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五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:10
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作者 孙涛 夏明星 +5 位作者 孔德英 张学健 滕少娜 邓朝晖 夏晓华 李应国 《贵州农业科学》 CAS 2016年第8期15-18,共4页
为五倍子蜂蜜的鉴定检测提供技术支撑,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以五倍子树基因组中ITS基因为靶序列,设计并筛选出特异性引物探针,通过特异性、灵敏度和重复性等试验,建立五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明... 为五倍子蜂蜜的鉴定检测提供技术支撑,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以五倍子树基因组中ITS基因为靶序列,设计并筛选出特异性引物探针,通过特异性、灵敏度和重复性等试验,建立五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明:建立的方法特异性良好,生成的标准曲线有良好的线性关系,相关系数(R2)为0.998,最低检测限为0.2pg DNA/反应。该方法特异性强、灵敏度高、结果可靠。 展开更多
关键词 五倍子树 蜂蜜 检测 TaqMan实时荧光定量PCR
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基于ITS2序列的黄连及其伪混品的分子鉴定 被引量:8
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作者 孙涛 孔德英 +3 位作者 滕少娜 陆丽华 邓朝晖 李应国 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第9期20-22,共3页
为建立重要中药材黄连及其伪混品的DNA条形码鉴定方法,采用国际通用的条形码序列ITS2对黄连属3个物种6份样品的ITS2序列进行PCR扩增与测序,同时从GenBank下载黄连及其常见混伪品共8个物种18个样本的序列信息。采用MEGA5.05计算黄连及其... 为建立重要中药材黄连及其伪混品的DNA条形码鉴定方法,采用国际通用的条形码序列ITS2对黄连属3个物种6份样品的ITS2序列进行PCR扩增与测序,同时从GenBank下载黄连及其常见混伪品共8个物种18个样本的序列信息。采用MEGA5.05计算黄连及其伪混品的种内、种间K2P距离,并基于K2P模型构建NJ树。结果显示:ITS2种间遗传距离大于种内遗传距离,黄连属及其伪混品不同种样品分别聚类在一起,能很好地区分开来。故ITS2序列可以作为黄连及其伪混品鉴定用的条形码。 展开更多
关键词 黄连 DNA条形码 ITS2 鉴定
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基于ITS2条形码的人参属物种鉴定研究 被引量:6
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作者 孙涛 孔德英 +4 位作者 滕少娜 蒋丹 邓朝晖 陆丽华 何玲 《湖北农业科学》 2016年第19期5072-5074,共3页
人参属植物种类繁多,多数具有重要的生物学及药用价值。采用植物DNA条形码候选序列之一的ITS2片段鉴定人参属药用植物。结果表明,ITS2基因区通用性强,序列在人参属物种间差异较大,属内变异位点为41个,保守位点189个,种内遗传距离为0-0.0... 人参属植物种类繁多,多数具有重要的生物学及药用价值。采用植物DNA条形码候选序列之一的ITS2片段鉴定人参属药用植物。结果表明,ITS2基因区通用性强,序列在人参属物种间差异较大,属内变异位点为41个,保守位点189个,种内遗传距离为0-0.004,种间遗传距离为0.006-0.098,平均遗传距离为0.044。基于K2P模型构建的系统发育树(NJ树)显示,同一物种均聚为一类。因此,ITS2作为DNA条形码能够有效地区别人参属物种,为人参属药材及其伪混品的鉴定提供基础。 展开更多
关键词 人参属 DNA条形码 ITS2 鉴定
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石柱黄连出口现状及对策研究 被引量:2
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作者 孔德英 陆丽华 +3 位作者 滕少娜 孙涛 邓朝晖 李应国 《中国现代中药》 CAS 2013年第8期701-703,共3页
虽有报道石柱黄连已出口日本、马来西亚、新加坡等50多个国家和地区,但大多为转口贸易,直接出口的量非常小。为了破解石柱黄连直接出口贸易遇到的难题,不断的推动石柱黄连国际市场的开发,从信息获取受限、政府引导乏力、产品质量不高、... 虽有报道石柱黄连已出口日本、马来西亚、新加坡等50多个国家和地区,但大多为转口贸易,直接出口的量非常小。为了破解石柱黄连直接出口贸易遇到的难题,不断的推动石柱黄连国际市场的开发,从信息获取受限、政府引导乏力、产品质量不高、大品牌缺乏等方面分析了原因,并提出了扩大信息获取途径、理顺产品出口渠道、重视深加工、做优品牌等应对策略。 展开更多
关键词 石柱 黄连 出口 对策研究
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喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立
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作者 孙涛 孔德英 +1 位作者 滕少娜 邓朝晖 《贵州农业科学》 CAS 2017年第2期5-9,共5页
为寻求喀斯特炭疽菌的快速检测方法,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以喀斯特炭疽菌基因组中的ACT基因为靶序列设计并筛选特异性引物探针,通过特异性、灵敏度、重复性试验建立喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明... 为寻求喀斯特炭疽菌的快速检测方法,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以喀斯特炭疽菌基因组中的ACT基因为靶序列设计并筛选特异性引物探针,通过特异性、灵敏度、重复性试验建立喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明:建立方法的特异性较强、灵敏度较高、重复性稳定性较好,最低检测限为0.2pg DNA/反应,标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.998。该方法操作简便,可用于进出境口岸喀斯特炭疽菌的检疫。 展开更多
关键词 喀斯特炭疽菌 检疫 鉴定 TaqMan实时荧光PCR
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