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香烟烟雾提取物对小鼠血管平滑肌细胞的损伤作用及表型转变的影响 被引量：1
1
作者 宁静 张松 张余杭 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第1期44-48,共5页
目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对小鼠血管平滑肌细胞的损伤作用及表型转变的影响。方法制备CSE,分别使用2.5%、5%、10%、20%CSE处理小鼠血管平滑肌细胞(MOVAS细胞),并以正常MOVAS细胞作为对照组。MTT法检测各浓度CSE处理后细胞的存活率,... 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对小鼠血管平滑肌细胞的损伤作用及表型转变的影响。方法制备CSE,分别使用2.5%、5%、10%、20%CSE处理小鼠血管平滑肌细胞(MOVAS细胞),并以正常MOVAS细胞作为对照组。MTT法检测各浓度CSE处理后细胞的存活率,活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS水平。流式细胞仪结合PI单染以及Annexin V-PI双染技术分别分析10%CSE处理后细胞周期和细胞凋亡率的变化。实时荧光定量PCR分析10%CSE处理后MOVAS细胞内SMemb和SMA的mRNA表达水平,Western blot检测10%CSE处理后MOVAS细胞内SMemb和SMA的蛋白表达水平。结果 2.5%、5%、10%及20%CSE处理后,MOVAS细胞的存活率分别为89.6%±8.6%、65.2%±10.0%、53.6%±6.9%、43.1%±5.9%,各组与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);各浓度CSE处理后细胞内ROS水平显著提高。10%CSE处理后细胞G1期比例明显上升,细胞凋亡率也显著提高,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。10%CSE处理后MOVAS合成型标志物SMemb的表达水平显著增高,而收缩型标志物SMA的表达水平显著降低。结论 CSE可以对小鼠血管平滑肌细胞造成损伤,并能够使小鼠血管平滑肌细胞表型由收缩型向合成型转变,其机制可能与CSE引起的细胞内ROS增高有关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 血管平滑肌细胞 香烟烟雾提取物
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番茄红素对血管内皮细胞损伤的保护作用
2
作者 宁静 张松 张余杭 《医药导报》 CAS 2015年第7期860-865,共6页
目的研究番茄红素对香烟烟雾提取物致血管内皮细胞损伤的保护作用。方法将人脐周静脉血管内皮细胞(HUVEC)分为4组,对照组不做任何处理,其余3组分别使用10%香烟烟雾提取物(CSE)、10%CSE+1.0μmol·L-1番茄红素及1.0μmol·L-1番... 目的研究番茄红素对香烟烟雾提取物致血管内皮细胞损伤的保护作用。方法将人脐周静脉血管内皮细胞(HUVEC)分为4组,对照组不做任何处理,其余3组分别使用10%香烟烟雾提取物(CSE)、10%CSE+1.0μmol·L-1番茄红素及1.0μmol·L-1番茄红素处理。MTT法分析各组细胞增殖情况,活性氧簇(ROS)检测试剂盒检测各组细胞内ROS水平,流式细胞仪分析各组细胞周期和凋亡率,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot技术分析各组细胞沉默信息调节蛋白1(SIRT1)表达水平。结果 10%CSE组、10%CSE+1.0μmol·L-1番茄红素组、1.0μmol·L-1番茄红素组细胞存活率分别为(56.7±5.1)%,(75.6±7.1)%和(95.5±9.7)%。ROS检测发现,对照组、10%CSE组、10%CSE+1.0μmol·L-1番茄红素组和1.0μmol·L-1番茄红素组相对荧光强度分别为25.3±3.9,67.3±4.6,45.3±3.9,20.8±2.9。10%CSE可引起细胞发生G2期阻滞,番茄红素处理可以缓解此效果。对照组、10%CSE组、10%CSE+1.0μmol·L-1番茄红素组和1.0μmol·L-1番茄红素组凋亡率分别为(6.2±0.5)%,(30.8±4.3)%,(18.3±1.9)%,(7.6±0.4)%。qRT-PCR分析发现,与对照组比较,10%CSE组SIRT1 mRNA表达是其(0.51±0.03)倍,10%CSE+1.0μmol·L-1番茄红素组为(0.84±0.05)倍、1.0μmol·L-1番茄红素组为(1.31±0.08)倍。Western blot蛋白条带分析结果与qRT-PCR结果一致。结论番茄红素可以减轻CSE对HUVEC的损伤作用,其机制可能与番茄红素提高SIRT1表达有关。 展开更多
关键词 番茄红素 血管内皮细胞 人脐周静脉 香烟烟雾 沉默信息调节蛋白1
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