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凋亡诱导因子介导TAp63γ诱导的人食管鳞癌细胞株EC9706细胞凋亡 被引量：1
1
作者 范天黎 郝义彬 +3 位作者 许培荣 侯桂琴 姜国忠 杨观瑞 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期384-389,共6页
目的探讨TAp63γ诱导的人食管鳞癌细胞株EC9706细胞凋亡的分子机制。方法用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测食鳞癌EC9706细胞中凋亡诱导因子(AIF)和p63的表达;将质粒pcDNA3.1-TAAp63γ转入EC9706细胞,流式细胞仪检测凋亡... 目的探讨TAp63γ诱导的人食管鳞癌细胞株EC9706细胞凋亡的分子机制。方法用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测食鳞癌EC9706细胞中凋亡诱导因子(AIF)和p63的表达;将质粒pcDNA3.1-TAAp63γ转入EC9706细胞,流式细胞仪检测凋亡率,并用激光共聚焦显微镜和亚细胞器分离技术观察分析AIF的转化;采用RNA干扰技术下调AIF的蛋白表达水平,caspase广谱抑制剂zVAD.fmk预处理细胞,再用流式细胞仪分析EC9706细胞发达TAp63γ后调亡率的变化。结果EC9706细胞中AIF表达且定位在细胞质中,p63基因的表达亚型是ΔNp63,TAp63γ不表达;在pcDNA3.1-TAp63γ转染组和pcDNA3.1-p53转染组的细胞质及细胞核蛋白中分别检测到AIF,pc DNA3.1转染组的胞核蛋白无AIF信号;pcDNA3.1转染组、pcDNA3.1-TAp63γ转染组、AIF-siRNA干扰后再转染pcDNA3.1-TAp63γ组、zVAD.fmk处理后再转染pcDNA3.1-TAp63γ组和AIF-siRNA干扰联合zVAD.fmk处理后再转染pcDNA3.1-TAp63γ的凋亡率分别为1.37%、13.64%、4.52%、4.03%和1.91%。结论TAp63γ在诱导EC9706细胞凋亡的过程中,AIF从线粒体释放入胞质并转位到细胞核内;下调AIF的蛋白表达水平可降低TAp63γ诱导的细胞凋亡;TAp63γ诱导的细胞凋亡依赖于AIF和caspase。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 鳞状细胞 细胞凋亡 RNA干扰 细胞系 肿瘤
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