医学基础综合实验技术教学现状与对策 被引量：6

1

作者 刘云 李三华 +1 位作者 姜念 喻昌燕 《基础医学教育》 2018年第11期991-993,共3页

培养一名适应科研需求的医、药类硕士研究生是医学院校的重要任务。医学基础综合实验技术是研究生学习阶段的重要课程。为了培养具有一定科研素养的研究生,以医学基础综合实验技术课程教学为例,分析了研究生的学习现状,并从优化教学内... 培养一名适应科研需求的医、药类硕士研究生是医学院校的重要任务。医学基础综合实验技术是研究生学习阶段的重要课程。为了培养具有一定科研素养的研究生,以医学基础综合实验技术课程教学为例,分析了研究生的学习现状,并从优化教学内容、加强师资队伍建设、丰富教学手段、建立合理评价体系等方面探讨如何以学生为主体,通过教学改革激发学生的学习主动性和创造性。 展开更多

关键词 医学基础综合实验技术 研究生教学 教学改革

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问题驱动在生物化学教学中的应用探讨 被引量：5

2

作者 刘云 朱欣婷 《基础医学教育》 2017年第3期176-178,共3页

生物化学是医学院校医、药学类本科专业学生必须学习的基础课程,其教学内容多、理解抽象、知识更新快。为了激发学生的学习兴趣,增强学习能力,让学生的课堂角色从"被动"变成"主动",从"跟学"变为"会... 生物化学是医学院校医、药学类本科专业学生必须学习的基础课程,其教学内容多、理解抽象、知识更新快。为了激发学生的学习兴趣,增强学习能力,让学生的课堂角色从"被动"变成"主动",从"跟学"变为"会学",教师有必要改变传统的教学方式帮助学生快速有效地掌握基本知识点。以DNA的生物合成为例,探讨并总结了问题驱动教学在课堂上的实施情况及优势,这也能为教学工作的开展总结经验、提供思路。 展开更多

关键词 生物化学 问题驱动教学法 教学改革

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新闻资源在生物化学教学中的实践 被引量：3

3

作者 朱欣婷 范芳 +2 位作者 束波 徐先林 刘云 《基础医学教育》 2017年第12期950-952,共3页

在信息化迅猛发展的时代,通过电视、报刊、电脑、手机等讯息媒体随时随地都可接触海量资讯。教师通过挖掘资讯中与生物化学知识相关的新闻资源,就能极大地丰富课程资源。将真实事件、热点讨论或科技前沿为主题的新闻资源融入课堂教学,... 在信息化迅猛发展的时代,通过电视、报刊、电脑、手机等讯息媒体随时随地都可接触海量资讯。教师通过挖掘资讯中与生物化学知识相关的新闻资源,就能极大地丰富课程资源。将真实事件、热点讨论或科技前沿为主题的新闻资源融入课堂教学,可以促使学生从生物化学的角度去分析和解决问题,巩固理论知识,调动其学习积极性,使学习不止于课堂,将所学知识融于生活实例,彰显学习的现实意义。 展开更多

关键词 生物化学 教学实践 新闻资源

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青风藤正丁醇萃取物对肝癌细胞增殖影响的研究 被引量：2

4

作者 雷欣睿 朱欣婷 +3 位作者 刘云 叶萌 王文洪 李晓飞 《贵州大学学报（自然科学版）》 2018年第2期54-58,共5页

为验证青风藤正丁醇萃取物(BESA)体外抗肝癌活性,研究了BESA对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721形态变化、细胞周期、细胞凋亡和细胞增殖的影响。结果显示BESA对HepG2、SMMC-7721肝癌细胞均有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为18.23μg/... 为验证青风藤正丁醇萃取物(BESA)体外抗肝癌活性,研究了BESA对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721形态变化、细胞周期、细胞凋亡和细胞增殖的影响。结果显示BESA对HepG2、SMMC-7721肝癌细胞均有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为18.23μg/m L,23.45μg/m L,且呈剂量效应关系;经BESA处理后,HepG2细胞形态变化很大,细胞出现核皱缩、贴壁性差、细胞裂解等现象,以20μg/m L的BESA处理HepG2细胞48 h后,流式细胞术检测到BESA对HepG2细胞周期的干预能力不强;但在诱发HepG2细胞发生凋亡方面效果明显,说明BESA能诱导HepG2细胞的凋亡达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。 展开更多

关键词 青风藤 人肝癌细胞HEPG2 人肝癌细胞SMMC-7721 抑制作用

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高等院校天然药物化学实验室安全管理策略 被引量：2

5

作者 孟令杰 李三华 刘云 《广东化工》 CAS 2018年第18期202-202,207,共2页

随着高校实验室的建设和发展高速增长,实验室安全显得尤为重要。本文针对高校天然药物化学实验室的特点,从完善实验室安全管理制度、加强入室工作人员的安全教育以及注重实验环节的安全规范三个方面进行了初步的探讨。

关键词 天然药物化学实验室 安全管理制度 安全教育 安全规范

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微RNA-21表达下调可抑制人结肠癌SW620细胞在裸鼠体内的生长 被引量：1

6

作者 丁涛 崔盼盼 +9 位作者 陶弋婧 郭萌萌 赵娟娟 贾力 王海嵘 周涯 陈超 秦娜琳 何志旭 徐林 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期117-125,共9页

目的 :探讨反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASOs)下调微RNA-21(micro RNA-21,mi R-21)表达对高侵袭性人结肠癌SW620细胞在裸鼠体内生长的影响。方法 :首先建立人结肠癌SW620细胞的裸鼠荷瘤模型,并于肿瘤局部分别注射p-mi R-21... 目的 :探讨反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASOs)下调微RNA-21(micro RNA-21,mi R-21)表达对高侵袭性人结肠癌SW620细胞在裸鼠体内生长的影响。方法 :首先建立人结肠癌SW620细胞的裸鼠荷瘤模型,并于肿瘤局部分别注射p-mi R-21-ASOs重组质粒或p-Cont对照质粒,然后观察裸鼠体内肿瘤的生长变化。末次注射5 d后,处死裸鼠,剥取肿瘤组织,测量各组肿瘤组织的大小和质量。采用HE染色法观察肿瘤组织形态学变化;TUNEL法检测肿瘤局部细胞凋亡情况;免疫组织荧光法检测肿瘤组织中增殖核抗原Ki-67蛋白的表达变化;实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中mi R-21成熟体的表达,以及细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)2、CDK3、CDK4和CDK6的表达变化;蛋白质印迹法检测磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-PKB,又称为p-Akt)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular regulated protein kinase,p-ERK)的表达水平。结果 :与p-Cont对照组相比,p-mi R-21-ASOs质粒转染组的肿瘤生长缓慢(P<0.05),剥离肿瘤的质量明显减少(P<0.01),肿瘤组织中可见大片坏死区域,而且肿瘤细胞中mi R-21成熟体的表达水平明显下调(P<0.01)。mi R-21表达下调后,肿瘤组织中Ki-67的表达量明显减少(P<0.01),而相对凋亡细胞数明显增多(P<0.05);并且,细胞周期相关分子CDK2、CDK3、CDK4和CDK6的表达均明显下调(P值均<0.001),Akt和ERK蛋白的磷酸化水平也均明显下调(P值均<0.05)。结论 :ASOs下调mi R-21表达可显著抑制人高侵袭性结肠癌细胞在裸鼠体内的生长,提示mi R-21可作为结肠癌基因治疗的一个潜在新靶标。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 微RNAS 细胞凋亡 异种移植模型抗肿瘤试验 小鼠 近交BALB/c

原文传递

近红外成像用于双向电泳前的蛋白质快速定量

7

作者 刘云 曹嵩 +4 位作者 李科 李三华 宋长伟 覃成 朱欣婷 《分析科学学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期541-544,共4页

双向电泳(Two-dimensional Electrophoresis,2D)是蛋白质组学研究过程中的常用技术,而蛋白质样品的准确定量是做好双向电泳的前提条件。由于双向电泳的蛋白质样品在定量时存在试剂兼容性的问题,故需使用GE或Bio-rad公司研发的双向电泳... 双向电泳(Two-dimensional Electrophoresis,2D)是蛋白质组学研究过程中的常用技术,而蛋白质样品的准确定量是做好双向电泳的前提条件。由于双向电泳的蛋白质样品在定量时存在试剂兼容性的问题,故需使用GE或Bio-rad公司研发的双向电泳专用蛋白质定量试剂盒,但此类试剂盒价格高昂且操作繁琐,因此亟待开发一种快速、准确、成本低廉的蛋白质定量方法。通过研究发现,蛋白质溶液与考马斯亮蓝-G250混合后,在近红外荧光成像系统680nm波长下可以被激发出荧光,且当蛋白质浓度在0.01~0.2mg·mL^(-1)范围内时,其荧光强度与蛋白质浓度具有很好的线性关系。基于此特点,建立了一种以96孔板为载体,利用近红外成像技术对蛋白质样品进行定量的方法,该方法可用于双向电泳前蛋白质样品的快速定量。 展开更多

关键词 蛋白质定量 近红外成像 考马斯亮蓝 双向电泳

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3种斑蝥素碱土金属盐类衍生物对HepG2人肝癌细胞生长的抑制作用 被引量：1

8

作者 惠景 李晓飞 +4 位作者 朱欣婷 姜胜男 晏容 范芳 刘云 《遵义医学院学报》 2016年第6期568-572,共5页

目的比较3种斑蝥素碱土金属盐类衍生物对人肝癌细胞HepG2的抑制增殖及促凋亡作用。方法采用3种斑蝥素盐类衍生物分别对体外培养的肝癌细胞HepG2进行干预,磺酰罗丹明染色法(SRB法)检测细胞增殖抑制作用;相差显微镜结合Hoechst33342染色... 目的比较3种斑蝥素碱土金属盐类衍生物对人肝癌细胞HepG2的抑制增殖及促凋亡作用。方法采用3种斑蝥素盐类衍生物分别对体外培养的肝癌细胞HepG2进行干预,磺酰罗丹明染色法(SRB法)检测细胞增殖抑制作用;相差显微镜结合Hoechst33342染色观察细胞形态学变化;流式细胞技术检测细胞凋亡。结果 3种斑蝥素盐类衍生物均呈浓度依赖性抑制人肝癌细胞HepG2的生长,尤以斑蝥素酸镁的抑制效应最强(P<0.05);斑蝥素酸镁对人肝癌细胞HepG2的形态影响比斑蝥素酸钙和斑蝥素酸锶明显;Hoechst 33342染色显示斑蝥素酸镁致HepG2细胞出现凋亡细胞形态特征比斑蝥素酸钙和斑蝥素酸锶明显;流式细胞术检测结果表明,同一浓度3μg/mL的斑蝥素酸镁的促进凋亡作用明显高于斑蝥素酸钙和斑蝥素酸锶(P<0.05)。结论 3种斑蝥素盐类衍生物均具有抑制人肝癌细胞HepG2增殖并促其凋亡的作用,但斑蝥素酸镁的作用明显强于斑蝥素酸钙和斑蝥素酸锶。 展开更多

关键词 斑蝥素酸镁 斑蝥素酸钙 斑蝥素酸锶 人肝癌细胞HEPG2 抗肿瘤

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三种斑蝥素金属衍生物对肝癌细胞SMMC-7721增殖抑制比较

9

作者 朱欣婷 惠景 +4 位作者 刘云 范芳 晏容 雷欣睿 李晓飞 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1230-1237,共8页

比较镁(Mg)、钙(Ca)、锶(Sr)三种金属元素与斑蝥素结合后对其体外抗肝癌活性的影响。以人肝癌细胞SMMC-7721为实验细胞株,采用SRB法检测细胞增殖抑制率,平板集落形成实验检测细胞的集落形成能力,Hoechst 33342染色法观察细胞核形态变化... 比较镁(Mg)、钙(Ca)、锶(Sr)三种金属元素与斑蝥素结合后对其体外抗肝癌活性的影响。以人肝癌细胞SMMC-7721为实验细胞株,采用SRB法检测细胞增殖抑制率,平板集落形成实验检测细胞的集落形成能力,Hoechst 33342染色法观察细胞核形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的情况。三种金属元素结合斑蝥素(CTD)后都能抑制细胞的增殖,且成剂量依赖关系。CTD抑制细胞增殖的活性仍强于斑蝥素酸钙(CaCTD)和斑蝥素酸锶(Sr-CTD),但明显弱于斑蝥素酸镁(Mg-CTD)。当给药浓度为0. 7μg/m L时,Mg-CTD组无细胞集落的形成,且抑制细胞集落形成的能力强于CTD组。而Ca-CTD和Sr-CTD抑制细胞集落形成作用无统计学意义。三种斑蝥素金属衍生物中,Mg-CTD引起细胞凋亡最多,其细胞凋亡率为11. 1%,且强于CTD阳性对照组。此外,CTD、Mg-CTD和Ca-CTD可以引起细胞G2/M期阻滞,其阻滞能力由强到弱的顺序为:Mg-CTD、CTD、Ca-CTD;而Sr-CTD对细胞G_2/M期的阻滞能力不明显。镁、钙、锶三种元素对斑蝥素体外抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响差异很大,镁元素与斑蝥素结合后在体外能增强斑蝥素的抗肝癌活性,而钙和锶元素则降低其抗肝癌活性。 展开更多

关键词 斑蝥素 金属衍生物 人肝癌SMMC-7721细胞

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壳聚糖-磺酸甜菜碱对人肝癌HepG-2细胞的siRNA递送实验研究

10

作者 董伟 李大玉 +5 位作者 惠景 范芳 李长福 姜念 刘云 朱欣婷 《遵义医学院学报》 2017年第1期42-48,共7页

目的设计合成新型高分子材料壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物,并考察该材料与siRNA复凝后对人肝癌HepG-2细胞的转染能力。方法采取Michael加成法将含C=C双键的磺酸甜菜碱化合物(DMAAPS)与壳聚糖(CS)偶联接枝;利用核磁共振氢谱进行... 目的设计合成新型高分子材料壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物,并考察该材料与siRNA复凝后对人肝癌HepG-2细胞的转染能力。方法采取Michael加成法将含C=C双键的磺酸甜菜碱化合物(DMAAPS)与壳聚糖(CS)偶联接枝;利用核磁共振氢谱进行结构表征;CCK-8检测材料的细胞相容性;荧光显微镜观察siRNA的转染效率;Real-time PCR检测转染siRNA后对Bcl-2 mRNA的沉默效率。结果核磁共振氢谱数据表明:DMAAPS已成功枝接到CS上。荧光显微镜观察结果显示:质量比(m0/mt:CS-DMAAPS/siRNA)为32、16、8、4、2的复合颗粒分别转染人肝癌HepG-2细胞24 h后,转染率分别为33.78%、45.82%、50.98%、69.89%、81.22%。Real-time PCR检测结果显示:质量比为4的CS-DMAAPS/siRNA复合颗粒转染人肝癌HepG-2细胞48 h后,对人肝癌HepG-2细胞的Bcl-2基因沉默效率为26.8%。结论壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物能实现siRNA对人肝癌HepG-2细胞的转染,且细胞相容性良好,能实现目标基因的部分沉默。 展开更多

关键词 壳聚糖 磺酸甜菜碱化合物 复合颗粒 人肝癌HEPG-2细胞 SIRNA

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化学与健康教学改革初步探讨 被引量：4

11

作者 孟令杰 刘云 《广州化工》 CAS 2018年第18期148-149,153,共3页

作为一门基础学科,化学与其他学科不断交叉渗透,产生了很多交叉学科,化学与健康便是从中衍生而来,其目的在于从化学视角来探讨化学与人类健康之间的关系。作为地方高校开设的公共选修课,化学与健康有助于学生较系统地了解化学与人们日... 作为一门基础学科,化学与其他学科不断交叉渗透,产生了很多交叉学科,化学与健康便是从中衍生而来,其目的在于从化学视角来探讨化学与人类健康之间的关系。作为地方高校开设的公共选修课,化学与健康有助于学生较系统地了解化学与人们日常生活的联系。本文针对化学与健康课程的特点,从丰富教学内容、增加案例分析以及优化考核方式三个方面对该课程的改革方式进行了初步的探讨。 展开更多

关键词 化学与健康 教学内容 案例分析 考核方式

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斑蝥素酸镁阻断MAPK信号通路抑制SMMC-7721人肝癌细胞增殖 被引量：11

12

作者 刘云 李晓飞 +5 位作者 邹倩倩 刘流 朱欣婷 贾启 王灵军 晏容 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期347-351,共5页

目的观察斑蝥素酸镁对SMMC-7721肝癌细胞丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,探讨斑蝥素酸镁的抗癌机制。方法使用蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性检测试剂盒分别检测斑蝥素酸镁和冈田酸(OA)对PP2A活性的影响。实时定量PCR检测斑蝥素酸镁... 目的观察斑蝥素酸镁对SMMC-7721肝癌细胞丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,探讨斑蝥素酸镁的抗癌机制。方法使用蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性检测试剂盒分别检测斑蝥素酸镁和冈田酸(OA)对PP2A活性的影响。实时定量PCR检测斑蝥素酸镁、OA对SMMC-7721人肝癌细胞胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p38MAPK、c-Jun N末端激酶1/2(JNK1/2)mRNA表达水平的影响;Western blot法检测斑蝥素酸镁、OA对SMMC-7721细胞ERK1/2、p38MAPK、JNK蛋白表达以及蛋白磷酸化水平的影响。结果 0.283μmol/L斑蝥素酸镁对PP2A活性无明显抑制作用,0.567μmol/L斑蝥素酸镁能显著抑制PP2A活性,且随着药物浓度的增加,抑制作用愈趋明显;同时0.059 nmol/L OA对PP2A活性也有显著抑制作用。与空白对照组比较,0.283μmol/L斑蝥素酸镁组ERK1、ERK2 mRNA表达量无明显变化,当浓度为0.567μmol/L时,ERK1、ERK2mRNA表达量显著下降,且随着药物浓度的增加下降更明显;而0.059 nmol/L OA组ERK1、ERK2 mRNA表达量却显著升高。0.059 nmol/L OA和不同浓度斑蝥素酸镁组的p38MAPK、JNK1、JNK2 mRNA表达量均显著升高。与空白对照组比较,0.283μmol/L斑蝥素酸镁组ERK1/2磷酸化水平无明显变化,高于0.567μmol/L斑蝥素酸镁处理显著下调ERK1/2磷酸化水平,其下调程度具有浓度依赖效应;而0.059 nmol/L OA组ERK1/2磷酸化水平却显著上调。0.059 nmol/L OA和不同浓度斑蝥素酸镁组的p38MAPK、JNK磷酸化水平均显著上调。结论斑蝥素酸镁可能是通过抑制PP2A活性进而抑制ERK1/2通路来实现对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用。 展开更多

关键词 斑蝥素酸镁 蛋白磷酸酶2A(PP2A) 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK) SMMC-7721肝癌细胞

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六神丸和砷化合物对人肝癌Hep3B细胞增殖的影响 被引量：3

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作者 梁世霞 刘正芸 +5 位作者 余丽梅 刘云 郭静 贾智诚 拓军雄 刘杰 《遵义医学院学报》 2016年第6期558-562,共5页

目的中药六神丸(LSW)含雄黄(As_4S_4)。近年研究表明砷化合物对血液肿瘤有显著的抑制作用,但其对实体瘤的作用报道少。故我们就六神丸和砷化合物[Na_2HAsO_4(As^(5+))、NaAsO_2(As^(3+))、As_2O_3、As_4S_4和As_2S_2]对人肝癌Hep3B细胞... 目的中药六神丸(LSW)含雄黄(As_4S_4)。近年研究表明砷化合物对血液肿瘤有显著的抑制作用,但其对实体瘤的作用报道少。故我们就六神丸和砷化合物[Na_2HAsO_4(As^(5+))、NaAsO_2(As^(3+))、As_2O_3、As_4S_4和As_2S_2]对人肝癌Hep3B细胞的抗肿瘤作用进行了研究。方法采用MTS法检测六神丸、雄黄及其他含砷化合物对人肝癌Hep3B细胞的杀灭作用,通过原子吸收光谱测定各砷化合物中砷(As)的溶出度;流式细胞仪检测药物对细胞周期和细胞凋亡的影响;荧光定量PCR检测相关基因的表达。结果六神丸中As的溶出度高于雄黄和As_2S_2,但低于亚砷酸钠(As^(3+))、砷酸钠(As^(5+))和As_2O_3。六神丸对Hep3B有较好的抑制增殖和杀灭作用其作用仅次于亚砷酸钠。六神丸可诱导Hep3B细胞凋亡,作用机制与降低Bcl-2及Bcl-w的表达有关,并降低ABCG2、VEGF(血管内皮生长因子)和肿瘤转移相关基因MMP-9的表达。但六神丸对细胞周期无明显影响。结论六神丸通过多途径对肝癌Hep3B细胞具有明显的抗增殖作用。 展开更多

关键词 六神丸 抗肿瘤 HEP3B细胞 砷化合物 凋亡

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半乳糖基化壳聚糖-聚乙烯亚胺递送siRNA对肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中MRE11表达的影响 被引量：2

14

作者 刘云 潘杰 +4 位作者 董伟 惠景 李三华 范芳 朱欣婷 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第6期934-939,共6页

背景:壳聚糖是一种常用的非病毒载体,具有良好生物相容性、生物可降解性、低毒等优点,但其基因递送能力相对较弱,常需要进行结构衍生修饰。目的:观察半乳糖基化壳聚糖-聚乙烯亚胺(LA-CS-PEI)在肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中递送si RNA的... 背景:壳聚糖是一种常用的非病毒载体,具有良好生物相容性、生物可降解性、低毒等优点,但其基因递送能力相对较弱,常需要进行结构衍生修饰。目的:观察半乳糖基化壳聚糖-聚乙烯亚胺(LA-CS-PEI)在肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中递送si RNA的能力及对减数分裂重组蛋白11(MRE11)表达的影响。方法:1将肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu或人肝细胞HL-7702分别与0,10,20,40,80,100 mg/L的LA-CS-PEI或壳聚糖-聚乙烯亚胺共培养24 h,检测细胞存活率;2将LA-CS-PEI与si RNA-FAM分别以0,2,4,8,16,32的质量比混合,制备复合转染颗粒。以复合转染颗粒转染肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu,48,72,96 h后,以转染效率筛选最佳质量比与转染时间,进行下步实验;3以复合转染颗粒、LA-CS-PEI、si RNA分别转染肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu 48 h后,以未转染的细胞为空白对照,检测MRE11基因及蛋白的表达。结果与结论:1与壳聚糖-聚乙烯亚胺相比,LA-CS-PEI毒性更低,且当LA-CS-PEI质量浓度高达100 mg/L时,仍表现出很低的细胞毒性;2LA-CS-PEI与si RNA-FAM质量比为4和8时转染效率均达95%以上,入胞效率极高,转染48 h转染效果最好,所以后续实验选择质量比为8,转染时间为48 h的复合转染颗粒;3复合转染颗粒组MRE11基因及蛋白表达低于LA-CS-PEI组、si RNA组、空白对照组(P<0.05);4结果表明,LA-CS-PEI能实现si RNA的有效递送,并能沉默肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中的MRE11基因。 展开更多

关键词 壳聚糖 转染 基因沉默 聚乙烯亚胺 组织工程 生物材料 材料相容性 半乳糖基化壳聚糖-聚乙烯亚胺 去唾液酸糖蛋白受体 减数分裂重组蛋白11 RNA干扰 肝癌细胞BEL7402/5-Fu

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遵义朝天椒的化学成分研究 被引量：2

15

作者 宋长伟 覃成 +4 位作者 李三华 孟令杰 姜念 喻昌燕 刘云 《云南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2018年第6期451-454,共4页

采用硅胶、凝胶及中高压反相色谱等多种分离方法,从遵义朝天椒乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到了9个化合物,经核磁共振、质谱等波谱方法分别鉴定出其结构为:capsaicin(1),dihydrocapsaicin(2),acetovanillone(3),(-)-epiloliolide... 采用硅胶、凝胶及中高压反相色谱等多种分离方法,从遵义朝天椒乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到了9个化合物,经核磁共振、质谱等波谱方法分别鉴定出其结构为:capsaicin(1),dihydrocapsaicin(2),acetovanillone(3),(-)-epiloliolide(4),(+) dehydrovomifoliol(5),Ferulic acid(6),vanillin(7),acetosyringone(8),2-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-1-propanol (9).其中化合物9首次从该植物中分离获得. 展开更多

关键词 CapsicumannuumL. 遵义朝天椒 分离纯化 结构鉴定

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斑蝥素酸镁诱导BEL-7402人肝癌细胞凋亡的机制 被引量：2

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作者 黄渝茜 晏旭航 +7 位作者 晏容 刘云 杨明洁 陈威天 古宸廷 李埝 罗明星 李晓飞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1419-1423,共5页

目的探讨斑蝥素酸镁诱导BEL-7402人肝癌细胞凋亡的机制。方法磺酰罗丹明B(SRB)染色法检测不同浓度(1.668、3.336、5.004、6.672μmol/L)斑蝥素酸镁对BEL-7402人肝癌细胞增殖的抑制作用,将细胞随机分为空白对照组、斑蝥素酸镁组(2.43、4... 目的探讨斑蝥素酸镁诱导BEL-7402人肝癌细胞凋亡的机制。方法磺酰罗丹明B(SRB)染色法检测不同浓度(1.668、3.336、5.004、6.672μmol/L)斑蝥素酸镁对BEL-7402人肝癌细胞增殖的抑制作用,将细胞随机分为空白对照组、斑蝥素酸镁组(2.43、4.86、9.72μmol/L)、冈田酸组(0.072 nmol/L)。作用24 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧(ROS)、线粒体膜电位变化,Western blot检测细胞色素c、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、ERK1/2蛋白磷酸化表达。结果斑蝥素酸镁能明显抑制BEL-7402人肝癌细胞的增殖,呈剂量-效应关系,其IC50为4.86μmol/L;与对照组比较,斑蝥素酸镁组凋亡率、细胞内活性氧(ROS)水平、Cyt-C、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.01),线粒体膜电位、ERK1/2蛋白磷酸化表达显著降低(P<0.01)。结论斑蝥素酸镁可能通过抑制ERK1/2磷酸化水平来反向调节线粒体凋亡途径,最终诱导BEL-7402人肝癌细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 斑蝥素酸镁 BEL-7402人肝癌细胞 凋亡 ERK1/2 线粒体

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基因沉默LMTK3对甲状腺乳头状癌细胞株BCPAP恶性生物学行为的影响 被引量：1

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作者 泮红飞 冯继红 +6 位作者 杨涛羽 苏俊 刘芊伊 刘旭恒 龙润莹 殷茜 罗军敏 《遵义医学院学报》 2018年第3期282-287,292,共7页

目的探讨基因沉默LMTK3对人甲状腺乳头状癌细胞株BCPAP增殖、迁移、侵袭和凋亡等恶性生物学行为的影响。方法用携带sh LMTK3的重组慢病毒载体(LV-sh LMTK3-1、LV-sh LMTK3-2和LV-sh LMTK3-3)分别感染人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞株,作为... 目的探讨基因沉默LMTK3对人甲状腺乳头状癌细胞株BCPAP增殖、迁移、侵袭和凋亡等恶性生物学行为的影响。方法用携带sh LMTK3的重组慢病毒载体(LV-sh LMTK3-1、LV-sh LMTK3-2和LV-sh LMTK3-3)分别感染人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞株,作为实验组(LV-sh LMTK3组);以对照慢病毒载体(LV-Control)感染人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞株,作为阴性对照组(LV-Control组);空白对照组(Control组)细胞常规培养,不作任何处理。用Western Blot检测各组细胞中LMTK3蛋白的表达;CCK8实验检测细胞增殖能力的变化;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化;流式细胞术检测各组细胞的凋亡能力。结果 Western blot方法显示LV-sh LMTK3组中LMTK3蛋白的表达较阴性对照组显著降低(P<0.01);CCK8实验显示基因沉默LMTK3显著抑制BCPAP细胞的增殖(P<0.001);Transwell实验结果显示,与LV-Control组相比,LV-sh LMTK3组细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(均为P<0.01),流式细胞术显示基因沉默LMTK3明显促进细胞的凋亡(P<0.01)。结论基因沉默LMTK3可显著抑制BCPAP细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进其凋亡。 展开更多

关键词 LMTK3 甲状腺乳头状癌 慢病毒 增殖 侵袭迁移 凋亡

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内毒素耐受状态下胸腺细胞TCRβ链CDR3区多态性和长度的变化 被引量：1

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作者 贾力 陶弋婧 +8 位作者 赵娟娟 郭萌萌 陈超 褚风云 王海嵘 刘云 罗军敏 姚新生 徐林 《遵义医学院学报》 2017年第2期139-142,149,共5页

目的研究内毒素耐受状态下小鼠胸腺T细胞TCRβ链CDR3多态性和长度的变化,并探讨其意义。方法以5mg/kg浓度LPS腹腔注射C57BL/6小鼠建立内毒素耐受模型,5 mg/kg浓度生理盐水腹腔注射72 h后为对照组,提取对照组、模型后72 h实验组和8 d实... 目的研究内毒素耐受状态下小鼠胸腺T细胞TCRβ链CDR3多态性和长度的变化,并探讨其意义。方法以5mg/kg浓度LPS腹腔注射C57BL/6小鼠建立内毒素耐受模型,5 mg/kg浓度生理盐水腹腔注射72 h后为对照组,提取对照组、模型后72 h实验组和8 d实验组的小鼠胸腺组织RNA,并逆转录为c DNA;以22条TRBV基因家族序列设计上游引物,TRBJ1-1基因家族序列设计下游引物,PCR扩增出完整的TCRβ链CDR3区;毛细管电泳技术分析TCRβ链CDR3区的多态性和长度。结果正常小鼠胸腺样本多数呈现中间高两边低的正态性分布的TCRβ链CDR3谱型峰图,少数呈现偏峰、寡峰或低峰;LPS注射后72 h胸腺样本TCRβ链CDR3区呈现数量不等的偏峰、寡峰和低峰;模型8 d胸腺样本大多呈现多峰。此外,与正常组相比,模型72 h和8 d胸腺样本TCRβ链CDR3区产物长度均发生了不同程度的变化。结论内毒素耐受状态下,小鼠胸腺细胞TCRβ链CDR3区的多态性和长度均发生了明显改变,为后续进一步研究该状态下胸腺细胞发育及功能变化提供前期实验基础。 展开更多

关键词 内毒素 胸腺 TCRβ链CDR3区 小鼠

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微小RNA-7敲减对ConA诱导的小鼠急性肝损伤的影响 被引量：1

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作者 岳东旭 赵娟娟 +3 位作者 张忆雄 丁涛 陈慧子 徐林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1643-1647,共5页

目的:研究微小RNA-7(miR-7)敲减(KD)对急性肝损伤(ALI)模型小鼠的影响。方法:野生型(WT)小鼠和miR-7KD小鼠腹腔注射30 mg/kg刀豆蛋白(ConA)建立急性肝损伤模型;48 h后,观察小鼠肝脏的形态、重量及其脏器指数变化;HE染色观察小鼠肝脏组... 目的:研究微小RNA-7(miR-7)敲减(KD)对急性肝损伤(ALI)模型小鼠的影响。方法:野生型(WT)小鼠和miR-7KD小鼠腹腔注射30 mg/kg刀豆蛋白(ConA)建立急性肝损伤模型;48 h后,观察小鼠肝脏的形态、重量及其脏器指数变化;HE染色观察小鼠肝脏组织病理学变化;血清学方法检查血清中谷丙转氨酶(ALT)的水平;ELISA法检测血清中细胞因子IL-4和IFN-γ的水平;流式细胞术检测肝脏组织中CD4^+T细胞的比例及其相关的细胞因子IL-4和IFN-γ的表达变化。结果:与对照组相比,miR-7敲减后急性肝损伤小鼠的肝脏组织颜色变浅,重量减轻,重量指数明显增加(P<0.05);HE染色显示miR-7KD小鼠血清炎症细胞浸润显著增多;血清学方法检测发现急性肝损伤小鼠血清ALT的水平明显上升(P<0.05);ELISA法检测显示miR-7KD小鼠血清中IFN-γ水平明显升高(P<0.01),而IL-4的表达水平则明显降低(P<0.01);流式细胞术检测结果显示,miR-7KD小鼠肝脏中CD4+T细胞比例显著升高(P<0.01),其相关的细胞因子IFN-γ的表达水平也显著上调(P<0.01),而IL-4的水平没有发生明显变化。结论:敲减miR-7基因可明显促进ConA诱导的小鼠急性肝损伤。 展开更多

关键词 微小RNA-7 急性肝损伤 CD4^+T细胞

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微小RNA-126基因敲减对CD4^+T细胞体外功能的影响

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作者 褚风云 胡燕 +6 位作者 郭萌萌 李永菊 贾力 王海嵘 周涯 罗军敏 徐林 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期158-163,共6页

目的研究微小RNA-126(microRNA-126,miR-126)基因敲减(knock down,KD)后对CD4^+T细胞体外功能的影响并探讨其意义。方法 MACS分选miR-126 KD小鼠脾脏CD4^+CD62L^+T细胞,ConA刺激48h后,Real-time PCR技术检测细胞内miR-126成熟体表达水平... 目的研究微小RNA-126(microRNA-126,miR-126)基因敲减(knock down,KD)后对CD4^+T细胞体外功能的影响并探讨其意义。方法 MACS分选miR-126 KD小鼠脾脏CD4^+CD62L^+T细胞,ConA刺激48h后,Real-time PCR技术检测细胞内miR-126成熟体表达水平;FACS分别检测CD4^+T细胞表面活化分子CD69、CD62L、CD44和增殖相关分子Ki-67,以及细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17表达变化;Annexin V/PI双染色法检测CD4^+T细胞的凋亡情况。结果与野生型(wide-type,WT)小鼠相比,miR-126KD小鼠的CD4^+T细胞中miR-126成熟体表达显著下调(P<0.001);miR-126 KD小鼠CD4^+T细胞活化后CD62L的表达比例显著减少(P<0.01),而CD69、CD44的比例显著增加(P<0.05);同时Ki-67^+的比例也明显增加(P<0.05);此外,miR-126 KD小鼠CD4^+T细胞的INF-γ表达比例显著上调(P<0.001),IL-4的比例显著下调(P<0.01),而IL-17的比例没有明显变化(P>0.05);最后,CD4^+T细胞的凋亡比例显著减少(P<0.05)。结论 miR-126基因敲减后CD4^+T细胞的活化、增殖和相关细胞因子分泌均明显增强,为后续深入探讨miR-126在免疫应答中的作用及机制提供前期实验基础。 展开更多

关键词 微小RNA-126 CD4+T细胞 活化 增殖 凋亡

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