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题名HpaA IgY抑制小鼠胃内幽门螺杆菌的定植
被引量：9
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作者
黄进
秦思栋
杨致邦
黄伟
邓颖
叶翠莲
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机构
重庆医科大学基础医学院病原生物学教研究室
西南大学荣昌校区动物医学系
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出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期522-526,共5页
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基金
重庆市教委渝教科(2003-7-3)
重庆市科委(CSTC
2005EA5020)基金资助
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文摘
目的在构建基因工程菌pQE30-HpaA-DH5α的基础上,制备HpaA重组蛋白,以此为抗原,制备抗HpaA的蛋黄抗体(HpaA IgY)。通过小鼠口服试验,验证HpaA IgY阻止H.pylori在胃内定植的作用,为研制预防H.pylori感染的制剂奠定基础。方法大量诱导工程菌pQE30-HpaA-DH5α,获得重组蛋白HpaA,免疫产蛋立克体鸡,以水稀释法联合硫酸铵沉淀法提纯IgY,SDS-PAGE分析纯度,Bradford法测定浓度,Western blot鉴定对相应抗原的特异性,ELISA法检测效价。建立H.pylori感染Balb/c小鼠的动物模型,预防组在小鼠灌喂H.pylori菌液前灌喂不同剂量的HpaA IgY。组织学检查和细菌培养观察H.pylori定植。结果提纯后的HpaAIgY纯度为90%,浓度为24.6mg/mL,Western blotting证实有良好抗原结合特异性,ELISA效价为1∶12800。阳性对照组H.pylori的感染率为70.4%,12周后的感染率为88.9%。预防组的感染率明显低于阳性对照组,随IgY剂量的增加,感染率降低。IgY的剂量为6mg/mL时,能达到预防效果。结论成功制备出高纯度、高浓度、高效价的特异性HpaA IgY,在小鼠体内能阻止H.pylori的定植,有望进一步开发成为预防H.pylori感染的制剂。
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关键词
幽门螺杆菌
黏附素
蛋黄抗体
体内试验
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Keywords
Helicobacter priori, HapA, IgY, In vivo experiment
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分类号
R392.12
[医药卫生—免疫学]
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