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鲤疱疹病毒2型微滴式数字PCR快速检测方法的建立 被引量：16
1
作者 郝中香 林华 +7 位作者 佘容 廖红 陈世界 杨苗 薛昌华 赵珊 韩国全 颜其贵 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期167-173,共7页
根据GenBank上登录的鲤疱疹病毒2型(cyprinid herpesvirus 2,Cy HV-2)ORF6基因序列(登录号:JQ815364.1)用Primer Express 3.0设计并合成ORF6基因特异性引物及Taq Man探针,建立了检测鲤疱疹病毒2型的微滴式数字PCR(dd PCR)方法。结果显示... 根据GenBank上登录的鲤疱疹病毒2型(cyprinid herpesvirus 2,Cy HV-2)ORF6基因序列(登录号:JQ815364.1)用Primer Express 3.0设计并合成ORF6基因特异性引物及Taq Man探针,建立了检测鲤疱疹病毒2型的微滴式数字PCR(dd PCR)方法。结果显示,dd PCR的检测灵敏度比qPCR高5倍。特异性和重复性检测结果表明,ddPCR和qPCR均具有良好的特异性和较高的重复性。qPCR和dd PCR标准曲线的r2值分别为0.999 2和0.997 5,表明ddPCR和qPCR均具有良好的线性关系。研究结果表明,该方法可以对CyHV-2进行可靠的检测,可以满足CyHV-2特性研究和感染诊断的需要。对60份临床样品的检测结果显示,在检出阳性的34份样品中,包含肾、脾、腮、肝、心和脑,表明该病毒在这些器官均有分布,其中肾的病毒含量相对最高,脑的病毒含量相对最低。总之,本研究建立的ddPCR方法灵敏度高、特异性强、能快速检测到极低含量的病毒,适用于CyHV-2的快速检测和病原流行病学调查。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒2型 微滴式数字PCR 检测
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鲤疱疹病毒2型ORF5截短基因的克隆表达及免疫原性研究 被引量：8
2
作者 廖红 林华 +9 位作者 郝中香 佘容 陈世界 杨苗 陈珍容 薛昌华 赵珊 韩国全 曹三杰 颜其贵 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1394-1400,共7页
根据G en Bank上已登录的鲤疱疹病毒2型的O RF5基因序列(登录号:AFJ20457.1)设计1对引物,采用PCR扩增技术获得目的基因。序列分析表明,目的基因长357 bp,是一个完整的开放阅读框,编码119个氨基酸,理论分子质量为13 059.70 u,无信号肽,... 根据G en Bank上已登录的鲤疱疹病毒2型的O RF5基因序列(登录号:AFJ20457.1)设计1对引物,采用PCR扩增技术获得目的基因。序列分析表明,目的基因长357 bp,是一个完整的开放阅读框,编码119个氨基酸,理论分子质量为13 059.70 u,无信号肽,无跨膜区,含有4个抗原表位。将扩增片段克隆至原核表达载体p ET-32a中,并将获得的重组质粒转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。对表达蛋白进行复性纯化后免疫小鼠和异育银鲫,SD S-PAGE和W estern-blot检测分析表明,重组蛋白的分子质量约为33 ku,与预期相符,表达形式为包涵体,该蛋白能够与抗H is标签的抗体发生特异性反应,也能识别病毒粒子上的ORF5蛋白。对免疫的异育银鲫进行攻毒,结果显示注射生理盐水组的银鲫保护率为0,注射15、25、50 g重组蛋白组的保护率分别为20%、30%、35%,表明免疫重组蛋白组的保护率高于对照组。本研究证实了表达的融合蛋白具有一定的免疫原性,丰富了鲤疱疹病毒2型ORF5基因及基因组的研究,为研发制备新型鲤疱疹病毒2型的疫苗和诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒2型 ORF5截短基因 序列分析 克隆表达 攻毒保护试验
原文传递
基于近红外光谱分析技术快速检测白酒中的关键指标 被引量：28
3
作者 田育红 王凤仙 吴青 《酿酒》 CAS 2019年第5期93-96,共4页
介绍了一种基于近红外光谱分析技术快速检测酿酒生产中酒精度、总酸和总酯含量的分析方法,实验收集了具有足够代表性的680多个标准白酒样品,利用最小二乘法(PLS)回归分析,建立相应的模型,酒精度、总酸和总酯的相关系数分别达到0.9995、0... 介绍了一种基于近红外光谱分析技术快速检测酿酒生产中酒精度、总酸和总酯含量的分析方法,实验收集了具有足够代表性的680多个标准白酒样品,利用最小二乘法(PLS)回归分析,建立相应的模型,酒精度、总酸和总酯的相关系数分别达到0.9995、0.9576、0.9910,随后用模型对盲样验证,En值在-1^+1之间,说明近红外检测结果是可信的,近红外可以用在酿酒生产中快速准确检测关键性指标并指导生产。 展开更多
关键词 近红外 白酒 酒精度 总酸 总酯
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酒类产品中食品添加剂的检测检验 被引量：1
4
作者 张悦 《食品安全导刊》 2021年第19期64-64,66,共2页
在当前的酒类产品生产过程中,进行食品添加剂的有效检测能够切实地提高产品的质量,并保证产品的安全。有鉴于此,本文针对当前酒类产品中食品添加剂的检测检验进行了相应的分析,尤其是针对山梨酸、甜蜜素等添加剂的检测检验,以期对实际... 在当前的酒类产品生产过程中,进行食品添加剂的有效检测能够切实地提高产品的质量,并保证产品的安全。有鉴于此,本文针对当前酒类产品中食品添加剂的检测检验进行了相应的分析,尤其是针对山梨酸、甜蜜素等添加剂的检测检验,以期对实际工作提供一定的帮助。 展开更多
关键词 酒类产品 食品添加剂 检测检验
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如何加强酒类检测实验室科学管理
5
作者 田育红 《食品安全导刊》 2020年第15期65-65,共1页
在酒类生产中,检测实验室的主要职责就是利用感官和理化检测手段,对酿酒原料、辅料、中间品、半成品及成品的质量进行检验,指导和监督酒类生产的正常进行,不断改进和提高产品质量。本文就如何加强酒类检测实验室科学管理进行了初步的总... 在酒类生产中,检测实验室的主要职责就是利用感官和理化检测手段,对酿酒原料、辅料、中间品、半成品及成品的质量进行检验,指导和监督酒类生产的正常进行,不断改进和提高产品质量。本文就如何加强酒类检测实验室科学管理进行了初步的总结和分析。 展开更多
关键词 加强酒类检测技术 实验室 科学管理
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