疗效监测具有重要作用,并有助于用作新靶点来开发临床治疗药物。本文重点就该技术在医学领域中进行差异蛋白质组分析并寻找标记蛋白质的研究进行综述。 展开更多
关键词 ITRAQ 差异蛋白质组分析 蛋白质标记
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血栓弹力图在重度血小板减少者中的应用 被引量：28
2
作者 左艳 娄世锋 +1 位作者 张颖 何於娟 《检验医学与临床》 CAS 2011年第16期1931-1932,1934,共3页
目的研究重度血小板减少患者血栓弹力图指标与出血的关系。方法根据临床诊断将108例血小板小于20×109/L的患者分为出血组和不出血组,并对他们的血小板计数及血栓弹力图检测结果差异进行统计学分析。结果重度血小板减少时,两组患者... 目的研究重度血小板减少患者血栓弹力图指标与出血的关系。方法根据临床诊断将108例血小板小于20×109/L的患者分为出血组和不出血组,并对他们的血小板计数及血栓弹力图检测结果差异进行统计学分析。结果重度血小板减少时,两组患者的性别、年龄、血小板减少类型、凝血象(凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间、凝血酶时间、纤维蛋白原)及血栓弹力图参数中的反应时间、凝固时间、血凝块聚合速度、凝血综合指数、LY30(反映纤溶活性)差异无统计学意义(P>0.05),但出血组的血小板及血栓弹力图参数中的血栓最大幅度(MA)值明显低于不出血组(P<0.01),采用Logistic回归以及ROC曲线分析得到出血=1.253-0.13血小板-0.042 MA,界值点取-1.478 5时,灵敏度、特异度分别为0.667、0.833,且大于该值的患者有93.3%的可能会出血。结论血栓弹力图指标中的MA值在预测重度血小板减少患者的出血倾向时有重要作用。 展开更多
关键词 血栓弹力图 血小板减少 出血
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骨形态发生蛋白9定向诱导多潜能干细胞成骨分化 被引量：27
3
作者 张燕 文巍 罗进勇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1291-1298,共8页
为确认和评价骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein9,BMP9)定向诱导多潜能干细胞成骨分化的能力,以鼠间充质干细胞C3H10、小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)和骨髓基质细胞(bone marrow stromalcell,BMSC)... 为确认和评价骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein9,BMP9)定向诱导多潜能干细胞成骨分化的能力,以鼠间充质干细胞C3H10、小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)和骨髓基质细胞(bone marrow stromalcell,BMSC)三种多潜能干细胞为目标细胞,用重组腺病毒的方法将BMP9导入细胞,通过荧光素酶报告基因实验、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)定量测定、钙盐沉积实验、realtime PCR、动物实验和组织化学染色等方法,观察BMP9对于多潜能干细胞成骨分化的定向诱导作用.结果提示,BMP9能诱导C3H10、MEFs和BMSC细胞ALP的表达,且具有剂量依赖性.BMP9在体外能够促进C3H10细胞和MEFs细胞的钙盐沉积.经BMP9刺激后,C3H10细胞成骨相关基因ALP、Runx2、骨桥素(osteopontin,OPN)和骨钙素(osteocalcin,OC)的mRNA水平均增加.荧光素酶报告基因实验证实,BMP9可以活化Smad和成骨关键基因Runx2.动物实验和组织化学染色检查显示,BMP9可以诱导C3H10细胞在裸鼠皮下异位成骨,因此,BMP9具有定向诱导多潜能干细胞成骨分化的能力. 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白9 多潜能干细胞 信号转导 分化 转化生长因子
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苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶表达的影响 被引量：23
4
作者 钟梁 刘北忠 +3 位作者 郝坡 刘畅 王东生 王春光 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1507-1510,共4页
目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的... 目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48、72、96 h后,经透射电镜和DNA Ladder实验了解到细胞凋亡的发生,PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT的mRNA表达水平。结果各种质量浓度的苦参碱作用A549细胞48 h后,均显著抑制细胞的增殖且呈浓度依赖性;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞不同时间后,经透射电镜形态学检测和DNA Ladder实验,均显示A549细胞发生了凋亡改变;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48 h后,端粒酶活性明显受抑,hTERT mRNA表达显著降低。结论苦参碱能抑制肺腺癌A549细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。 展开更多
关键词 苦参碱 肺腺癌A549细胞 细胞凋亡 人端粒酶逆转录酶(hTERT)
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IL-8通过上调Bcl-2的表达和下调caspase-3的表达抑制MCF-7乳腺癌细胞凋亡 被引量：24
5
作者 庞雪利 李矿发 +5 位作者 魏兰 黄云秀 苏敏 王林 曹红 陈婷梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期307-311,共5页
目的探讨白细胞介素8(IL-8)对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响及其机制。方法 Western blot法检测MCF-7细胞IL-8受体CXC趋化因子受体1(CXCR1)、CXCR2的表达;反转录PCR、Western blot法检测(0、20、40、80、160)ng/mL IL-8对MCF-7细胞Bcl-2、c... 目的探讨白细胞介素8(IL-8)对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响及其机制。方法 Western blot法检测MCF-7细胞IL-8受体CXC趋化因子受体1(CXCR1)、CXCR2的表达;反转录PCR、Western blot法检测(0、20、40、80、160)ng/mL IL-8对MCF-7细胞Bcl-2、caspase-3表达的影响;CCK-8法检测(0、40、80)ng/mL IL-8对MCF-7细胞增殖的影响;相差显微镜下观察80ng/mL IL-8处理MCF-7后细胞形态的变化;Western blot法检测80ng/mL IL-8联合信号通路抑制剂10μmol/L PD980590、10μmol/L LY294002或50μmol/L AG490[分别为丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)、磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)信号通路抑制剂],共同处理MCF-7细胞后,细胞内Bcl-2蛋白表达的变化;Western blot法检测(0、20、40、80、160)ng/mL IL-8对MCF-7细胞磷酸化p-AKT表达的影响;流式细胞术、反转录PCR以及Western blot法分别检测80ng/mL IL-8联合10μmol/L LY294002共同处理MCF-7细胞后,细胞凋亡以及细胞内Bcl-2、caspase-3表达的变化。结果 IL-8受体CXCR1、CXCR2在MCF-7细胞中均有表达;在IL-8的作用下,MCF-7细胞Bcl-2表达升高,caspase-3表达下降,抗凋亡能力明显增强;IL-8能显著上调MCF-7细胞中p-AKT的表达;PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002能显著抑制IL-8抗MCF-7细胞凋亡的作用,且减少Bcl-2并增加caspase-3的表达。结论 IL-8可显著抑制MCF-7细胞的凋亡,其机制可能与IL-8激活PI3K/AKT信号通路而上调Bcl-2、下调caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 IL-8 乳腺癌 MCF-7细胞 凋亡
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云芝黄芪有效组分对荷瘤小鼠免疫功能的影响 被引量：21
6
作者 李进 鲍依稀 +2 位作者 祝绚 刘靖 王宏萍 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期924-927,共4页
目的:应用云芝黄芪有效组分单方及复方治疗肿瘤小鼠,以此来验证云芝黄芪有效组分单方及复方抗肿瘤的免疫调节活性。方法:建立艾氏腹水癌(EAC)实体型荷瘤小鼠动物模型,随机分为6组,每组10只:生理盐水组(NS,0.1 mL.kg-1.d-1)、阿霉素单纯... 目的:应用云芝黄芪有效组分单方及复方治疗肿瘤小鼠,以此来验证云芝黄芪有效组分单方及复方抗肿瘤的免疫调节活性。方法:建立艾氏腹水癌(EAC)实体型荷瘤小鼠动物模型,随机分为6组,每组10只:生理盐水组(NS,0.1 mL.kg-1.d-1)、阿霉素单纯化疗组(AMD,4 mg.kg-1.d-1,0.2 mL,连续3 d)、云芝糖肽组(PSP,250 mg.kg-1.d-1,0.2 mL)、黄芪多糖组(APS,250 mg.kg-1.d-1,0.2 mL)、云芝黄芪复方组(PSP+APS,250 mg.kg-1.d-1,0.1 mL)和阿霉素云芝黄芪综合治疗组(AMD+PSP+APS,用量同上)。分别治疗30 d后采用免疫细胞化学法检测荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化情况,计算脏器指数、抑瘤率,并与对照组及化疗组进行比较。结果:云芝糖肽组和云芝黄芪复方组小鼠的CD3+,CD4+T细胞百分率以及CD4+/CD8+均显著高于对照组(P<0.05),CD8+T细胞的百分率较阿霉素化疗组显著降低(P<0.05);综合治疗组CD3+,CD4+T细胞百分率显著高于单纯化疗组(P<0.05);单纯化疗组小鼠胸腺指数较对照组明显降低(P<0.05),而综合治疗组的胸腺指数显著高于单纯化疗组(P<0.01);并且各给药组肿瘤质量均显著低于NS对照组(P<0.05)。结论:云芝糖肽、云芝黄芪复方对荷瘤小鼠及经化疗后的荷瘤小鼠均具有免疫增强作用。 展开更多
关键词 云芝糖肽 黄芪多糖 艾氏腹水癌 淋巴细胞亚群 抑瘤率 脏器指数
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人参皂苷Rh2抑制肝癌HepG2细胞迁移的实验研究 被引量：23
7
作者 冯子强 左国伟 +7 位作者 石庆强 赵绿翠 罗念 游智梅 夏菁 李丹阳 李静 陈地龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期61-65,共5页
目的：研究人参皂苷Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移的影响及其机制。方法：取对数生长期Hep G2细胞,Rh2（10~160μmol/L）诱导,同时设空白对照组,用CCK-8检测Rh2对细胞增殖影响;Transwell检测Rh2对细胞的迁移的影响;荧光素报告基因筛选可能的... 目的：研究人参皂苷Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移的影响及其机制。方法：取对数生长期Hep G2细胞,Rh2（10~160μmol/L）诱导,同时设空白对照组,用CCK-8检测Rh2对细胞增殖影响;Transwell检测Rh2对细胞的迁移的影响;荧光素报告基因筛选可能的信号通路;Western blot检测Hep G2细胞中P-ERK、ERK、P-P38、P-38、P-JUK、JUK、MMP3等蛋白的表达;定量PCR方法检测AP1、MMP3基因的表达;荧光显微镜分别观察AP1、MMP3蛋白在细胞内的表达及分布。结果：CCK-8检测结果显示Rh2对肝癌Hep G2细胞生长抑制呈剂量和时间依赖性;Transwell检测显示Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移有明显的抑制作用;荧光素报告基因筛选出AP1转录因子;Western blot检测结果显示P-ERK、MMP3蛋白表达水平呈下降趋势,PJUK、P-P38蛋白表达水平明显升高,ERK、JUK、P38蛋白则无明显变化;定量PCR方法结果显示：AP1、MMP3的基因表达下降。荧光结果显示：AP1、MMP3均分布在胞质内,随药物浓度的增加其荧光表达量减弱。结论：人参皂苷Rh2可通过激活MAPK通路来抑制肝癌Hep G2细胞的迁移。 展开更多
关键词 HEP G2细胞 Rh2 迁移 MAPK通路 AP1 MMP3
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原发性高血压基因机制研究进展 被引量：21
8
作者 唐敏 戴勇 涂植光 《国际检验医学杂志》 CAS 2006年第1期61-64,共4页
原发性高血压是遗传和环境因素相互作用所致的多基因遗传性疾病,对其基因机制的研究有助于对高血压的诊断、治疗和预防等。现就原发性高血压易感基因的研究方法(候选基因策略和全基因组扫描策略)以及部分候选基因的研究进展进行综述。
关键词 高血压 基因 肾素-血管紧张素系统 血管紧张素原 肽基二肽酶A
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双歧杆菌的免疫调节作用研究现状与展望 被引量：16
9
作者 穆小萍 张德纯 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期109-111,共3页
关键词 双歧杆菌 免疫调节
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川楝素通过线粒体途径诱导人肝癌细胞凋亡 被引量：19
10
作者 王鹏 王进 +7 位作者 姜慧 王虹 李忱炜 贺潇 崔瑾 董杰 刘小玲 何於娟 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期218-222,共5页
目的探讨川楝素对人肝癌细胞SMMC-7721(P53+)、Hep3B(P53-)凋亡及其对相关蛋白Bcl-2、Bax和Fas表达的影响。方法 MTT法检测川楝素(0.1～0.9μmol/L)对人肝癌细胞增殖的影响;倒置显微镜观察人肝癌细胞形态学改变;Annexin V法检测早期凋亡... 目的探讨川楝素对人肝癌细胞SMMC-7721(P53+)、Hep3B(P53-)凋亡及其对相关蛋白Bcl-2、Bax和Fas表达的影响。方法 MTT法检测川楝素(0.1～0.9μmol/L)对人肝癌细胞增殖的影响;倒置显微镜观察人肝癌细胞形态学改变;Annexin V法检测早期凋亡率;比色法检测Caspase-3、8、9相对活性改变;免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Fas的表达。结果川楝素显著抑制人肝癌细胞增殖,呈时间-剂量依赖性;形态学观察可见细胞数量减少,黏附力降低,皱缩变圆;0.5μmol/L川楝素作用SMMC-7721、Hep3B细胞72h的凋亡率分别为21.55%、18.35%,经Caspase抑制剂z-VAD-fmk处理后,细胞凋亡率降低;川楝素组SMMC-7721细胞Caspase-3、8、9活性均增高,Hep3B细胞Caspase-3、9活性增高,Caspase-8活性无明显变化;免疫细胞化学法显示,川楝素组SMMC-7721细胞Bcl-2表达减弱,Bax和Fas表达较CTX阳性对照组增强,Hep3B细胞Bcl-2表达减弱,Bax表达增强,Fas表达无明显变化。结论川楝素对P53+和P53-的人肝癌细胞均有抑制增殖、诱导凋亡的作用,涉及线粒体途径的参与,可能是一种通过非P53依赖途径发挥抗癌作用的天然药物。 展开更多
关键词 川楝素 凋亡 SMMC-7721 HEP3B P53
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主动外排机制在鲍曼不动杆菌耐药性中的作用 被引量：17
11
作者 陈敏 王跃 刘明方 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期150-153,共4页
目的探讨细菌主动外排机制在临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性中的作用。方法琼脂稀释法检测临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药性,测定经外排泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP)处理前后鲍曼不动杆菌对抗生素最小抑菌浓度(MIC)的变... 目的探讨细菌主动外排机制在临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性中的作用。方法琼脂稀释法检测临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药性,测定经外排泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP)处理前后鲍曼不动杆菌对抗生素最小抑菌浓度(MIC)的变化,以聚合酶链反应(PCR)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测多重耐药主动外排基因adeB及其表达水平。结果临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗生素耐药率高且具有多重耐药性,并存在药物的主动外排。所有临床分离的菌株均能检测到adeB基因,但多重耐药株表达水平明显高于敏感株(P<0.01)。结论临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性尤其是多重耐药性与外排泵介导的耐药机制密切相关。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 耐药性 主动外排 adeB基因
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云芝糖肽、丹参酮ⅡA对荷瘤小鼠的抗肿瘤及免疫调节作用 被引量：14
12
作者 祝绚 鲍依稀 +2 位作者 李进 刘靖 王宏萍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期526-529,共4页
目的:研究云芝、丹参有效组分单体以及复方对EAC荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫调节作用,为肿瘤的中药治疗新方剂的临床广泛应用提供一定的实验基础。方法:建立EAC实体型荷瘤小鼠动物模型,随机分为6组:生理盐水对照组(NS)、阿霉素治疗组(ADM)... 目的:研究云芝、丹参有效组分单体以及复方对EAC荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫调节作用,为肿瘤的中药治疗新方剂的临床广泛应用提供一定的实验基础。方法:建立EAC实体型荷瘤小鼠动物模型,随机分为6组:生理盐水对照组(NS)、阿霉素治疗组(ADM)、云芝糖肽组(PSP)、丹参酮Ⅱ组(TanⅡA)、复方组(PSP+TanⅡA)和综合治疗组(PSP+TanⅡA+ADM),并给予相应药物治疗,应用免疫组化法检测小鼠脾脏IL-2、IL-2R和肿瘤组织中周期蛋白CDK4以及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达,并计算抑瘤率、脏器指数,结果与对照组和化疗组进行比较。结果:云芝糖肽组小鼠脾脏IL-2、IL-2R水平高于NS组和化疗组(P<0.05),各药物治疗组肿瘤Bax均高于化疗组,CDK4均低于NS组(P<0.05),复方组Bax高于NS组(P<0.05),云芝组糖肽、丹参酮ⅡA组、综合治疗组CDK4低于化疗组(P<0.05),云芝糖肽组、复方组与综合治疗组肿瘤Bcl-2低于NS组(P<0.05),各药物治疗组对肿瘤有明显的抑制作用(P<0.05),复方组胸腺指数高于NS组,各药物治疗组胸腺指数均高于化疗组(P<0.05)。结论:云芝糖肽、丹参酮ⅡA对EAC荷瘤小鼠有明显的抗肿瘤和免疫调节作用,并能缓解化疗药物所引起的毒副作用,二者联用存在一定协同作用。 展开更多
关键词 云芝糖肽 丹参酮ⅡA 艾氏腹水癌 免疫调节 周期蛋白 凋亡相关蛋白
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双歧杆菌脂磷壁酸对凋亡抑制因子survivin表达及其调控基因的影响 被引量：15
13
作者 王跃 麦涛 +1 位作者 刘明方 陈淑惠 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期325-328,共4页
目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸（LTA）对结肠上皮细胞癌LoVo细胞内凋亡抑制因子survivin表达的影响及其调控机制。方法采用RT-PCR和Western blot方法分别检测经双歧杆菌LTA处理后LoVo细胞中survivin mRNA和survivin蛋白表达的变化;用Western... 目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸（LTA）对结肠上皮细胞癌LoVo细胞内凋亡抑制因子survivin表达的影响及其调控机制。方法采用RT-PCR和Western blot方法分别检测经双歧杆菌LTA处理后LoVo细胞中survivin mRNA和survivin蛋白表达的变化;用Western blot检测PI3K／AKT细胞信号通路中关键蛋白激酶AKT的磷酸化型pAKT（Thr308）以及p53和PFEN表达的变化。结果结肠癌LoVo细胞中存在survivin mRNA和蛋白的高表达,经LTA处理后其表达水平均明显下降（P〈0．01）;AKT蛋白激酶活性在LTA处理后也明显降低（P〈0．01）;而与下调survivin蛋白相关的p53和PTEN表达上升（P〈0．01）,且呈现一定的剂量依赖性。结论双歧杆菌LTA可以通过抑制PI3K／AKT细胞信号通路的活性,促进p53的表达,抑制凋亡抑制蛋白survivin的活性,导致caspases酶活性升高,诱导了LoVo细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 双歧杆菌 脂磷壁酸 结肠肿瘤 survivin AKT p53 PTEN
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人参多糖对K562细胞基因表达谱的影响 被引量：15
14
作者 李建平 何轩 +6 位作者 姜蓉 李静 左国伟 雷翠蓉 王亚平 王建伟 陈地龙 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期940-943,共4页
目的利用基因表达谱芯片研究人参多糖对体外培养的人红白血病K562细胞基因表达谱的影响。方法人参多糖处理K562细胞48 h后,分别提取给药组和对照组K562细胞总RNA,将两组RNA纯化为mRNA,逆转录成cDNA,用2种不同的荧光染料Cy3和Cy5进行线... 目的利用基因表达谱芯片研究人参多糖对体外培养的人红白血病K562细胞基因表达谱的影响。方法人参多糖处理K562细胞48 h后,分别提取给药组和对照组K562细胞总RNA,将两组RNA纯化为mRNA,逆转录成cDNA,用2种不同的荧光染料Cy3和Cy5进行线性扩增标记,与Illumina全基因组表达谱基因芯片杂交,采用生物信息学方法分析人参多糖处理后K562细胞基因表达谱的改变。结果共发现差异基因306个,其中上调基因220个,下调基因86个,并对其进行生物学功能分类。结论诱导肿瘤细胞分化是多基因作用的综合结果,筛选的基因对研究肿瘤发生、发展与逆转分化,以及寻找潜在的抗肿瘤药物作用靶点可能有意义。 展开更多
关键词 人参多糖 K562细胞 基因表达谱 基因芯片 抗肿瘤
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血乙醇浓度分析方法及其评价 被引量：14
15
作者 李琼 谢国明 +1 位作者 徐华建 阳强 《分析仪器》 CAS 2005年第3期57-59,共3页
介绍了目前常用的血乙醇浓度分析方法,包括顶空色谱法、分光光度法、散射能量衰减法、呼气法、酶电极法。对各种方法的基本原理作了简单介绍,对各自的特点作了评价。
关键词 浓度分析 评价 乙醇 顶空色谱法 分光光度法 散射能量 酶电极法 基本原理 衰减法
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川楝素对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用 被引量：14
16
作者 王进 王鹏 +8 位作者 王友良 姜慧 王虹 李忱炜 贺潇 崔瑾 董杰 刘小玲 何於娟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1009-1014,共6页
目的:建立荷瘤小鼠模型,探讨川楝素对肝癌的抑瘤作用及其机制。方法:建立H22肝癌移植瘤小鼠模型,随机分为0.9%氯化钠溶液对照组、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组(20mg/kg)、川楝素低剂量组(0.173mg/kg)和川楝素高剂量组(0.690mg/kg)... 目的:建立荷瘤小鼠模型,探讨川楝素对肝癌的抑瘤作用及其机制。方法:建立H22肝癌移植瘤小鼠模型,随机分为0.9%氯化钠溶液对照组、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组(20mg/kg)、川楝素低剂量组(0.173mg/kg)和川楝素高剂量组(0.690mg/kg)共4组。各组药物处理后,测量小鼠体内肿瘤大小,观察肿瘤的生长曲线;剥瘤后称重,计算小鼠的肿瘤抑制率;行肿瘤组织病理形态学及HE染色观察,透射电子显微镜观察其超微结构改变;同时,观察川楝素对荷瘤小鼠心、肝、脾、肾、胸腺及睾丸组织的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织内Bcl-2、Bax和Fas蛋白的表达。结果:川楝素可显著抑制小鼠体内肿瘤的生长,川楝素低剂量组(0.173mg/kg)和高剂量组(0.690mg/kg)的抑瘤率分别为66.23%和87.01%(P<0.05);透射电子显微镜观察可见肿瘤组织超微结构中出现凋亡小体;HE染色显示小鼠心、肝、脾、肾及睾丸脏器形态正常,而胸腺组织中可见胸腺小叶的数量及面积减少甚至消失;免疫组织化学检测证实,小鼠肿瘤组织内Bcl-2蛋白表达下调,Bax和Fas蛋白表达上调(P<0.05)。结论:川楝素能够明显抑制小鼠移植瘤的生长,此作用可能与抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 实验性 川楝素 抗肿瘤药 植物 肿瘤移植 凋亡调节蛋白质类 小鼠 近交BALB/c
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川楝素对K562细胞增殖和凋亡作用的影响 被引量：12
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作者 王进 刘小玲 +2 位作者 王鹏 蒋冬韵 何於娟 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第22期2528-2532,共5页
目的:探讨川楝素对人白血病K562细胞增殖和凋亡作用的影响.方法:MTT法检测川楝素对K562细胞和健康成人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的增殖抑制率.瑞氏染色观察川楝素对K562细胞、PBMC形态的影响.透射电镜... 目的:探讨川楝素对人白血病K562细胞增殖和凋亡作用的影响.方法:MTT法检测川楝素对K562细胞和健康成人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的增殖抑制率.瑞氏染色观察川楝素对K562细胞、PBMC形态的影响.透射电镜观察K562细胞超微结构改变.流式细胞术检测细胞凋亡率.琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞DNA片段化现象.比色法检测Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9活性变化.免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bcl-xl,Bax和Fas的表达.结果:川楝素对K562细胞有明显增殖抑制作用,呈时间和浓度依赖性(P<0.01),作用72h后IC50值为(52.13±0.82)nmol/L,而对PBMC几乎无影响.普通光镜下分别观察K562细胞和PBMC,K562细胞可见典型的凋亡形态学改变,PBMC形态无明显变化.超微结构显示K562细胞核染色质聚集,固缩,可见凋亡小体;以10,30,50nmol/L川楝素处理细胞72h后,K562细胞早期凋亡率分别为9.66%,26.06%,52.70%(P<0.01);琼脂糖凝胶电泳可见典型"梯状"条带;川楝素激活K562细胞Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9活性;凋亡相关蛋白Bcl-xl表达降低,Bax,Fas表达增强(P<0.05).结论:川楝素对K562细胞与PBMC之间具有选择抑制作用和诱导K562细胞凋亡的作用,可能通过线粒体途径和死亡受体途径双重机制介导. 展开更多
关键词 川楝素 K562细胞 增殖抑制 凋亡
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阿奇霉素联合亚胺培南对肺炎克雷伯菌生物膜的抑制作用 被引量：13
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作者 穆小萍 唐玲玲 +3 位作者 纪存委 黄艳芬 张德纯 黄瑞玉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期617-620,共4页
目的研究阿奇霉素(azithromycin,AZM)联合亚胺培南(imipenem,IPM)对肺炎克雷伯菌生物膜(biofi lm,BF)的抑制作用。方法采用改良平板法建立肺炎克雷伯菌BF模型,微量稀释法测定抗菌药物的最低抑菌浓度,银染法快速鉴定细菌BF,噻唑蓝(MTT)... 目的研究阿奇霉素(azithromycin,AZM)联合亚胺培南(imipenem,IPM)对肺炎克雷伯菌生物膜(biofi lm,BF)的抑制作用。方法采用改良平板法建立肺炎克雷伯菌BF模型,微量稀释法测定抗菌药物的最低抑菌浓度,银染法快速鉴定细菌BF,噻唑蓝(MTT)比色法测定BF中的活菌数,棋盘设计法测定阿奇霉素和亚胺培南对BF的协同抑制作用,用RT-PCR对联合用药前后luxS基因的表达进行相对定量分析,检测结果采用SPSS13.0软件进行统计处理。结果加入1/16、1/4MIC阿奇霉素可显著增加1/4、1/2及1MIC亚胺培南对肺炎克雷伯菌BF的抑菌活性;加入1/4、1/2及1MIC的亚胺培南也可显著增加1/16、1/4MIC阿奇霉素的抑菌活性;1MIC IPM与1/4、1/16MIC AZM联合应用;1/2MIC IPM与1/4MIC AZM联合应用可以下调lux S基因的表达。结论阿奇霉素与亚胺培南联合使用可下调肺炎克雷伯菌lux S基因的表达,从而增强其对BF的抑菌活性。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 生物膜 阿奇霉素 亚胺培南 LUXS基因 协同作用
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原代绒毛滋养层细胞的培养及转染研究 被引量：10
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作者 施琼 朱旦 +5 位作者 王箭 翁亚光 王应雄 蔡燕 蒋洪彦 徐远久 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1203-1206,共4页
目的探索绒毛组织滋养层细胞原代培养、纯化的有效方法及最佳转染方法。方法分离妊娠7周内的人工流产胚胎的绒毛组织进行滋养层细胞的培养和纯化。用细胞免疫化学方法对培养细胞进行鉴定;用MTT实验方法绘制滋养层细胞的生长曲线;用细胞... 目的探索绒毛组织滋养层细胞原代培养、纯化的有效方法及最佳转染方法。方法分离妊娠7周内的人工流产胚胎的绒毛组织进行滋养层细胞的培养和纯化。用细胞免疫化学方法对培养细胞进行鉴定;用MTT实验方法绘制滋养层细胞的生长曲线;用细胞贴壁率找到最适pH;用细胞存活分数评价转染的最佳脂质体用量。结果成功寻找到滋养层细胞原代培养和纯化的有效方法;细胞消化传代后的12～48h滋养层细胞处于对数生长期,pH6.8～7.0为培养液最适pH范围;并找到质粒转染滋养层细胞的最佳脂质体用量。结论成功培养和纯化滋养层细胞,并找到滋养层细胞的最佳转染方法。 展开更多
关键词 细胞培养 滋养层细胞 细胞转染
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高效液相色谱法同时测定胆汁中9种结合型胆汁酸 被引量：12
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作者 王文娟 邓文平 +2 位作者 王猛 陈耿 丁敏 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期59-62,共4页
目的：建立测定人胆汁中结合型胆汁酸的HPLC-紫外检测法。方法：胆汁样品经固相萃取，采用WatersNovaC18色谱柱，柱温为25℃，流动相为甲醇：磷酸盐缓冲液（60mmol／L，pH3．3）（66：34，v／v），流速0．8ml／min，检测波长197nm。结果... 目的：建立测定人胆汁中结合型胆汁酸的HPLC-紫外检测法。方法：胆汁样品经固相萃取，采用WatersNovaC18色谱柱，柱温为25℃，流动相为甲醇：磷酸盐缓冲液（60mmol／L，pH3．3）（66：34，v／v），流速0．8ml／min，检测波长197nm。结果：9种结合型胆汁酸在20min内分离完全，各胆汁酸在浓度为8-1000umol／L范围内线性良好，r为0．9991-0．9999；最低检测限为1．25-3．13umol／L；该方法日内变异在3．77％-8．20％之间，日间变异在6．73％～17．11％之间，各胆汁酸的回收率在88．23％．109．75％之间。结论：本方法准确、灵敏、快速，适用于胆汁中结合型胆汁酸水平的实验室研究和临床常规检测。 展开更多
关键词 胆汁 胆汁酸 色谱法
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