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circ_0061140靶向miR-6838-5p促进非小细胞肺癌细胞的增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡 被引量：1
1
作者 蒋君霞 杨国荣 +1 位作者 谷涉群 喻珣 《医学分子生物学杂志》 CAS 2022年第6期464-471,共8页
目的通过实验研究确认环状RNA(circRNA)circ_0061140是否能靶向miR-6838-5p调控非小细胞肺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。方法采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0061140和miR-6838-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达情况。将... 目的通过实验研究确认环状RNA(circRNA)circ_0061140是否能靶向miR-6838-5p调控非小细胞肺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。方法采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0061140和miR-6838-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达情况。将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为si-circ_0061140组(转染si-circ_0061140;低表达circ_0061140)、si-NC组(转染si-NC;阴性对照)、NC组(未转染;空白对照)、miR-6838-5p组(转染miR-6838-5p模拟物;高表达miR-6838-5p)、miR-NC组(转染miR-NC;高表达miR-6838-5p的阴性对照)、si-circ_0061140+anti-miR-NC组(共转染si-circ_0061140与anti-miR-NC)、si-circ_0061140+anti-miR-6838-5p组(共转染si-circ_0061140与anti-miR-6838-5p)。采用Western印迹检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleavedcaspase-3)蛋白表达,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。双荧光素酶活性检测circ_0061140和miR-6838-5p的靶向结合。结果非小细胞肺癌组织、细胞NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975中的circ_0061140表达量均比癌旁组织或正常肺上皮细胞BEAS-2B高,miR-6838-5p表达量比癌旁组织或BEAS-2B细胞低(P_(均)<0.05)。si-circ_0061140组或miR-6838-5p组NCI-H1299细胞的CyclinD1蛋白表达量、增殖能力、S期细胞比例比NC组减少,Cleaved-caspase-3蛋白表达量、G_(0)/G_(1)期细胞比例、凋亡率比si-NC组或miR-NC组增加(P均<0.05)。circ_0061140靶向调控miR-6838-5p的表达。共转染si-circ_0061140、anti-miR-6838-5p可减弱转染si-circ_0061140对细胞生物学行为的作用。结论低表达circ_0061140通过靶向非小细胞肺癌细胞的miR-6838-5p,抑制细胞增殖、阻滞G_(0)/G_(1)期细胞周期,并加速凋亡。 展开更多
关键词 circ_0061140 非小细胞肺癌 miR-6838-5p 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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