重症肌无力患者胸腺增生组织中11000条带的蛋白质组学分析 被引量：6

1

作者 李永丽 李立 +6 位作者 李静孟 朱利伟 崔新征 方华 杨鲲鹏 张清勇 高峰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第3期291-295,共5页

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺增生组织中相对分子质量为11000差异(异常)条带的蛋白质组成。方法:采用非还原性SDS-PAGE制备型电泳对11000条带进行筛选和富集;应用双向电泳得到蛋白质二维图谱,并对差异蛋白点进行质谱分析;应用免疫... 目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺增生组织中相对分子质量为11000差异(异常)条带的蛋白质组成。方法:采用非还原性SDS-PAGE制备型电泳对11000条带进行筛选和富集;应用双向电泳得到蛋白质二维图谱,并对差异蛋白点进行质谱分析;应用免疫组化法比较20例MG胸腺增生组织和10例正常对照组织中4.1R蛋白的表达水平。结果:MG患者胸腺增生组织中目标条带的阳性率为72.7%(8/11),该条带由(30±6)个蛋白点组成,质谱分析显示有16个高表达差异蛋白点,其中3个蛋白得到鉴定,分别为4.1R蛋白、自整合抑制因子1和胆碱乙酰转移酶。免疫组化结果显示,与正常对照组的(0.98±0.18)相比,MG患者胸腺增生组织中4.1R蛋白表达水平为(1.55±0.46)明显增高(t=3.054,P=0.016)。结论:MG胸腺增生组织11000条带由多个蛋白点构成,这些蛋白主要功能涉及细胞骨架的组成、细胞内信息传递和乙酰胆碱合成等。 展开更多

关键词 重症肌无力 蛋白质组学 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 双向电泳 4.1R蛋白

下载PDF 职称材料

重症肌无力患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶和烟碱型乙酰胆碱受体的表达 被引量：5

2

作者 关兵峰 崔新征 +4 位作者 方华 张迎娜 赵莹 张清勇 高峰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第3期299-302,共4页

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶(CHAT)和烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的表达。方法:采用免疫组化方法检测胸腺增生(20例)、胸腺瘤(10例)、胸腺萎缩(10例)及10例正常胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达情况。结果:不... 目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶(CHAT)和烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的表达。方法:采用免疫组化方法检测胸腺增生(20例)、胸腺瘤(10例)、胸腺萎缩(10例)及10例正常胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达情况。结果:不同胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达差异有统计学意义(F=16.271,15.083,P<0.001)。与正常胸腺和胸腺萎缩组织相比,胸腺瘤和胸腺增生组织中CHAT蛋白的表达增高(P<0.05);胸腺瘤组织中nAChR蛋白表达低于胸腺增生组织(P<0.05);胸腺萎缩组织中nAChR蛋白的表达也低于正常对照组(P<0.05)。结论:胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白表达水平的改变可能是MG的发病机制之一。 展开更多

关键词 重症肌无力 胆碱乙酰转移酶 烟碱型胆碱能受体 胸腺

下载PDF 职称材料

新的重症肌无力外科临床分型和分期的应用 被引量：4

3

作者 崔新征 李立 +3 位作者 杨鲲鹏 吉庆春 兰红 张清勇 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第3期303-305,共3页

目的:总结作者提出的新的重症肌无力(MG)临床分型和分期方法在外科治疗中的应用价值。方法:收集1998年1月至2007年12月收治的410例MG患者的病历资料,分3组,分别按作者提出的临床分型和分期方法(观察组,280例)、Osserman分型(对照1组,60... 目的:总结作者提出的新的重症肌无力(MG)临床分型和分期方法在外科治疗中的应用价值。方法:收集1998年1月至2007年12月收治的410例MG患者的病历资料,分3组,分别按作者提出的临床分型和分期方法(观察组,280例)、Osserman分型(对照1组,60例)和美国重症肌无力协会临床分型(对照2组,70例)进行术前分型,按所选分型方法指导手术适应证及时机的选择,均行胸腺(瘤)切除并前纵隔脂肪清扫术,比较术后肌无力危象的发生率以及手术死亡率,比较发生肌无力危象患者的术前分型和分期。结果:观察组术后危象的发生率为8.6%,对照1组为20.0%,对照2组为18.6%,与对照1、2组比较,观察组术后危象发生率明显降低(χ2=6.817和5.923,P均<0.05)。观察组发作/进展期患者肌无力危象发生率为23.2%(22/95),远高于稳定/缓解期的1.1%(2/185),差异有统计学意义(χ2=39.037,P<0.001)。3组患者手术死亡率均为0。结论:作者提出的MG临床分型和分期方法可指导手术适应证及时机的选择,有效降低术后肌无力危象的发生率。 展开更多

关键词 重症肌无力 临床分型 临床分期

下载PDF 职称材料

重症肌无力患者胸腺组织核胞浆转运蛋白α-5的表达研究 被引量：2

4

作者 高峰 赵国强 +6 位作者 赵明理 郭亮 方华 王玉玲 张建立 张清勇 曹开源 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期543-546,共4页

目的探讨核胞浆转运蛋白α-5(karyopherin alpha-5,KPNA5)在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者胸腺组织中的表达情况。方法分别利用荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)和免疫组化... 目的探讨核胞浆转运蛋白α-5(karyopherin alpha-5,KPNA5)在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者胸腺组织中的表达情况。方法分别利用荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)和免疫组化染色方法,检测MG组20例患者与对照组10名受试者胸腺组织中KPNA 5 mRNA和蛋白分子的表达。结果MG组和对照组胸腺组织中,KPNA 5 mRNA的表达水平分别为(0.71±0.08)和(0.57±0.02),两者之间的差异有统计学意义(P<0.05);KPNA 5蛋白阳性细胞均数分别为(8.99±0.49)和(5.88±0.69),差异有统计学意义(P<0.05)。结论KPNA 5分子在MG胸腺组织中表达增高,可能参与了MG的发生,是MG相关基因。 展开更多

关键词 重症肌无力 核胞浆转运蛋白α-5 荧光定量聚合酶链反应

下载PDF 职称材料

横断胸骨第二肋间小切口胸腺切除治疗重症肌无力引流管位置的对比研究 被引量：3

5

作者 崔新征 张清勇 +2 位作者 杨鲲鹏 吉庆春 宋宣克 《中国实用神经疾病杂志》 2012年第7期17-18,共2页

目的探讨横断胸骨第二肋间小切口胸腺切除术治疗重症肌无力不同位置置引流管的优缺点。方法 195例行胸腺切除术的MG患者,其中67例在两侧纵隔胸膜完整的情况下施行横断胸骨第二肋间小切口旁置纵隔引流管,88例纵隔胸膜破裂口较大者施行单... 目的探讨横断胸骨第二肋间小切口胸腺切除术治疗重症肌无力不同位置置引流管的优缺点。方法 195例行胸腺切除术的MG患者,其中67例在两侧纵隔胸膜完整的情况下施行横断胸骨第二肋间小切口旁置纵隔引流管,88例纵隔胸膜破裂口较大者施行单侧腋中线第七肋间置胸腔引流管及40例两侧纵隔胸膜完整者施行剑突下置纵隔引流管。结果手术时间42～100(72.5±17.6)min,术后引流30～140(89.8±30.6)mL,48h内全部拔引流管,术后摄胸片未见明显胸腔积液或纵隔积液。切口Ⅰ/甲级愈合。术后随访1～12个月,胸骨愈合均满意,无"鸡胸"等畸形。结论施行横断胸骨第二肋间小切口旁置纵隔引流管手术操作简便、安全、创伤小,值得临床推广。 展开更多

关键词 胸腺切除术 重症肌无力 手术方法 引流管

下载PDF 职称材料

重症肌无力患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库的构建及分析 被引量：1

6

作者 杨俊红 崔新征 +4 位作者 方华 关兵峰 赵国强 张清勇 高峰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第3期295-299,共5页

目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因。方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列... 目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因。方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列分析。应用实时荧光定量PCR检测20例MG患者、10例正常对照胸腺组织中GSTM3和KPNA5 mRNA的表达。结果:共获得125个阳性克隆;Blast同源性检索共得到27个差异表达基因;MG患者GSTM3、KPNA5基因表达量(0.671±0.097和0.712±0.080)高于正常对照胸腺(0.582±0.047和0.571±0.018),差异有统计学意义(tGSTM3=5.458,P<0.001;tKPNA5=2.755,P=0.010),与消减文库结果一致。结论:成功建立了MG胸腺组织抑制性消减cDNA文库。 展开更多

关键词 抑制性消减 重症肌无力 差异基因 CDNA文库 胸腺

下载PDF 职称材料

重症肌无力患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达

7

作者 高峰 李立 +5 位作者 张俊杰 方华 刘素娜 杜英 关兵峰 张清勇 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第3期287-291,共5页

目的:检测重症肌无力(MG)患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达。方法:以正常胸腺组织为对照,采用RT-PCR法检测胸腺增生(14例)、胸腺萎缩(5例)和胸腺瘤(6例)组织中B7-H1mRNA的表达,流式细胞仪分析胸腺组织中B7-H1蛋白的表达情况,免疫组... 目的:检测重症肌无力(MG)患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达。方法:以正常胸腺组织为对照,采用RT-PCR法检测胸腺增生(14例)、胸腺萎缩(5例)和胸腺瘤(6例)组织中B7-H1mRNA的表达,流式细胞仪分析胸腺组织中B7-H1蛋白的表达情况,免疫组化染色方法观察胸腺组织中B7-H1蛋白的分布。结果:不同类型胸腺组织中BH-H1mRNA和蛋白表达差异有统计学意义(FmRNA=5.152,P=0.005;F蛋白=116.049,P<0.001)。免疫组化染色结果显示,B7-H1蛋白阳性信号主要定位于胸腺组织的皮髓质交界处和髓质胸腺细胞膜上,胸腺增生组织中B7-H1蛋白阳性胸腺细胞数量较多,分布密集,信号强度高。结论:B7-H1mRNA和蛋白的高表达可能与MG胸腺组织异常增生有关。 展开更多

关键词 B7-H1 胸腺组织 重症肌无力

下载PDF 职称材料

重症肌无力患者胸腺Fas基因突变及氨基酸变异分析 被引量：1

8

作者 杜英 张清勇 +3 位作者 赵国强 何炜 阮丽荣 张国荣 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第4期572-575,共4页

目的 :分析重症肌无力 (MG)患者胸腺Fas基因突变及其编码蛋白质的氨基酸变异 ,探讨Fas分子在重症肌无力发生中的作用。方法 :提取 8例MG患者胸腺总RNA ,经RT PCR法扩增出Fas基因全长 ,克隆后用荧光标记法进行基因测序 ,用DNASIS、OMIGA... 目的 :分析重症肌无力 (MG)患者胸腺Fas基因突变及其编码蛋白质的氨基酸变异 ,探讨Fas分子在重症肌无力发生中的作用。方法 :提取 8例MG患者胸腺总RNA ,经RT PCR法扩增出Fas基因全长 ,克隆后用荧光标记法进行基因测序 ,用DNASIS、OMIGA软件与Genbank中Fas序列进行同源性比较和分析。结果 :8例患者胸腺组织 6例出现Fas基因突变 ,突变率为 75 % (6 /8) ,其中 5例发生 2个以上位点突变 ,只有 1个位点突变的 1例 (1 2 .5 % ,1 /8) ;突变类型为 1 6 4位A→G ,相应的氨基酸变异为 5 5位Asp→Gly,96位His Arg,1 92位Arg→Lys和 2 5 1位Lys→Arg。Fas基因高度保守 ,患者之间同源性为 99.6 %～ 1 0 0 % ,Fas分子同源性为 98.7%～ 99.7%。结论 :重症肌无力患者胸腺组织中存在Fas基因突变和Fas分子结构变异 。 展开更多

关键词 重症肌无力 FAS基因 突变 同源性

下载PDF 职称材料

内分泌激素对重症肌无力患者胸腺细胞增殖、凋亡及Bcl-2表达的影响

9

作者 崔新征 张清勇 +3 位作者 高峰 杨鲲鹏 郭亮 李静孟 《中国综合临床》 北大核心 2008年第3期195-196,共2页

目的探讨重症肌无力（MG）的发病机制，为临床治疗提供一定的实验理论依据。方法将制备的MG患者胸腺细胞悬液分为对照组和实验组培养72h后，流式细胞术分析胸腺细胞Bcl-2分子的表达；MTT法测定细胞增殖、流式细胞术分析其凋亡的情况。... 目的探讨重症肌无力（MG）的发病机制，为临床治疗提供一定的实验理论依据。方法将制备的MG患者胸腺细胞悬液分为对照组和实验组培养72h后，流式细胞术分析胸腺细胞Bcl-2分子的表达；MTT法测定细胞增殖、流式细胞术分析其凋亡的情况。结果雌、孕激素培养组胸腺细胞Bcl-2的表达率比空白对照组显著降低（P〈0．05）；雌、孕激素对细胞的增殖有明显抑制作用（P〈0．05），诱导其凋亡。结论雌、孕激素抑制MG患者胸腺细胞Bcl-2的表达，而且抑制胸腺细胞的增殖，诱导其凋亡；提示体内雌激素、孕激素水平变化与MG患者病情变化有一定联系。 展开更多

关键词 重症肌无力 BEL-2 增殖 凋亡 胸腺细胞 雌激素 孕激素

原文传递

重症肌无力患者胸腺组织中P10、Bcl-2和FasmRNA的表达 被引量：4

10

作者 张清勇 赵国强 +1 位作者 杜英 张国荣 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第1期6-8,共3页

　　　目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中相关基因片段P10以及凋亡相关基因Bcl- 2和Fas的表达。方法: 利用RT PCR方法定量分析 21例MG患者胸腺及 20例正常胸腺组织中P10、Bcl- 2和FasmRNA的表达水平。结果 :MG胸腺组织中P10、Bcl 2... 　　　目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中相关基因片段P10以及凋亡相关基因Bcl- 2和Fas的表达。方法: 利用RT PCR方法定量分析 21例MG患者胸腺及 20例正常胸腺组织中P10、Bcl- 2和FasmRNA的表达水平。结果 :MG胸腺组织中P10、Bcl 2和FasmRNA表达水平明显高于正常胸腺组织(P<0. 05)。结论:P10、Bcl- 2和Fas基因在MG胸腺组织中的高表达与MG的发生发展有关。 展开更多

关键词 重症肌无力 胸腺 P10 BCL-2 FAS

下载PDF 职称材料

激素替代疗法对脑死亡后猪供体肺的影响 被引量：2

11

作者 孙子瑞 方华 +4 位作者 高峰 廖秋明 崔新征 杨鲲鹏 张清勇 《中国实用神经疾病杂志》 2011年第4期14-15,共2页

目的研究激素替代疗法对猪脑死亡后供体肺的保护作用。方法 20头瑞典健康家猪建立脑死亡模型,随机分为对照组和激素替代组(n=10)。采用ELISA方法检测脑死亡24 h后两组血清IL-1β水平;同时监测两组肺动脉灌流(Pulmonary Artery Flow,PAF... 目的研究激素替代疗法对猪脑死亡后供体肺的保护作用。方法 20头瑞典健康家猪建立脑死亡模型,随机分为对照组和激素替代组(n=10)。采用ELISA方法检测脑死亡24 h后两组血清IL-1β水平;同时监测两组肺动脉灌流(Pulmonary Artery Flow,PAF)及动脉血气(pH、PCO2、PO2)等肺功能指标。结果脑死亡后24 h对照组IL-1β含量为(1.64±0.30)pg/mL显著高于激素替代组(1.14±0.31)pg/mL(P<0.05),对照组PAF(1.14±0.43)L/min明显低于激素替代组(3.78±0.71)L/min(P<0.05);同时动脉血气分析显示24 h后激素替代组pH、PO2、PCO2明显优于对照组(P<0.05)。结论 (1)在脑死亡24 h后激素替代疗法可以减少血清IL-1β的分泌,减轻肺损伤。(2)激素替代疗法对脑死亡后供体肺功能有一定的保护功能。 展开更多

关键词 肺移植 脑死亡 肺供体 IL-1Β

下载PDF 职称材料

重症肌无力伴胸腺瘤患者胸腺组织蛋白4.1R mRNA的表达研究

12

作者 朱利伟 高峰 +3 位作者 方华 崔新征 杨鲲鹏 张清勇 《中国实用神经疾病杂志》 2010年第7期6-8,共3页

目的探讨蛋白4.1R在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)伴胸腺瘤患者胸腺组织中的表达情况。方法运用半定量RT-PCR方法检测7例胸腺瘤MG与7例正常对照组胸腺组织中蛋白4.1R的表达。结果胸腺瘤MG组胸腺组织中蛋白4.1R mRNA的相对表达水平为... 目的探讨蛋白4.1R在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)伴胸腺瘤患者胸腺组织中的表达情况。方法运用半定量RT-PCR方法检测7例胸腺瘤MG与7例正常对照组胸腺组织中蛋白4.1R的表达。结果胸腺瘤MG组胸腺组织中蛋白4.1R mRNA的相对表达水平为0.84±0.46,与对照组0.43±3.69相比明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论蛋白4.1R在胸腺瘤MG患者胸腺组织中mRNA水平表达异常,可能干扰胸腺细胞的信号传导,从而影响胸腺细胞的增殖和活化,参与了MG的发生。 展开更多

关键词 重症肌无力 蛋白4.1R RT-PCR 胸腺瘤

下载PDF 职称材料