燃煤型氟中毒患者血化学元素含量的变化 被引量：6

1

作者 闫菊 钟朝晖 +3 位作者 王应雄 雍开文 张茂忠 晏维 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1214-1218,共5页

目的:探讨血锌(Zinc,Zn)、钙(Calcium,Ca)、铜(Copper,Cu)、镁(Magnesium,Mg)、铁(Ferrum,Fe)含量与燃煤污染型地方性氟中毒(燃煤型氟中毒)发病的关联,寻找行之有效的抗氟元素。方法:采取分层整群随机抽样方法,在病区和非病区共选取250... 目的:探讨血锌(Zinc,Zn)、钙(Calcium,Ca)、铜(Copper,Cu)、镁(Magnesium,Mg)、铁(Ferrum,Fe)含量与燃煤污染型地方性氟中毒(燃煤型氟中毒)发病的关联,寻找行之有效的抗氟元素。方法:采取分层整群随机抽样方法,在病区和非病区共选取250例儿童及90例成人进行1∶2配对病例-对照研究,对研究对象进行空腹静脉抽血及收集即时尿液,原子吸收光谱仪测研究对象血Zn、Ca、Cu、Mg、Fe含量及氟离子选择电极法测尿氟含量。结果:巫山儿童血Zn含量为外对照组(78.82±11.40)μmol/L>内对照组(73.39±8.99)μmol/L>病例组(69.01±6.98)μmol/L;奉节儿童血Zn含量也为外对照组(78.82±11.40)μmol/L>内对照组(77.66±12.03)μmol/L>病例组(72.76±10.87)μmol/L;巫山成人血Zn含量也为外对照组(101.21±11.91)μmol/L>内对照组(97.92±11.51)μmol/L>病例组(91.13±10.29)μmol/L(P均小于0.05)。巫山、奉节儿童血Cu、Fe含量均为外对照组大于病例组及内对照组(P均小于0.01)。巫山、奉节儿童及巫山成人尿氟含量为病例组大于内、外对照组(P均小于0.01)。奉节病例组血Zn(72.76±10.87)μmol/L、Ca(1.82±0.19)mmol/L及尿氟(0.83±0.37)mg/L含量大于巫山病例组血Zn(69.01±6.98)μmol/L、Ca(1.41±0.12)mmol/L及尿氟(0.65±0.33)mg/L含量;奉节内对照组血Zn(77.66±12.03)μmol/L、Ca(1.85±0.23)mmol/L及尿氟(0.53±0.23)mg/L含量也大于巫山内对照组血Zn(73.39±8.99)μmol/L、Ca(1.45±0.21)mmol/L及尿氟(0.43±0.18)mg/L含量;血Zn、尿氟P均小于0.05;血Ca P值均小于0.01。结论:除主要致病元素氟外,两县燃煤型氟中毒发病与机体Zn、Ca、Cu、Fe含量关系密切,患者血Zn含量降低,两县儿童体内Cu、Fe含量水平较低;随着病区严重程度增加,病区人群血Zn、Ca含量减少。 展开更多

关键词 燃煤污染型地方性氟中毒 血 化学元素

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氟化钠诱导氧化应激促进大鼠子宫组织炎症反应及其作用机制 被引量：5

2

作者 廖星贵 李艳丽 +6 位作者 邱义稳 周永江 耿艳清 刘学庆 陈雪梅 王应雄 何俊琳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第17期1744-1749,共6页

目的通过对氟化钠染毒大鼠的炎症反应相关因子及关键信号通路分子的检测,探讨其对大鼠子宫组织细胞氧化损伤的作用机制。方法将30只雌性SD成年大鼠分为3组(10只/组),分别给予蒸馏水(对照组)、100 mg/L氟化钠溶液(100 mg/L氟化钠处理组)... 目的通过对氟化钠染毒大鼠的炎症反应相关因子及关键信号通路分子的检测,探讨其对大鼠子宫组织细胞氧化损伤的作用机制。方法将30只雌性SD成年大鼠分为3组(10只/组),分别给予蒸馏水(对照组)、100 mg/L氟化钠溶液(100 mg/L氟化钠处理组)、200 mg/L氟化钠溶液(200 mg/L氟化钠处理组)饮用,持续染毒180 d,建立氟化钠染毒动物模型。采用Western blot、免疫组织化学法检测子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表达;采用ELISA对氧化应激相关分子ROS、MDA、SOD、CAT、GSH进行检测;采用Western blot测定P38、ERK、JNK、PI3K活性物质的表达。结果 2个氟化钠处理组大鼠子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表达量明显高于对照组(P<0.05);2个氟化钠处理组ROS、SOD、CAT、GSH明显高于对照组,而MDA明显低于对照组(P<0.05);与对照组相比,2个氟化钠处理组P38、JNK蛋白磷酸化效率增加(P<0.05),而且ERK、PI3K总蛋白及磷酸化蛋白表达水平均有增加。结论氟化钠可诱导大鼠子宫组织的氧化应激,促进炎症反应发生,MAPK(ERK、JNK、P38)和PI3K信号通路可能参与其中。 展开更多

关键词 氟化钠 氧化应激 P38 JNK信号通路 子宫 炎症反应

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HOXa-10在早孕小鼠子宫内膜中的表达 被引量：4

3

作者 贾咏存 周生建 +3 位作者 魏莎莉 杨戎 陈晓玲 李南 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第12期1260-1264,共5页

目的:探讨HOXa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用。方法:分别应用FQ-PCR和免疫组化方法检测未孕及早孕第1、2、3、4、5、7天小鼠子宫内膜HOXa-10基因及蛋白的表达。结果:FQ-PCR测得随着小鼠妊娠天数的增加,子宫内膜HOXa-10基因表达量... 目的:探讨HOXa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用。方法:分别应用FQ-PCR和免疫组化方法检测未孕及早孕第1、2、3、4、5、7天小鼠子宫内膜HOXa-10基因及蛋白的表达。结果:FQ-PCR测得随着小鼠妊娠天数的增加,子宫内膜HOXa-10基因表达量也逐渐增高,在孕4天达到峰值免疫组化分析显示HOXa-10蛋白在子宫内膜的表达规律与FQ-PCR结果一致。结论:在小鼠胚胎着床过程中,HOXa-10在子宫内膜中高表达,可能对子宫内膜容受性变化有重要的调节作用。 展开更多

关键词 HOXA-10 胚胎着床 实时荧光定量PCR 免疫组织化学

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重庆市渝东北燃煤污染型地方性氟中毒流行因素调查 被引量：3

4

作者 闫菊 钟朝晖 +5 位作者 王应雄 王力 雍开文 张茂忠 罗兴建 晏维 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期653-656,共4页

目的探讨燃煤污染型地方性氟中毒（简称地氟病）发病的危险因素，为制订预防控制策略提供科学依据。方法2010年，在重庆市渝东北燃煤污染型地氟病流行区的巫山、奉节县，选择100名氟斑牙儿童及30名成人氟骨症患者作为病例组．在非地氟... 目的探讨燃煤污染型地方性氟中毒（简称地氟病）发病的危险因素，为制订预防控制策略提供科学依据。方法2010年，在重庆市渝东北燃煤污染型地氟病流行区的巫山、奉节县，选择100名氟斑牙儿童及30名成人氟骨症患者作为病例组．在非地氟病人群中选择100名儿童、30名成人以及在非地氟病区的渝北区选择30名成人作为对照组。根据知情同意原则，抽取研究对象空腹静脉血，测定血中锌（Zn）、铜（Cu）、钙（Ca）、镁（Mg）、铁（Fe）含量；收集尿液，检测尿氟。并对100名氟斑牙儿童及100名对照儿童进行氟污染情况及地氟病相关知识知晓情况的问卷调查，比较病例组与对照组的差异。结果病例组儿童血Zn[（70．88±9．28）μmoL／L]低于对照组[（75．53±10．78）μmol／L，P〈0．05]；病例组儿童血Cu[（30．28±2．58）μmol／L]及尿氟[（0．74±0．36）mg／L]高于对照组[（28．45±4．05）μmol／L、（0．48±0．21）mg／L，P均〈0．05]。病例组成人血Zn[（91．13±10．29）μmoL／L]低于对照组[（99．57±11．73）μmol／L，P〈0．05）]；病例组成人血Mg[（1．57±O．19）mmoL／L]、Fe[（8．17±1．01）mmol／L]及尿氟[（2．37±1．01）mg／L]高于对照组[（1．46±0．16）mmol／L、（7．72±0．96）mmol／L、（0．92±0．85）mg／L，P均〈0．05]。用煤取暖、炉灶改良、食用煤火烘烤食物、知道地氟病危害人体、知道地氟病可预防、知道食用烘烤食物引起地氟病、知道喝牛奶预防地氟病、吃钙片习惯是重要的相关因素，比值比（OR）分别为2．7335、0．3339、2．8428、0．4633、0．5439、0．4009、0．4805、0．3994（P均〈0．05）。结论除主要致病元素氟外，两县燃煤污染型地氟病发病与机体Zn含量关系密切，地氟病患者体内普遍缺Zn，提示缺Zn可能是氟致病的辅助因素。减少使用当地煤取暖、不食用煤火烘� 展开更多

关键词 氟化物中毒 元素 危险因素 数据收集

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GRB7基因在早孕小鼠子宫内膜中的表达 被引量：4

5

作者 汤军 李荣 +4 位作者 耿艳清 周永江 陈雪梅 何俊琳 刘学庆 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1149-1153,共5页

目的:研究生长因子结合受体7(growth factor receptor bound 7,GRB7)在早孕小鼠子宫内膜中的表达规律,探讨其在胚胎着床过程中的作用。方法:分别应用实时荧光定量PCR、免疫组化和Western blot方法检测未妊娠及妊娠早期d1～7小鼠子宫内膜... 目的:研究生长因子结合受体7(growth factor receptor bound 7,GRB7)在早孕小鼠子宫内膜中的表达规律,探讨其在胚胎着床过程中的作用。方法:分别应用实时荧光定量PCR、免疫组化和Western blot方法检测未妊娠及妊娠早期d1～7小鼠子宫内膜GRB7基因及蛋白的表达;孕3 d下午8点子宫角注射GRB7反义寡核苷酸,孕7 d观察胚泡着床数较正常组有无变化。结果:实时荧光定量PCR测得未妊娠(d0)和妊娠早期(d1～7)小鼠子宫内膜组织均有GRB7 mRNA表达,并在孕5 d达到峰值;免疫组化及Western blot分析显示GRB7蛋白在子宫内膜的表达规律与实时荧光定量PCR基本一致,孕1 d到孕4 d,GRB7蛋白主要表达部位为腔上皮、腺上皮,基质细胞少量表达,孕5 d、孕6 d,GRB7蛋白表达较之前增强,并且在基质细胞开始明显表达,孕5 d最强;孕6 d着床点GRB7蛋白高表达于初级蜕膜区,着床旁GRB7蛋白高表达于基质细胞;子宫角注射GRB7反义寡核苷酸后胚泡着床数较正常组明显减少。结论:GRB7在早孕小鼠子宫内膜中呈动态表达,提示它参与了胚胎着床的发育过程。 展开更多

关键词 生长因子结合受体7 子宫内膜 胚胎着床

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集束化护理预防呼吸机相关性肺炎的meta分析 被引量：2

6

作者 何立敏 凌舒娅 谢莉玲 《现代医药卫生》 2017年第14期2113-2116,共4页

目的评价集束化护理对呼吸机相关性肺炎(VAP)的有效性。方法采用计算机检索Pubmed、Embase、the Cochrane Library、CNKI、万方、维普等数据库有关集束化护理与VAP的研究,检索日期截至2016年7月1日。2位作者独立提取数据及文献质量评价... 目的评价集束化护理对呼吸机相关性肺炎(VAP)的有效性。方法采用计算机检索Pubmed、Embase、the Cochrane Library、CNKI、万方、维普等数据库有关集束化护理与VAP的研究,检索日期截至2016年7月1日。2位作者独立提取数据及文献质量评价。应用Rev Man 5.2进行数据统计分析。结果共纳入29篇文献,9 271例患者,其中集束化护理组4 600例,常规护理组4 671例。通过集束化护理可明显减少VAP的发生[相对危险度(RR)=0.59,95%CI(0.54,0.65)],明显缩短机械通气时间[加权均数差(WMD)=-5.03 d,95%CI(-6.46,-3.60)]及重症监护病房住院时间[WMD=-6.33 d,95%CI(-9.21,-3.44)],且同时可降低患者死亡率[RR=0.68,95%CI(0.58,0.79)],与常规护理组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论集束化护理能够有效地预防VAP的发生,明显地缩短机械通气及住院时间,降低患者死亡率,但其安全性尚需进一步研究证实。 展开更多

关键词 肺炎 呼吸机相关性 集束化护理 META分析 护理工作

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褪黑素参与苯并(a)芘诱导的孕早期卵巢功能异常 被引量：2

7

作者 徐翰婷 何俊琳 +6 位作者 刘学庆 丁裕斌 高茹菲 耿艳清 穆欣艺 王应雄 陈雪梅 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第5期658-664,共7页

该研究探讨了孕早期苯并芘[Benzo(a)pyrene,B(a)P]暴露对卵巢雌激素和孕激素的影响及其可能的机制。将SPF级健康成年雌雄昆明小鼠交配合笼,次晨查得阴栓则记为孕第1天(D1)。孕鼠随机分为对照组(n=60)和B(a)P组(n=60),每日称重后以0.1 m ... 该研究探讨了孕早期苯并芘[Benzo(a)pyrene,B(a)P]暴露对卵巢雌激素和孕激素的影响及其可能的机制。将SPF级健康成年雌雄昆明小鼠交配合笼,次晨查得阴栓则记为孕第1天(D1)。孕鼠随机分为对照组(n=60)和B(a)P组(n=60),每日称重后以0.1 m L/10 g动物体重分别灌胃给予玉米油和0.2 mg/(kg·d)浓度B(a)P。ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)方法检测孕D4小鼠血清雌激素(estrogen,E2)、孕激素(progesterone,P4)和褪黑素水平;q RT-PCR检测孕D1~D4小鼠卵巢组织雌孕激素合成限速酶17β-HSD1(17β-hydroxysteroid dehydrogenase 1)和P450SCC(cholesterol side-chain cleavage enzyme)m RNA水平;Western blot和免疫组化法分别检测卵巢组织褪黑素受体MT1(melatonin receptor 1)、MT2(melatonin receptor 2)蛋白质水平。研究结果发现,与对照组相比,B(a)P暴露导致孕早期小鼠血清中E2、P4明显降低;同时,卵巢雌孕激素合成限速酶17β-HSD1和P450SCC m RNA水平下调(P<0.05)。B(a)P组小鼠血清中褪黑素水平明显增高(P<0.01),而卵巢黄体细胞MT1、MT2蛋白质水平下降(P<0.05)。综上所述,褪黑素及其受体可能参与了B(a)P诱导的孕早期卵巢功能异常。 展开更多

关键词 苯并(A)芘 卵巢 雌孕激素 褪黑素受体

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B(a)P暴露干扰细胞周期调控蛋白影响孕早期小鼠卵巢黄体功能 被引量：2

8

作者 李南燕 徐翰婷 +5 位作者 杨节 穆欣艺 高茹菲 李方方 王应雄 陈雪梅 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第3期508-518,共11页

该研究旨在探讨苯并(a)芘[Benzo(a)pyrene,B(a)P]对孕早期小鼠卵巢黄体功能的影响及机制。体内模型:将昆明小鼠每晚按雌雄3:1的比例合笼,次晨查得阴栓记为孕第1天(d1);将其随机分为对照组和B(a)P处理组,每日早晨称重后以0.1 mL/10 g动... 该研究旨在探讨苯并(a)芘[Benzo(a)pyrene,B(a)P]对孕早期小鼠卵巢黄体功能的影响及机制。体内模型:将昆明小鼠每晚按雌雄3:1的比例合笼,次晨查得阴栓记为孕第1天(d1);将其随机分为对照组和B(a)P处理组,每日早晨称重后以0.1 mL/10 g动物体质量灌胃给予0.2 mg/(kg·d)的B(a)P,对照组灌胃等体积的玉米油,收取d4、d7小鼠卵巢组织。体外模型:培养小鼠卵巢颗粒细胞KK-1,将其分为对照组(0.1%DMSO)、HCG组(1.0 IU/mL HCG)、HCG+BPDE(1.0 IU/mL HCG和0.5μmol/L BPDE)联合处理组,处理细胞24 h后进行后续检测。ELISA检测小鼠血清雌激素(E2)、孕激素(P4)水平;qRT-PCR检测体内外卵巢雌、孕激素合成限速酶3β-HSD、17β-HSD和P450SCC的mRNA水平;免疫组化检测卵巢组织切片中Ki67、PCNA的表达,CCK-8检测KK-1细胞增殖情况;Western blot、免疫组化和免疫荧光检测周期相关蛋白CyclinA1、CDK2、CDK4、CyclinB1以及GAS1的表达情况。透射电镜和Mitotracker探针观察线粒体形态。与对照组相比,B(a)P暴露导致孕早期小鼠血清中E2、P4水平明显降低;同时,卵巢雌、孕激素合成限速酶3β-HSD、17β-HSD和P450SCC mRNA水平下调;CCK-8结果显示,BPDE暴露导致细胞活力下降;体内B(a)P暴露导致卵巢黄体中Ki67、PCNA表达下调;Western blot、免疫组化和免疫荧光结果显示,B(a)P或BPDE暴露下调细胞周期相关因子CyclinA1、CDK2、CDK4、CyclinB1及GAS1水平;电镜和免疫荧光结果显示,BPDE暴露导致线粒体形态异常。B(a)P及其代谢物BPDE干扰细胞周期调控,影响线粒体功能,进而导致孕早期小鼠卵巢黄体功能异常。 展开更多

关键词 苯并(A)芘 卵巢 细胞周期 线粒体 GAS1

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高脂饮食诱导的肥胖早孕小鼠子宫内膜蜕膜反应受损 被引量：1

9

作者 陈子轩 李伟轲 +6 位作者 陈雪梅 刘学庆 丁裕斌 李方方 何俊琳 王应雄 高茹菲 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期204-214,共11页

目的:探讨高脂饮食诱导的肥胖对小鼠子宫内膜蜕膜反应的影响。方法:将12只4周龄健康C57BL/6J雌性小鼠随机分为高脂组和对照组(每组6只),分别饲喂高脂(22 kJ/g)、正常(16 kJ/g)饲料12周。每周测量小鼠体重,喂养12周后测量小鼠体长、体宽... 目的:探讨高脂饮食诱导的肥胖对小鼠子宫内膜蜕膜反应的影响。方法:将12只4周龄健康C57BL/6J雌性小鼠随机分为高脂组和对照组(每组6只),分别饲喂高脂(22 kJ/g)、正常(16 kJ/g)饲料12周。每周测量小鼠体重,喂养12周后测量小鼠体长、体宽并检测空腹血清三酰甘油和总胆固醇水平。将雌鼠与健康C57BL/6J雄鼠合笼交配,收集妊娠第7天子宫组织,采用苏木精-伊红染色观察子宫内膜细胞形态,Masson染色观察子宫内膜胶原纤维;采用免疫组织化学法、蛋白质印迹法检测子宫内膜蜕膜反应相关蛋白表达。分离原代小鼠子宫内膜基质细胞,油酸、棕榈酸模拟高脂环境进行干预,雌二醇、孕酮诱导细胞发生蜕膜反应后,油红O、Bodipy染色观察脂滴累积情况,鬼笔环肽染色观察细胞骨架,实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测蜕膜反应相关标志物的基因和蛋白表达。结果:饲养12周后,高脂组体重明显高于对照组(P<0.01),两组体长无明显差异(P>0.05),但高脂组体宽显著大于对照组(P<0.01),血清三酰甘油和总胆固醇水平均显著高于对照组(均P<0.05)。高脂组胚胎着床数显著少于对照组(P<0.01),高脂组子宫内膜基质细胞向蜕膜细胞转换缓慢且形态异常,蜕膜反应标志物骨形成蛋白(BMP)2、同源异形框A10(HOXA10)表达水平均低于对照组,其中两组HOXA10表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。油红O、Bodipy染色结果显示,原代小鼠子宫内膜基质细胞经高脂处理后,脂滴堆积明显增多,鬼笔环肽染色发现其细胞骨架形态异常,蜕膜反应相关基因dtprp、HOXA10以及蛋白BMP2、HOXA10、环氧合酶2的表达水平均明显低于对照组(均P<0.05)。结论:高脂饮食诱导的肥胖会损伤小鼠子宫内膜的蜕膜反应。 展开更多

关键词 高脂饮食 肥胖 胚胎着床 蜕膜反应 小鼠 子宫内膜基质细胞

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自噬相关蛋白Atg5及P62在DEHP引起新生鼠卵泡发育异常过程中的作用 被引量：2

10

作者 汪玉姮 穆欣艺 +6 位作者 苏燕 谢翼 王应雄 何俊琳 刘学庆 陈雪梅 高茹菲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期223-227,共5页

目的：探讨自噬相关蛋白Atg5及P62在邻苯二甲酸二乙基己酯（diethylhexyl phthalate,DEHP）引起新生鼠卵巢卵泡发育异常这一过程中的作用。方法：将健康6-8周龄清洁级成年雌性昆明鼠随机分为对照组（玉米油）和DEHP组,每组30只,均不做... 目的：探讨自噬相关蛋白Atg5及P62在邻苯二甲酸二乙基己酯（diethylhexyl phthalate,DEHP）引起新生鼠卵巢卵泡发育异常这一过程中的作用。方法：将健康6-8周龄清洁级成年雌性昆明鼠随机分为对照组（玉米油）和DEHP组,每组30只,均不做任何处理。成年雌鼠生产后的新生鼠分为对照组（玉米油）和DEHP组,采用腹腔注射方式,DEHP组按0.62 mg/kg浓度对新生鼠进行注射,对照组注射相同体积玉米油,从新生鼠出生第1天开始注射,每天1次,连续5 d,注射结束后收集新生鼠卵巢组织,HE染色观察卵巢各级卵泡的发育情况,q RT-PCR及Western blot检测卵泡发育标志分子GDF9及自噬相关蛋白Atg5、P62的表达情况。结果：与对照组比较,HE染色结果显示DEHP组原始卵泡数量明显减少（P=0.005）,而初级卵泡数量无明显改变（P=0.555）;q RT-PCR结果显示DEHP组新生鼠卵巢组织中卵泡发育标志分子GDF9 m RNA表达明显降低（P=0.034）,而自噬标志分子Atg5、P62 m RNA表达明显增加（P值分别为0.001、0.024）。Western blot结果显示DEHP组新生鼠卵巢中自噬相关蛋白Atg5及P62均明显增加,差异有统计学意义（P值分别为0.008、0.001）。结论：在DEHP暴露引起新生鼠卵巢卵泡发育异常这一过程中,自噬标记蛋白Atg5及P62可能发挥着重要作用。 展开更多

关键词 邻苯二甲酸二乙基己酯 自噬 卵泡发育 Atg5 P62

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ApoA Ⅳ在早孕期小鼠和女性妊娠不同时期的变化规律及其作用 被引量：1

11

作者 刘鑫 李剑 +4 位作者 刘娜 高茹菲 何俊琳 王应雄 刘学庆 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期929-935,共7页

目的:探讨载脂蛋白AⅣ(apolipoprotein AⅣ,Apo AⅣ)在早孕期小鼠和妊娠期女性不同时期的表达规律,初步分析其在早孕期小鼠胚胎着床和蜕膜化过程中的作用。方法:将84只购于重庆医科大学实验动物中心的雌性昆明小鼠随机分成2组,真孕组(42... 目的:探讨载脂蛋白AⅣ(apolipoprotein AⅣ,Apo AⅣ)在早孕期小鼠和妊娠期女性不同时期的表达规律,初步分析其在早孕期小鼠胚胎着床和蜕膜化过程中的作用。方法:将84只购于重庆医科大学实验动物中心的雌性昆明小鼠随机分成2组,真孕组(42只)为正常雌鼠与正常雄鼠交配,假孕组(42只)为正常雌鼠与结扎后的雄鼠交配,应用ELISA方法分别分析早孕期真孕组和假孕组小鼠孕1天~7天(d1~d7)血清中Apo AⅣ和高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)的表达量;将重庆医科大学附属第一医院产前诊断中心提供的70例孕妇血清按照孕周的不同分为孕早期12周(15例)、13周(15例)和孕中期15~18周(每组各10例)组,分别检查血清中Apo AⅣ和HDL的表达量;利用免疫组化法,分析Apo AⅣ在孕d1、d5、d6、d7子宫内膜中的表达情况。结果:Apo AⅣ和HDL在早孕期小鼠真孕组血清中孕d1~d7随着妊娠天数的增加,其表达量逐渐升高,孕d2~d7分别与孕d1相比具有统计学差异(P<0.01),而在假孕组中并无明显的变化(P>0.05);Apo AⅣ和HDL在早、中孕期女性血清中的表达量随着妊娠周数的增加其升高趋势也逐渐加强,孕12周血清中Apo AⅣ和HDL的表达量分别都明显低于后面的孕周(P=0.000);通过免疫组化结果显示,Apo AⅣ在孕d1的腺上皮有轻微的表达,而在孕d5、d6具有广泛表达且在孕d7初级蜕膜区表达明显降低(P<0.05)。结论:早孕期小鼠血清中的Apo AⅣ表达量可能与胚胎发育和子宫内膜基质细胞的蜕膜化进程相关。 展开更多

关键词 脂蛋白A Ⅳ 高密度脂蛋白 小鼠 子宫内膜

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乙烯利暴露对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化的影响 被引量：1

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作者 黄春玲 陈雪梅 +5 位作者 李芳芳 刘学庆 何俊琳 丁裕斌 王应雄 高茹菲 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第5期939-946,共8页

该研究主要探讨乙烯利(ethephon,ETH)暴露对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化的影响。从孕第一天开始每天经口灌胃给予CD1小鼠0、71.25、142.5和285 mg/kg ETH后,于孕第七天处死小鼠。观察子宫胚胎着床数量,记录子宫重量及体重,采用酶联免疫吸附... 该研究主要探讨乙烯利(ethephon,ETH)暴露对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化的影响。从孕第一天开始每天经口灌胃给予CD1小鼠0、71.25、142.5和285 mg/kg ETH后,于孕第七天处死小鼠。观察子宫胚胎着床数量,记录子宫重量及体重,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunesorbent assay,ELISA)检测孕鼠血清雌孕激素水平,RT-PCR、Western blot和免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测HOXA10、COX2和BMP2等蜕膜化标记分子的mRNA和蛋白表达水平。构建假孕小鼠体内人工诱导蜕膜化模型,RT-PCR检测蜕膜化标记分子HOXA10、COX2和BMP2的mRNA表达水平。结果表明,在285 mg/kg ETH暴露下,小鼠孕第七天子宫胚胎着床数量显著降低(P<0.001),其绝对子宫重量和相对子宫重量均显著低于对照组(P<0.001)。RT-PCR结果显示,285 mg/kg ETH暴露组BMP2和HOXA10 mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.001),COX2表达水平显著高于对照组(P<0.001)。Western blot结果显示,与对照组相比,285 mg/kg ETH暴露组其子宫内膜蜕膜化标记分子HOXA10蛋白表达水平显著降低,COX2、MMP9、PR表达水平显著升高。IHC结果显示,与对照组相比,285 mg/kg ETH暴露组其子宫内膜蜕膜化标记分子HOXA10和BMP2蛋白表达水平显著降低。ELISA检测结果表明,285 mg/kg ETH暴露组其血清孕激素水平显著降低(P<0.001)。体内人工诱导蜕膜化模型检测结果显示,ETH暴露组人工诱导蜕膜化反应程度降低,诱导侧子宫重量与非诱导侧子宫重量之比显著低于对照组,蜕膜化标记分子HOXA10和BMP2 mRNA表达水平显著降低。该研究结果表明,孕早期ETH暴露会损害小鼠子宫内膜蜕膜化。 展开更多

关键词 早孕 子宫内膜蜕膜化 乙烯利

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自噬抑制剂3-MA对围着床期小鼠子宫胚胎着床的影响 被引量：1

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作者 陈梦月 高茹菲 +8 位作者 李娜 苏燕 陆思宇 龙菁 何俊琳 陈雪梅 刘学庆 丁裕斌 王应雄 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第5期686-691,共6页

该文探索了自噬抑制剂3-MA对围着床期小鼠子宫胚胎着床的影响。将成年昆明雌性小鼠随机分为对照组、3-MA低剂量组(15 mmol/L)和3-MA高剂量组(30 mmol/L)。自小鼠孕D1起,腹腔注射自噬抑制剂3-MA,直到处死,以腹腔注射PBS作为对照。收集孕D... 该文探索了自噬抑制剂3-MA对围着床期小鼠子宫胚胎着床的影响。将成年昆明雌性小鼠随机分为对照组、3-MA低剂量组(15 mmol/L)和3-MA高剂量组(30 mmol/L)。自小鼠孕D1起,腹腔注射自噬抑制剂3-MA,直到处死,以腹腔注射PBS作为对照。收集孕D4、D5、D6子宫内膜组织,Western blot检测自噬抑制剂3-MA注射后自噬相关因子Atg5和LC3蛋白表达,形态学观察对照组和3-MA自噬抑制剂组胚胎着床点数量。Real-time PCR检测Cathepsin B、P62、孕激素受体(PR)和雌激素受体α(ERα)m RNA在孕D5子宫内膜的表达。免疫组化检测PR在孕D5子宫内膜的表达。结果显示,在自噬抑制剂3-MA的作用下,自噬相关因子Atg5、LC3蛋白在孕D4~D6小鼠子宫中的表达量明显降低,Cathepsin B、P62 m RNA在孕D5小鼠子宫中的表达显著降低。注射3-MA自噬抑制剂后,孕D6小鼠着床点(IS)数量比正常组明显减少。在孕D5小鼠子宫内膜着床旁(IIS)和着床点中,自噬抑制剂3-MA干预组PR的蛋白质表达量明显降低,PR和ERαm RNA表达量均显著降低,随着3-MA抑制剂剂量的升高,PR和ERαm RNA表达降低得更显著。结果表明,自噬抑制剂3-MA可能会对小鼠胚胎着床时子宫内膜容受性产生影响,其机制有待进一步研究。 展开更多

关键词 胚胎着床 自噬 3-MA PR ERΑ

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Nme2基因参与小鼠基质细胞蜕膜化过程

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作者 张雪 张爽 +5 位作者 陈雪梅 刘学庆 何俊琳 王应雄 丁裕斌 付利娟 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期965-969,共5页

目的:检测Nme2(nucleoside diphosphate kinase 2)基因在小鼠早期妊娠和人工诱导蜕膜化的子宫内膜组织中的表达规律;探究Nme2基因与子宫基质细胞蜕膜化的相关性。方法:利用免疫组织化学、Western blot和实时荧光定量PCR(q RTPCR)分别检... 目的:检测Nme2(nucleoside diphosphate kinase 2)基因在小鼠早期妊娠和人工诱导蜕膜化的子宫内膜组织中的表达规律;探究Nme2基因与子宫基质细胞蜕膜化的相关性。方法:利用免疫组织化学、Western blot和实时荧光定量PCR(q RTPCR)分别检测小鼠妊娠第5天着床点(D5IS)、着床旁(D5IIS),D6IS、D6IIS、D8IS、D8IIS及人工诱导蜕膜化模型小鼠子宫内膜中Nme2的表达定位,m RNA和蛋白质水平的表达水平。结果:小鼠D5、D6、D8子宫内膜中着床点Nme2基因的m RNA和蛋白水平的表达明显高于着床旁;免疫组织化学结果显示Nme2表达定位表达于D5着床点的初级蜕膜区(primary decidua region,PDZ)、D6和D8着床点的次级蜕膜区(secondary decidua region,SDZ);人工诱导蜕膜化模型中,Nme2基因的m RNA和蛋白质水平在诱导组的表达明显高于对照组。结论:Nme2基因的表达上调与小鼠基质细胞的蜕膜化过程相关。 展开更多

关键词 子宫内膜 蜕膜化 Nme2

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环状RNA circCapzb在早孕小鼠围植入期子宫内膜中的表达

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作者 毛裘 张爽 +6 位作者 李娜 刘学庆 何俊琳 陈雪梅 丁裕斌 王应雄 高茹菲 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第3期409-417,共9页

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类新型内源性非编码RNA,与多种疾病的发生、发展密切相关,但在胚胎着床的过程中罕见报道。该文旨在探讨环状RNA circCapzb在早孕小鼠围植入期子宫内膜中的表达。采用Real-time PCR检测正常妊娠小鼠孕... 环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类新型内源性非编码RNA,与多种疾病的发生、发展密切相关,但在胚胎着床的过程中罕见报道。该文旨在探讨环状RNA circCapzb在早孕小鼠围植入期子宫内膜中的表达。采用Real-time PCR检测正常妊娠小鼠孕第5天(d5)至第7天(d7)胚胎着床点及胚胎着床旁组织中circCapzb的表达水平;分别构建小鼠体内人工诱导蜕膜化模型和原代小鼠子宫内膜基质细胞体外人工诱导蜕膜化模型,采用Real-time PCR分别检测circCapzb在组织及细胞蜕膜化诱导模型中的表达;通过生物信息学预测circCapzb下游靶miRNA:miR-377-3p和miR-7005-5p,并采用Real-time PCR检测其在蜕膜化诱导模型中的表达。结果表明,circCapzb在小鼠孕第5天至第7天胚胎着床点的表达明显高于着床旁;circCapzb在组织及体内外细胞蜕膜化诱导模型中诱导组的表达明显高于未诱导组(对照组);circCapzb下游靶miR-377-3p和miR-7005-5p在组织及体内外细胞蜕膜化诱导模型中诱导组的表达明显低于未诱导组。该研究初步表明,circCapzb在小鼠早孕期胚胎着床点高表达,在组织及体内外细胞蜕膜化诱导模型中高表达,在小鼠妊娠早期子宫内膜蜕膜化过程中可能发挥作用,但具体机制有待进一步研究。 展开更多

关键词 环状RNA circCapzb 围植入期 子宫内膜 蜕膜化

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高胰岛素增加早孕小鼠子宫内膜蜕膜化进程中血管紧张素Ⅱ的表达

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作者 陈文琪 张晨 +6 位作者 王应雄 何俊琳 刘学庆 陈雪梅 穆欣艺 丁裕斌 高茹菲 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第3期341-345,共5页

目的探讨高水平胰岛素对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化进程中血管标志分子血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)的影响。方法皮下注射胰岛素构建高水平胰岛素动物模型。将其与正常雄鼠交配后收集妊娠第6、7和8天(D6、D7和D8)的子宫组织及血清,并监测血糖。另... 目的探讨高水平胰岛素对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化进程中血管标志分子血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)的影响。方法皮下注射胰岛素构建高水平胰岛素动物模型。将其与正常雄鼠交配后收集妊娠第6、7和8天(D6、D7和D8)的子宫组织及血清,并监测血糖。另将其与输精管结扎的雄鼠交配构建人工诱导蜕膜化模型,于假孕D8收集子宫组织。ELISA检测血清中胰岛素及雌、孕激素的变化,real-time PCR检测子宫内膜Ang-ⅡmRNA的表达,Western blot对子宫内膜Ang-Ⅱ蛋白表达进行检测。结果高胰岛素模型中血清胰岛素水平于妊娠D6、D7和D8均明显升高(P<0.001)、雌激素水平于妊娠D8出现显著下降(P<0.05),孕激素水平于妊娠D6、D8出现明显下降(P<0.01)。与对照组比较,高胰岛素模型中子宫内膜组织中Ang-Ⅱ的mRNA及蛋白的表达显著增加(P<0.05)。结论高胰岛素增加孕鼠蜕膜化进程中子宫内膜组织Ang-Ⅱ的表达,从而影响子宫内膜蜕膜化进程中的血管生成。 展开更多

关键词 胰岛素 子宫内膜蜕膜化 Ang-Ⅱ 血管生成

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苯并(a)芘通过干扰Wnt7a影响小鼠胚胎着床

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作者 李雪妍 沈茶 +5 位作者 刘学庆 丁裕斌 何俊琳 高茹菲 王应雄 陈雪梅 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期942-947,共6页

目的:苯并(a)芘(benzo(a)pyrene,Ba P)被证实是对生殖有不良影响的雌激素类似物,研究发现苯并(a)芘影响胚胎着床,本研究检测Ba P对早孕小鼠子宫中Wnt信号通路的影响,以探讨其干扰胚胎着床的机制。方法:将成年雌雄昆明鼠进行交配,次日见... 目的:苯并(a)芘(benzo(a)pyrene,Ba P)被证实是对生殖有不良影响的雌激素类似物,研究发现苯并(a)芘影响胚胎着床,本研究检测Ba P对早孕小鼠子宫中Wnt信号通路的影响,以探讨其干扰胚胎着床的机制。方法:将成年雌雄昆明鼠进行交配,次日见阴栓记为妊娠第1天(D1)。将孕鼠随机分为玉米油对照组(n=45)和Ba P处理组(n=45),玉米油对照组从妊娠第1天开始给予玉米油灌胃,Ba P处理组则给予0.2 mg/(kg·d)的Ba P进行灌胃,直至妊娠的第4、5、6天(D4、D5、D6)分别处死,收取子宫材料,计数着床点数目,采用荧光定量PCR,免疫组化法,Western blot分别检测所收集子宫内膜材料中Wnt信号通路相关基因表达情况。结果:苯并(a)芘染毒后,引起胚胎着床数下降,差异具有统计学意义(P=0.000);荧光定量PCR显示Wnt7a m RNA水平在Ba P组较对照组表达下降,差异具有统计学意义(P=0.000);而β-catenin m RNA在Ba P组水平升高,差异具有统计学意义(P=0.002、P=0.003、P=0.011);Western blot和免疫组化也均显示Ba P染毒后Wnt7a的表达下降,β-catenin的表达有所上升。结论:苯并(a)芘可能通过干扰Wnt7a、β-catenin的表达影响小鼠胚胎着床。 展开更多

关键词 苯并(A)芘 小鼠 胚胎着床 Wnt7a

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环状RNA在生殖和围产领域的研究进展

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作者 张爽 丁裕斌 高茹菲 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期976-980,共5页

环状RNA(circular RNAs,circ RNAs)是一类新发现的内源性非编码RNA,是RNA领域的研究热点。circ RNAs呈闭合环状结构,具有结构稳定、高度保守以及组织和发育阶段特异表达等特征。circ RNAs参与多种生物学功能,除了mi RNA海绵吸附功能,更... 环状RNA(circular RNAs,circ RNAs)是一类新发现的内源性非编码RNA,是RNA领域的研究热点。circ RNAs呈闭合环状结构,具有结构稳定、高度保守以及组织和发育阶段特异表达等特征。circ RNAs参与多种生物学功能,除了mi RNA海绵吸附功能,更多新的功能正逐渐被发现,如调节基因转录和剪切以及翻译蛋白质等。目前已有大量研究表明,circ RNAs与疾病和发育等生理病理过程密切相关。本文重点对circ RNAs的生物学功能以及其在生殖、围产领域的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 环状RNA 生物学功能 生殖 围产期

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早孕小鼠子宫内膜M2型丙酮酸激酶基因表达的研究

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作者 刘春艳 高茹菲 +7 位作者 何俊琳 刘学庆 陈雪梅 丁裕斌 耿艳清 李娜 陈梦月 王应雄 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第7期849-856,共8页

该研究分析了M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)基因在早孕小鼠子宫内膜的表达规律。通过建立正常妊娠小鼠模型,收集孕D1、D4、D5、D6、D7小鼠子宫内膜组织及孕D5小鼠着床点及着床旁子宫内膜组织。构建假孕小鼠模型,收集假孕PD1... 该研究分析了M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)基因在早孕小鼠子宫内膜的表达规律。通过建立正常妊娠小鼠模型,收集孕D1、D4、D5、D6、D7小鼠子宫内膜组织及孕D5小鼠着床点及着床旁子宫内膜组织。构建假孕小鼠模型,收集假孕PD1、PD4、PD5、PD6和PD7小鼠子宫内膜组织。用Real-time PCR和Western blot方法检测PKM2 m RNA和蛋白质表达水平;免疫组织化学方法检测PKM2蛋白质在孕D5着床点与着床旁子宫内膜的分布。研究结果显示,在正常妊娠小鼠子宫内膜,PKM2 m RNA表达从孕D5开始出现明显升高,孕D6达高峰,孕D7略有下降,孕D6、孕D7与孕D1相比有明显差异。PKM2蛋白质从孕D6开始出现明显升高,孕D7略有下降,孕D6、孕D7与孕D1相比有明显差异。假孕小鼠子宫内膜PKM2 m RNA水平从PD6开始有明显升高,PD7与PD6水平相当,PD6、PD7与PD1相比有明显差异。PKM2蛋白质水平每两组间无明显差异。孕D5小鼠子宫内膜组织中,PKM2 m RNA及蛋白质水平均呈现着床点明显高于着床旁趋势。该研究初步揭示了PKM2基因在早孕小鼠子宫内膜表达规律,为深入探讨PKM2在维持早孕小鼠子宫内膜正常功能的机制上的作用提供了重要线索。 展开更多

关键词 PKM2 子宫内膜 胚胎着床 早孕

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转录因子EB对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化的影响

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作者 陆思宇 苏燕 +6 位作者 尹鑫 陈雪梅 何俊琳 刘学庆 丁裕斌 王应雄 高茹菲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期615-619,共5页

目的:探索转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)在围植入期小鼠子宫内膜的表达规律,初步探讨TFEB在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用。方法:构建正常妊娠小鼠模型并分别收集早孕第4、5、6天(D4、D5、D6)的小鼠子宫内膜及D5的子宫内... 目的:探索转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)在围植入期小鼠子宫内膜的表达规律,初步探讨TFEB在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用。方法:构建正常妊娠小鼠模型并分别收集早孕第4、5、6天(D4、D5、D6)的小鼠子宫内膜及D5的子宫内膜着床点组织(implantation site,IS)和着床旁组织(inter-implantation site,IIS);构建假孕小鼠模型并分别收集假孕第4、5、6天(PD4、PD5、PD6)的小鼠子宫内膜组织;构建体内人工诱导蜕膜化模型并分别收集对照侧(induced decidualization control,IDC)和诱导侧(induced decidualization,ID)的小鼠子宫内膜组织;构建体外人工诱导蜕膜化模型并分别收集对照组和诱导组的小鼠子宫内膜基质细胞。使用Western blot和Real-time PCR检测TFEB在小鼠子宫内膜中和在小鼠子宫内膜基质细胞中的mRNA和蛋白表达;使用免疫组化方法检测TFEB在小鼠D5子宫内膜中的分布和表达。结果:随着孕期天数的增加,TFEB在D4、D5、D6的表达逐渐减少;TFEB在D5子宫IS的mRNA和蛋白表达明显低于D5的子宫IIS;TFEB在蜕膜化诱导侧子宫内膜组织的mRNA和蛋白表达明显低于未诱导侧子宫内膜组织;子宫内膜基质细胞蜕膜化诱导后TFEB mRNA和蛋白表达明显低于未诱导组。结论:本研究初步揭示TFEB可能与小鼠妊娠早期子宫内膜蜕膜化有关,但其具体调节作用有待进一步深入探讨。 展开更多

关键词 转录因子EB 子宫内膜蜕膜化 胚胎着床 早孕

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