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趋化因子受体CX3CR1对人肝癌细胞7721和HepG2的作用及其机制的研究 被引量:1
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作者 范梦恬 陈思成 +4 位作者 郭杨柳 李亚 孙艳婷 李汪 施琼 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期22-30,共9页
目的:探究趋化因子受体CX3CR1(C-X3-C motif chemokine receptor 1,CX3CR1)对人肝癌细胞7721和Hep G2增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:采用Q-PCR和Western blot法分别检测人正常肝细胞LO2和两种肝癌细胞(7721和Hep G2)中CX3CR1的... 目的:探究趋化因子受体CX3CR1(C-X3-C motif chemokine receptor 1,CX3CR1)对人肝癌细胞7721和Hep G2增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:采用Q-PCR和Western blot法分别检测人正常肝细胞LO2和两种肝癌细胞(7721和Hep G2)中CX3CR1的基因表达情况(mRNA和蛋白质);以过表达CX3CR1的质粒转染7721细胞,用抑制CX3CR1的干扰RNA转染Hep G2细胞,通过Q-PCR和Western blot法检测CX3CR1的变化;应用MTT和流式细胞实验检测各组细胞的增殖能力;用集落形成实验检测各组细胞的自我更新和增殖能力;借助划痕愈合和Transwell检测各组细胞的迁移和侵袭能力;利用Western blot法检测PI3K/AKT、MAPK/ERK信号通路的激活情况。结果:CX3CR1在7721细胞中mRNA和蛋白质呈低表达趋势,而在Hep G2细胞中则呈高表达趋势;转染过表达CX3CR1质粒后7721细胞中CX3CR1的mRNA和蛋白水平有明显的升高,细胞的增殖、迁移、侵袭能力增强,p-AKT和p-ERK水平升高;转染干扰RNA后Hep G2细胞中的CX3CR1表达水平明显下降,增殖、迁移、侵袭能力减弱,p-AKT和p-ERK水平降低。结论:趋化因子受体CX3CR1可以促进人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,该作用可能与PI3K/AKT、MAPK/ERK信号通路激活有关。 展开更多
关键词 CX3CR1 肝癌 增殖 迁移 侵袭
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骨髓基质细胞介导的微环境对人肺腺癌A549细胞的作用 被引量:1
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作者 李汪 陈思成 +5 位作者 孙艳婷 李具琼 朱颖 张盟浩 陈彬 施琼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期599-604,共6页
目的:探讨肿瘤微环境中人骨髓基质细胞HS-5对人肺腺癌A549细胞的作用及机制。方法:采用HS-5细胞条件培养基(HS-5 cell-conditioned medium,HS-5-CM)处理A549细胞,分别通过MTT实验和划痕愈合实验观察A549细胞的活力和迁移能力,应用q PCR... 目的:探讨肿瘤微环境中人骨髓基质细胞HS-5对人肺腺癌A549细胞的作用及机制。方法:采用HS-5细胞条件培养基(HS-5 cell-conditioned medium,HS-5-CM)处理A549细胞,分别通过MTT实验和划痕愈合实验观察A549细胞的活力和迁移能力,应用q PCR检测CX3C趋化因子受体1(CX3C chemokine receptor 1,CX3CR1)的表达;加入丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinases,MAPK/ERK)通路抑制剂U0126后,应用Western blot法检测MAPK/ERK信号通路活化相关蛋白ERK及其磷酸化水平,划痕愈合实验检测抑制MAPK/ERK通路对HS-5-CM效果的影响,应用Western blot检测CX3CR1的表达情况。结果:HS-5-CM可以促进A549细胞的活力和迁移能力(P<0.01),同时A549细胞中CX3CR1的表达升高(P<0.05)。MAPK/ERK通路抑制剂U0126可以有效抑制HS-5-CM处理后MAPK/ERK通路的激活(P<0.01),抑制HS-5-CM促进A549细胞迁移的能力(P<0.01),同时下调CX3CR1的表达(P<0.05)。结论:HS-5细胞介导的微环境可以促进A549细胞的活力和迁移,其机制可能涉及MAPK/ERK信号通路的活化和CX3CR1的表达。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 肺癌 肿瘤微环境 MAPK/ERK信号通路
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趋化因子受体CX3CR1调控人主动脉瓣膜间质细胞成骨分化的作用研究 被引量:1
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作者 朱颖 范梦恬 +4 位作者 李具琼 陈彬 张盟浩 吴静红 施琼 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期7-16,共10页
目的:探究趋化因子受体CX3CR1调控人主动脉瓣膜间质细胞成骨分化的作用和机制,为钙化性主动脉瓣膜疾病的早期干预和治疗提供新思路。方法:取非钙化主动脉瓣(3例)和钙化主动脉瓣(5例),免疫组织化学染色检测成骨相关转录因子Runx2、骨桥蛋... 目的:探究趋化因子受体CX3CR1调控人主动脉瓣膜间质细胞成骨分化的作用和机制,为钙化性主动脉瓣膜疾病的早期干预和治疗提供新思路。方法:取非钙化主动脉瓣(3例)和钙化主动脉瓣(5例),免疫组织化学染色检测成骨相关转录因子Runx2、骨桥蛋白OPN和骨钙蛋白OCN的表达;取3例非钙化的主动脉瓣,采用胶原酶连续消化法分离人主动脉瓣膜间质细胞,观察细胞形态及生长状态,并采用细胞免疫荧光进行表型鉴定。对成骨诱导培养的人主动脉瓣膜间质细胞分别过表达和干扰趋化因子受体CX3CR1,平行设置CM组、OM组和negative control+OM组,采用qPCR和Western blot检测Runx2、OPN和OCN的表达,Western blot检测AKT和p-AKT的表达。茜素红S染色评价晚期钙结节形成情况。结果:临床标本显示钙化的主动脉瓣较非钙化的主动脉瓣高表达CX3CR1(P <0. 05);成功分离人主动脉瓣膜间质细胞,α-SMA和Vimentin阳性,vWF阴性。与CM、OM、negative control组比较,CX3CR1+OM组Runx2、OPN和p-AKT表达上调(P <0. 05),且茜素红S染色可见明显钙结节;与CM、OM、negative siRNA control+OM组比较,si CX3CR1+OM组Runx2、OPN和p-AKT表达下调(P <0. 05),且茜素红S染色可见钙结节减少。结论:趋化因子受体CX3CR1可能通过AKT信号通路促进人主动脉瓣膜间质细胞成骨分化。 展开更多
关键词 钙化性主动脉瓣膜疾病 人主动脉瓣膜间质细胞 趋化因子受体CX3CR1 成骨分化
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过表达SHOX2对BMP9诱导的小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2成骨分化的影响
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作者 张平 袁晓慧 +4 位作者 黄华坤 杨春梅 张露露 罗小辑 罗进勇 《基础医学与临床》 2021年第1期1-7,共7页
目的研究矮小身材同源框2(SHOX2)对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2成骨分化的影响。方法构建SHOX2重组腺病毒(Ad-SHOX2),实验分为对照(NC)组、Ad-SHOX2组、BMP9组和BMP9+Ad-SHOX2组。碱性磷酸酶(ALP)评估早期... 目的研究矮小身材同源框2(SHOX2)对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2成骨分化的影响。方法构建SHOX2重组腺病毒(Ad-SHOX2),实验分为对照(NC)组、Ad-SHOX2组、BMP9组和BMP9+Ad-SHOX2组。碱性磷酸酶(ALP)评估早期成骨;钙盐沉积检测晚期成骨;显微镜观察细胞增殖;Western blot检测成骨相关转录因子(RUNX2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、ERK1/2磷酸化及总蛋白表达。结果成功构建Ad-SHOX2。Ad-SHOX2组与BMP9组较NC组ALP活性、钙盐结节及RUNX2蛋白表达明显上升(P<0.05)。相较于以上两组,BMP9+Ad-SHOX2组ALP活性增高(P<0.05),低感染率BMP9+Ad-SHOX2组钙盐结节减少。高感染率组则较BMP9组钙盐沉积增多,与Ad-SHOX2组无明显差异。同时,BMP9+Ad-SHOX2组RUNX2蛋白表达高于BMP9组,低于Ad-SHOX2组(P<0.05)。显微镜观察Ad-SHOX2组与BMP9组细胞密度均高于NC组,PCNA蛋白表达上调(P<0.05)。且BMP9+Ad-SHOX2组PCNA蛋白表达高于BMP9组(P<0.05)。此外,Ad-SHOX2组及BMP9+Ad-SHOX2组较NC组T-ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达增高(P<0.05)。结论无外源性成骨刺激因子诱导条件下,SHOX2可能通过调控MAPK/ERK信号通路促进C3H10T1/2细胞增殖及成骨分化,但其与BMP9对成骨分化的调控作用是否可能互为拮抗,有待进一步研究。 展开更多
关键词 矮小身材同源框2(SHOX2) 骨形态发生蛋白9(BMP9) 成骨分化 C3H10T1/2细胞
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过表达Atg5通过上调细胞自噬水平抑制瓣膜间质细胞成骨样分化
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作者 陈彬 张盟浩 +4 位作者 范梦恬 吴静红 王玥 黄琴 施琼 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第3期400-408,共9页
该文的主要目的是探究过表达自噬相关蛋白Atg5对主动脉瓣膜间质细胞自噬水平以及成骨样分化能力的影响,为钙化性主动脉瓣膜疾病的研究提供新方法和新思路。从猪主动脉瓣上分离原代瓣膜间质细胞,细胞免疫荧光进行表型鉴定后,采用成骨培... 该文的主要目的是探究过表达自噬相关蛋白Atg5对主动脉瓣膜间质细胞自噬水平以及成骨样分化能力的影响,为钙化性主动脉瓣膜疾病的研究提供新方法和新思路。从猪主动脉瓣上分离原代瓣膜间质细胞,细胞免疫荧光进行表型鉴定后,采用成骨培养基诱导瓣膜间质细胞成骨分化,并用Western blot检测细胞成骨指标Runx2、OPN与自噬指标p62和LC3B-II/I的蛋白表达水平;构建重组质粒pAdTrack-ATG5并通过脂质体转染瓣膜间质细胞,采用Q-PCR、Western blot以及免疫荧光染色检测转染后细胞Atg5的表达水平和细胞自噬水平的变化情况;对成骨诱导培养的主动脉瓣膜间质细胞分别转染空载质粒和过表达Atg5质粒,利用Western blot检测72 h后瓣膜间质细胞早期成骨指标Runx2、OPN的表达,并用碱性磷酸酶染色和茜素红S染色方法检测瓣膜间质细胞晚期成骨样分化能力。结果显示,原代分离培养的瓣膜间质细胞的间质细胞标志物α-SMA和vimentin的染色结果呈阳性,内皮细胞标志物vWF的染色结果呈阴性;与对照组比较,用成骨培养基培养的瓣膜间质细胞Runx2、OPN和p62的蛋白表达水平显著上调,LC3B-II/I的比值显著下调;测序结果显示,过表达质粒pAdTrack-ATG5构建成功;在转染pAdTrack-ATG5后,细胞Atg5的基因表达水平和蛋白表达水平均显著上调,自噬指标p62蛋白表达水平显著下调,LC3B-II/I比值显著上调,免疫荧光染色显示,LC3B聚集增加;与转染空载质粒组相比,转染pAdTrack-ATG5组细胞在成骨培养基培养72 h后成骨指标Runx2、OPN的蛋白表达水平显著下降,转染pAdTrack-ATG5组碱性磷酸酶染色和茜素红S染色结果的阳性程度均弱于转染空载质粒组。综上所述,过表达Atg5能上调细胞自噬水平,并抑制瓣膜间质细胞成骨样分化。 展开更多
关键词 钙化性主动脉瓣膜病 瓣膜间质细胞 自噬 ATG5 重组质粒
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LPS通过上调BMP4促进猪主动脉瓣膜间质细胞成骨样分化
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作者 朱梦颖 施琼 +2 位作者 安利钦 刘艳 翁亚光 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第2期284-292,共9页
该文主要探究了LPS通过上调骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)促进猪主动脉瓣膜间质细胞(valve interstitial cells,VICs)成骨样分化的作用及机制,为钙化性主动脉瓣膜病(calcific aortic valve disease,CAVD)的干预... 该文主要探究了LPS通过上调骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)促进猪主动脉瓣膜间质细胞(valve interstitial cells,VICs)成骨样分化的作用及机制,为钙化性主动脉瓣膜病(calcific aortic valve disease,CAVD)的干预及治疗提供理论依据。采用免疫组化法检测非CAVD组和CAVD组瓣膜组织中Runx2和BMP4的表达,Western blot检测Runx2和BMP4的蛋白表达;采用胶原酶(I型)消化瓣膜后分离猪VICs,用免疫荧光染色进行表型鉴定;采用LPS和重组人BMP4腺病毒处理VICs;用ALP染色、茜素红S染色、qRT-PCR和Western blot法检测细胞的早期和晚期成骨能力、Smad1/5/8和ERK1/2的磷酸化水平。结果显示,BMP4和Runx2蛋白在CAVD组中的表达水平明显高于non-CAVD组。原代猪VICs分离成功,其中α-SMA和Vimentin呈阳性,CD31呈阴性。LPS可使VICs ALP活性增强、钙盐沉积增多、钙化指标上升和BMP4增加;BMP4可使VICs ALP活性增强、钙盐沉积增多、钙化指标上升,且使Smad1/5/8和EKR1/2的磷酸化水平升高。提示LPS可以上调BMP4的表达进而促进VICs的成骨样分化,Smad1/5/8与ERK1/2信号通路可能在该过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 钙化性主动脉瓣膜病 瓣膜间质细胞 LPS BMP4 成骨样分化
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NF-κB和PI3K-Akt通路调节肺炎链球菌HSP40诱导小鼠巨噬细胞免疫应答 被引量:25
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作者 吴盈盈 胥文春 +4 位作者 尹一兵 杨平 张刘丽 万红 张帮勤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期18-22,共5页
目的研究肺炎链球菌热休克蛋白40(heat shock protein 40,HSP40)诱导巨噬细胞免疫应答的机制。方法表达重组HSP40蛋白,并在体外诱导培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM);使用NF-κB、PI3K和JAK的抑制剂预处... 目的研究肺炎链球菌热休克蛋白40(heat shock protein 40,HSP40)诱导巨噬细胞免疫应答的机制。方法表达重组HSP40蛋白,并在体外诱导培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM);使用NF-κB、PI3K和JAK的抑制剂预处理BMDM后,ELISA检测其对HSP40诱导的TNF-α和IL-6表达的影响;HSP40刺激BMDM后,Western blot法检测NF-κBp65和Akt的磷酸化水平。结果 NF-κB和PI3K抑制剂可显著下调IL-6和TNF-α的表达,而JAK抑制剂无此效果。HSP40可增强NF-κBp65和Akt磷酸化水平。结论 NF-κB和PI3K-Akt通路参与调控肺炎链球菌HSP40诱导BMDM免疫应答的过程。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 热休克蛋白40 巨噬细胞 信号通路
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GP73、AFP-L3、GPC-3和DCP联合检测在低浓度AFP小肝癌诊断中的价值及验证 被引量:24
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作者 赵运胜 王春华 +3 位作者 高芹 廖飞 张丽娜 崔辰莹 《检验医学与临床》 CAS 2017年第1期19-23,共5页
目的考察血清高尔基体蛋白73(GP73)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)、磷脂酰基醇蛋白聚糖3(GPC-3)和异常凝血酶原(DCP)联合检测对低浓度甲胎蛋白(AFP)原发性小肝癌的诊断价值。方法收集低浓度AFP小肝癌患者50例,非肝癌的消化系统疾病患者60... 目的考察血清高尔基体蛋白73(GP73)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)、磷脂酰基醇蛋白聚糖3(GPC-3)和异常凝血酶原(DCP)联合检测对低浓度甲胎蛋白(AFP)原发性小肝癌的诊断价值。方法收集低浓度AFP小肝癌患者50例,非肝癌的消化系统疾病患者60例及健康对照者40例。用酶联免疫分析定量检测各组人群血清GP73、DCP和GPC-3水平,微量离心柱分离AFP-L3,罗氏电化学发光法测定总AFP和分离洗脱液中AFP-L3浓度,并计算AFP-L3占总AFP的比例。结果各组血清GP73、AFP-L3、GPC-3和DCP水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01),肝癌组4种标志物阳性检出率均明显高于其他各组(P<0.01)。单项检测中GP73诊断小肝癌的灵敏度、准确率和曲线下面积最高,分别为72.0%、86.7%和0.826;GPC-3特异性最高,为98.0%。4种标志物联合检测的灵敏度、特异性、准确率和曲线下面积分别为78.0%、94.0%、88.7%和0.867。结论单独检测GP73和AFP-L3对低浓度AFP小肝癌的诊断价值较高,多种标志物联合检测可提高诊断价值,用于低浓度AFP小肝癌的辅助诊断。 展开更多
关键词 原发性肝癌 高尔基体蛋白73 甲胎蛋白异质体3 磷脂酰基醇蛋白聚糖3 异常凝血酶原
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虚拟现实环境中视觉诱导晕动症的评估指标 被引量:13
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作者 易琳 贾瑞双 +1 位作者 刘然 陈婷梅 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期437-445,共9页
目的探讨虚拟现实环境中可用来评估视觉诱导晕动症(visually induced motion sickness,VIMS)的生理指标。方法采用基于虚拟现实的汽车驾驶模拟器诱发VIMS症状,并在实验过程中采集受试者的主观VIMS级别数据和客观数据;进而使用主观和客... 目的探讨虚拟现实环境中可用来评估视觉诱导晕动症(visually induced motion sickness,VIMS)的生理指标。方法采用基于虚拟现实的汽车驾驶模拟器诱发VIMS症状,并在实验过程中采集受试者的主观VIMS级别数据和客观数据;进而使用主观和客观相结合的方法对VIMS进行评估。结果以下生理指标非VIMS状态和VIMS状态存在显著性差异:(1)收缩压功率谱密度标准差(P=0.004);(2)脉搏率功率谱密度标准偏差(P=0.010);(3)收缩压与脉搏率最大互相关系数的均值(P=0.001);(4)舒张压与脉搏率最大互相关系数的均值(P=0.025);(5)收缩压与脉搏率相干系数的均值(P=0.001);(6)收缩压与脉搏率相干系数的标准偏差(P=0.004);(7)眨眼频率(BO-driving-AO组P=0.014;BC-AC组P=0.010)。结论在虚拟现实环境中,血压、脉搏率和眨眼频率与视觉诱导晕动症存在关系;本文所提出的指标可作为评估VIMS的生理指标。 展开更多
关键词 虚拟现实 视觉诱导晕动症 血压 脉搏率 眨眼频率
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血浆凝血与纤溶标志物对急性白血病合并DIC患者早期诊断及预后的评估价值 被引量:13
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作者 王猛 于丹军 +4 位作者 刘匀 张洪东 王建新 王春华 张晓清 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第8期938-942,共5页
目的:探讨血浆凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PIC)、血栓调节蛋白(TM)及组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t-PAIC)检测对急性白血病(AL)合并弥散性血管内凝血(DIC)的早期诊断及预后评估的价值... 目的:探讨血浆凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PIC)、血栓调节蛋白(TM)及组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t-PAIC)检测对急性白血病(AL)合并弥散性血管内凝血(DIC)的早期诊断及预后评估的价值。方法:62例AL合并DIC疑似患者,根据国际血栓与止血学会(ISTH)积分诊断标准,分为显性DIC组(n=20)、DIC前期组(n=11)及非显性DIC组(n=31),比较入院当日3组患者的血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、D二聚体(D-D)及TAT、PIC、TM、t-PAIC水平;按照患者28 d内生存情况再将患者分为生存组(n=47)与死亡组(n=15),比较入院当日2组患者的血浆TAT、PIC、TM及t-PAIC水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价TAT、PIC、TM及t-PAIC指标单独、或联合检测对AL合并DIC的诊断效能。结果:显性DIC组与DIC前期组患者入院当日血浆TAT、PIC、TM、t-PAIC水平高于非显性DIC组(P<0.05),显性DIC组患者血浆TAT、PIC、TM及tPAIC水平与DIC前期组比较,差异无统计学意义(P>0.05);死亡组患者血浆TAT、PIC、TM及t-PAIC水平高于生存组(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血浆TAT、TM、PIC及t-PAIC联合检测应用于AL合并DIC疑似患者,可获得更大的诊断效能(AUC=0.921)。结论:血浆TAT、PIC、TM及t-PAIC联合检测对AL合并DIC的早期诊断与预后评估具有较高的价值。 展开更多
关键词 血栓调节蛋白 急性白血病 弥散性血管内凝血 凝血酶-抗凝血酶复合物 纤溶酶-抗纤溶酶复合物 组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物
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血清胆汁酸代谢轮廓分析用于妊娠期肝内胆汁淤积症的早期诊断 被引量:10
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作者 何一帆 邵勇 +4 位作者 胥飚 邓丹 张晓清 陈霄 丁敏 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1458-1463,共6页
目的:探讨血清胆汁酸代谢轮廓分析在妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)的早期诊断中的应用价值。方法:应用超高效液相色谱-三重四级杆-飞行时间质谱法对50例健康孕妇、51例ICP孕妇、14例早期ICP孕妇和2... 目的:探讨血清胆汁酸代谢轮廓分析在妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)的早期诊断中的应用价值。方法:应用超高效液相色谱-三重四级杆-飞行时间质谱法对50例健康孕妇、51例ICP孕妇、14例早期ICP孕妇和21例妊娠肝功能紊乱孕妇血清中的27种已知胆汁酸和29种鉴定胆汁酸进行检测。采用偏最小二乘判别分析建立ICP的诊断模型,应用受试者工作特征曲线和Logistic回归筛选成分胆汁酸作为ICP早期诊断标志物。结果:与正常孕妇比,早期ICP孕妇的牛磺胆酸(taurocholic acid,TCA)、甘氨胆酸(glycolcholic acid,GCA)、甘氨结合型三羟基胆汁酸-3(Gtri-3)、甘氨结合型三羟基胆汁酸-5(Gtri-5)等多种血清成分胆汁酸明显升高(P<0.05),而妊娠肝功能紊乱孕妇未见明显改变(P> 0.05)。ICP诊断模型对早期ICP的预测灵敏度为85.7%,特异性为95.2%。鉴定的胆汁酸Gtri-3和牛磺结合型三羟基胆汁酸-2作为联合标志物,对ICP的早期诊断具有较高效能,灵敏度为92.9%,特异性为90.5%。结论:血清胆汁酸代谢轮廓分析是一种较特异、灵敏的ICP早期诊断方法。 展开更多
关键词 妊娠期肝内胆汁淤积症 胆汁酸 代谢轮廓分析 早期诊断
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整合素β2促进人乳腺癌细胞MCF-7的迁移,侵袭与粘附 被引量:11
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作者 刘梦瑶 苟理尧 +5 位作者 夏菁 姜亚运 万群 唐敏 孙恃雷 张彦 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期313-319,共7页
本研究主要目标为探讨整合素β2 (ITGB2)的高表达对人乳腺癌细胞MCF-7迁移,侵袭与粘附能力的影响。本研究首先构建了ITGB2过表达质粒,实验设阴性对照组(pcDNA-3.1+)与ITGB2基因过表达组(pcDNA-3.1+/ITGB2)。ITGB2过表达质粒转染MCF-7细... 本研究主要目标为探讨整合素β2 (ITGB2)的高表达对人乳腺癌细胞MCF-7迁移,侵袭与粘附能力的影响。本研究首先构建了ITGB2过表达质粒,实验设阴性对照组(pcDNA-3.1+)与ITGB2基因过表达组(pcDNA-3.1+/ITGB2)。ITGB2过表达质粒转染MCF-7细胞后,采用逆转录PCR与Western blotting方法分别检测ITGB2 mRNA转录水平与蛋白翻译水平;流式细胞术检测细胞周期的改变;划痕实验检测细胞横向迁移能力;Transwell小室实验检测细胞纵向迁移能力及侵袭能力;人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)粘附实验检测癌症细胞与血管内皮细胞之间的粘附能力,Western blotting实验检测侵袭相关指标MMP9,整合素经典通路中FAK蛋白磷酸化水平的改变。研究结果表明:转染ITGB2过表达质粒后,MCF-7细胞中ITGB2的m RNA水平(p<0.01)与蛋白水平(p<0.05)均显著增高;流式细胞术实验中,实验组S期的细胞所占比例与对照组无明显差异;划痕实验与Transwell小室实验中,实验组的迁移侵袭能力显著性增强;人脐静脉血管内皮细胞粘附实验中,实验组乳腺癌细胞与血管内皮细胞的粘附能力强于对照组(p<0.05);且Western blotting结果显示MMP9和p-FAK蛋白水平明显上升。由以上结果可得出结论,过表达ITGB2后会增强人乳腺癌细胞MCF-7的迁移、侵袭与粘附能力,而对其增殖能力无明显影响。 展开更多
关键词 整合素β2(ITGB2) 乳腺癌 迁移 侵袭 粘附
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S100A6通过PI3K/Akt信号通路促进人骨肉瘤细胞143B增殖和迁移 被引量:11
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作者 王海燕 邹正渝 +5 位作者 段亮 陈娴 李欢 袁世梅 何通川 周兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1928-1933,共6页
目的:研究PI3K/Akt信号通路在S100A6介导的人骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移中的作用.方法:首先制备重组的人S100A6蛋白(recombinant human S100A6,rhS100A6);rhS100A6与PI3K抑制剂(LY294002和wortmannin)单独或同时处理143B细胞,其... 目的:研究PI3K/Akt信号通路在S100A6介导的人骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移中的作用.方法:首先制备重组的人S100A6蛋白(recombinant human S100A6,rhS100A6);rhS100A6与PI3K抑制剂(LY294002和wortmannin)单独或同时处理143B细胞,其中rhS100A6的终浓度为30 mg/L,LY294002和wortmannin的终浓度分别为10 μmol/L和0.5 μmol/L;采用Western blotting分析143B细胞中PI3K/Akt信号通路相关分子总Akt(total Akt,t-Akt)及磷酸化Akt(phosphorylation of Akt,p-Akt)蛋白的表达变化,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移.结果:(1)成功制备rhS100A6蛋白,rhS100A6显著增强143B细胞的增殖和迁移能力(P〈0.05);(2)rhS100A6上调143B细胞中Akt的磷酸化;(3)与rhS100A6组相比,rhS100A6与LY294002或wortmannin联合处理组143B细胞的p-Akt减少(P〈0.05),细胞的增殖和迁移能力降低,在不同时点细胞的增殖率下降10.3%~69.7%,细胞迁移率下降37.9%~41.6%,差异均有统计学意义(P〈0.05).结论:S100A6促进人骨肉瘤细胞143B增殖和迁移的作用至少部分是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的. 展开更多
关键词 S100A6 骨肉瘤 P13K AKT信号通路
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S100A6促宫颈癌细胞增殖、迁移及其可能机制研究 被引量:11
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作者 李爱芳 谷月 +5 位作者 李雪茹 孙晖 查何 谢佳卿 赵佳丽 周兰 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期8-14,共7页
目的:探讨S100A6对人宫颈癌细胞系HeLa和SiHa增殖、迁移的影响及其机制。方法:首先采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测宫颈癌细胞HeLa、SiHa和CaSki中S100A6 mRNA的基础表达,再分别采用重组腺病毒A... 目的:探讨S100A6对人宫颈癌细胞系HeLa和SiHa增殖、迁移的影响及其机制。方法:首先采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测宫颈癌细胞HeLa、SiHa和CaSki中S100A6 mRNA的基础表达,再分别采用重组腺病毒AdS100A6和AdsiS100A6干预HeLa和SiHa细胞,Western blot验证腺病毒感染是否成功;MTT法检测细胞增殖能力,划痕愈合试验检测细胞迁移能力,Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)指标E钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad)、N钙粘蛋白(N-cadherin,N-cad)及p-Akt的蛋白水平,半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription and polymerase chain reaction,RT-PCR)检测PI3K-Akt信号通路下游靶基因Snail、Twist的表达。结果:与对照组相比,AdS100A6组的HeLa细胞3天时的OD_(492)值和划痕愈合率均明显升高,并伴随E-cadherin降低和N-cadherin升高;而AdsiS100A6组的SiHa细胞5天时的OD_(492)值和3天时的划痕愈合率明显降低,并伴随E-cadherin升高和N-cadherin降低;同时,在HeLa细胞中上调S100A6后p-Akt蛋白水平增加,该通路的下游靶基因Snail和Twist表达也明显上调。结论:S100A6可以增强宫颈癌细胞的增殖和迁移能力,其机制可能涉及EMT和PI3K-Akt信号通路的激活。 展开更多
关键词 宫颈癌 S100A6 上皮间质转化 PI3K-AKT信号通路
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以PBL为引导的CBL教学法在口腔解剖生理学教学中的应用研究 被引量:10
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作者 宋锦璘 胡小蕾 +4 位作者 邓锋 张翼 张红梅 黄倩倩 吴晓绵 《现代医药卫生》 2016年第6期931-933,共3页
目的研究以"以问题为基础的学习(PBL)"为引导的"以案例为基础的学习(CBL)"教学法用于口腔解剖生理学教学对学生的学习体验和学习效率的影响。方法于2015年10月20日选取重庆医科大学口腔医学院2014级口腔医学技术专业同一班级学... 目的研究以"以问题为基础的学习(PBL)"为引导的"以案例为基础的学习(CBL)"教学法用于口腔解剖生理学教学对学生的学习体验和学习效率的影响。方法于2015年10月20日选取重庆医科大学口腔医学院2014级口腔医学技术专业同一班级学生37名,将讲授的10个牙位的乳牙,即10个不同内容随机分为研究组(上Ⅱ~Ⅴ、下Ⅴ)和对照组(上、下Ⅰ,下Ⅱ~Ⅳ)。对照组采用传统教学法,研究组采用以PBL为引导的CBL教学法。并分析学生在课堂学习中的表现及在课堂学习中的体验,同时分析课堂学习效率。结果以PBL为引导的CBL教学法不仅提高了学生课堂的学习体验、学习兴趣、分析能力,同时帮助学生集中注意力,明显提高了学生的课堂学习效率。结论以PBL为引导的CBL教学法是口腔解剖生理学,特别是牙体解剖学一种高效率的教学方法。 展开更多
关键词 教学方法 口腔医学/教育 解剖学/教育 生理学/教育 以问题为基础的学习 以案例为基础的学习
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凝血与纤溶标志物联合检测对早期诊断重症感染引发弥散性血管内凝血的价值 被引量:10
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作者 王猛 于丹军 +4 位作者 刘匀 张洪东 王建新 王春华 张晓清 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第7期822-826,853,共6页
目的:探讨凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PIC)、血栓调节蛋白(TM)、组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t-PAIC)4项凝血与纤溶标志物对重症感染引发弥散性血管内凝血(DIC)的早期诊断价值。方法... 目的:探讨凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PIC)、血栓调节蛋白(TM)、组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t-PAIC)4项凝血与纤溶标志物对重症感染引发弥散性血管内凝血(DIC)的早期诊断价值。方法:选取重症感染引发的DIC疑似患者86例,根据国际血栓与止血学会(ISTH)积分诊断标准,将患者分成显性DIC组(n=29)、DIC前期组(n=15)、非显性DIC组(n=42),比较3组患者入住ICU当日的血浆TAT、PIC、TM、t-PAIC水平及常规凝血指标[血小板(PLT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fib)、D二聚体(D-dimer,D-D)、纤维蛋白原降解产物(FDP)],采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价TAT、PIC、TM、t-PAIC单项或联合检测对重症感染引发DIC的早期诊断价值。结果:显性DIC组、DIC前期组患者的血浆TAT、TM、t-PAIC的水平高于非显性DIC组、差异有统计学意义(P<0.05),显性DIC组与DIC前期组比较、差异无统计学意义(P>0.05);3组患者血浆PIC水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);ROC分析结果显示,TAT、TM、t-PAIC联合检测早期诊断重症感染引发DIC的价值也比单项检测高。结论:TAT、TM及t-PAIC联合检测对早期诊断重症感染引发DIC的具有较高的价值。 展开更多
关键词 弥散性血管内凝血 血栓调节蛋白 重症感染 凝血酶-抗凝血酶复合物 纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物 组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物
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吲哚美辛对K562细胞株BCR/ABL-Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量:9
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作者 刘张玲 胡晶 +3 位作者 黄峥兰 李会 刘鑫 冯文莉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期998-1002,共5页
目的探讨吲哚美辛对K562细胞增殖的影响及其分子机制。方法采用不同浓度的吲哚美辛作用于K562细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响,克隆形成实验检测吲哚美辛对K562细胞克隆形成能力的影响。RT-PCR分别检测bcr-abl、β-catenin的mRNA表达... 目的探讨吲哚美辛对K562细胞增殖的影响及其分子机制。方法采用不同浓度的吲哚美辛作用于K562细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响,克隆形成实验检测吲哚美辛对K562细胞克隆形成能力的影响。RT-PCR分别检测bcr-abl、β-catenin的mRNA表达变化,Western blot分别检测p BCR/ABL、总BCR/ABL、β-catenin、p GSK-3β、c-myc的蛋白表达变化。结果 100、200、400μmol/L吲哚美辛作用细胞48 h后,以浓度依赖性方式抑制K562细胞的增殖和克隆形成能力。3种浓度的吲哚美辛处理K562细胞后,p BCR/ABL、总BCR/ABL的蛋白表达依次减少,而bcr-abl mRNA水平没有明显变化。β-catenin mRNA和蛋白水平依次减少;p GSK-3β、c-myc的蛋白水平均明显降低。结论吲哚美辛可通过抑制BCR/ABL-Wnt/β-catenin信号通路的活性,从而抑制白血病K562细胞的增殖和克隆形成能力。 展开更多
关键词 吲哚美辛 慢性粒细胞白血病 K562细胞 信号通路
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2型糖尿病患者血清锌α2糖蛋白与血脂的相关性 被引量:8
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作者 王成潘 黄丹 +5 位作者 魏晓 陈燕梅 蒋先淑 程昌琴 李伶 李志勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期783-787,共5页
目的:探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清锌α2糖蛋白(Zinc-α2-glycoproteins,ZAG)与血脂的相关性。方法:选取新诊断T2DM患者90例与正常健康者87例,记录一般临床指标;收集所有受试者的空腹血清标本,酶法测定血脂水... 目的:探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清锌α2糖蛋白(Zinc-α2-glycoproteins,ZAG)与血脂的相关性。方法:选取新诊断T2DM患者90例与正常健康者87例,记录一般临床指标;收集所有受试者的空腹血清标本,酶法测定血脂水平,ELISA法检测血清ZAG水平,Pearson相关和多元逐步回归分析ZAG与血脂的相关性。结果:与对照组相比,T2DM组血清ZAG水平降低[(59.69±12.97)vs.(36.07±12.15)mg/L,P=0.000],非超重T2DM组和超重T2DM组血清ZAG水平均降低[(60.95±13.05)vs.(38.93±10.59)mg/L,P=0.000;(56.36±12.42)vs.(33.78±12.92)mg/L,P=0.000]。相关性分析和多元逐步回归分析显示T2DM组空腹血清ZAG与HDL-C(r=0.345,P=0.001)、BMI(r=-0.330,P=0.002)、HOMA-IR(r=-0.290,P=0.006)相关。以HDL-C=1.04 mmol/L分层分析显示T2DM患者HDL-C≥1.04组较HDL-C<1.04组的血清ZAG水平升高[(38.01±12.62)vs.(30.75±9.00)mg/L,P=0.011];对照组空腹血清ZAG水平与TC呈正相关(r=0.292,P=0.006),以TC=5.18 mmol/L为切点进行分层分析发现对照组中TC≥5.18组较TC<5.18组的血清ZAG水平升高[(63.36±12.03)vs.(56.97±13.09)mg/L,P=0.022]。结论:脂肪细胞因子ZAG可能与T2DM脂代谢紊乱过程有关,并且ZAG对促进脂代谢稳态可能具有有利作用。 展开更多
关键词 2型糖尿病 锌α2糖蛋白 血脂
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石蒜碱通过调控MAPK/ERK信号通路抑制人结肠腺癌LoVo细胞生长 被引量:7
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作者 张平 袁晓慧 +5 位作者 喻婷婷 黄华坤 杨春梅 张露露 罗小辑 罗进勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期479-486,共8页
目的:探讨石蒜碱(lycorine)对人结肠腺癌LoVo细胞活力、凋亡和迁移侵袭能力的影响及其作用机制。方法:不同浓度(1~8μmol/L) lycorine处理LoVo细胞,CCK-8法检测细胞活力;划痕愈合和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;Hoechst染色及... 目的:探讨石蒜碱(lycorine)对人结肠腺癌LoVo细胞活力、凋亡和迁移侵袭能力的影响及其作用机制。方法:不同浓度(1~8μmol/L) lycorine处理LoVo细胞,CCK-8法检测细胞活力;划痕愈合和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;Hoechst染色及流式细胞术实验检测凋亡改变;萤光素酶报告基因系统检测MAPK/ERK信号通路活化情况;同时采用Western blot法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关标志物、凋亡相关蛋白及磷酸化ERK1/2蛋白水平的变化。结果:与空白对照组相比,lycorine处理组LoVo细胞的活力和迁移侵袭能力受到显著抑制(P<0.05),同时EMT相关标志物基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7, MMP-7)和N-cadherin表达下调,E-cadherin表达上调(P<0.05),而凋亡细胞数及cleaved caspase-3无显著差异(P>0.05)。此外,lycorine处理组Elk1/SRF转录活性降低,ERK1/2磷酸化水平降低(P<0.05)。结论:石蒜碱可通过调控MAPK/ERK信号通路及抑制EMT过程LoVo细胞的活力及迁移侵袭能力,从而在体外主要发挥生长抑制的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 石蒜碱 LOVO细胞 上皮-间充质转化 MAPK/ERK信号通路 细胞活力
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肺炎链球菌热休克蛋白40通过p38MAPK和JNK通路诱导小鼠巨噬细胞免疫应答 被引量:8
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作者 吴盈盈 高松 +5 位作者 马峰 崔晶晶 姚华 孙潇雨 王继超 胥文春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期730-735,共6页
目的探讨肺炎链球菌热休克蛋白40(HSP40)引起小鼠巨噬细胞免疫应答的机制。方法表达、纯化重组HSP40蛋白(r HSP40),去除其中的脂多糖(LPS)。r HSP40处理C57BL/6野生小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)后,反转录PCR检测BMDM中肿瘤坏死因子α(TNF... 目的探讨肺炎链球菌热休克蛋白40(HSP40)引起小鼠巨噬细胞免疫应答的机制。方法表达、纯化重组HSP40蛋白(r HSP40),去除其中的脂多糖(LPS)。r HSP40处理C57BL/6野生小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)后,反转录PCR检测BMDM中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、IL-23p19、IL-12p40、IL-12p35、IL-10的mRNA水平,ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-12p40水平;r HSP40刺激后,ELISA检测野生型、Toll样受体2(TLR2)和TLR4缺陷的BMDM中TNF-α和IL-6的表达水平;丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂预处理BMDM后,ELISA检测其对r HSP40诱导TNF-α和IL-6水平的影响;Western blot法检测p38MAPK和c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平。结果获得纯度90%以上的r HSP40;r HSP40可显著增强p38MAPK、JNK的磷酸化水平和TNF-α、IL-6的表达;p38MAPK和JNK抑制剂可显著抑制TNF-α和IL-6的表达;与野生BMDM相比较,TLR4缺陷的BMDM表达TNF-α和IL-6显著降低。结论 HSP40诱导小鼠巨噬细胞产生免疫应答受JNK及p38MAPK信号通路调控,并且此过程依赖TLR4。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 巨噬细胞 热休克蛋白40 p38分裂原活化蛋白激酶 C-JUN氨基末端激酶
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